GB/T 33118-2016 李叶蜂检疫鉴定方法

　　ICS 65. 020. 01 B 16

　　中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准

　　GB/T 33118—2016

　　李叶蜂检疫鉴定方法

　　Detection and identification ofHoplocampaflava (L. )

　　2016-10-13发布 2017-05-01实施

　　中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会

　　发

　　布

　　GB/T 33118—2016

　　前 言

　　本标准按照 GB/T 1. 1—2009给出的规则起草 。

　　本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归 口 。

　　本标准起草单位 : 中华人民共和国山东出入境检验检疫局 、中国检验认证集团 。

　　本标准主要起草人 :魏晓棠 、张京宣 、陈宏 、王惠 、王雪嵋 、鲁闽 、王简 、王建力 。

　　李叶蜂检疫鉴定方法

　　1 范围

　　本标准规定了李叶蜂 Hoplocampaflava (L. )的检疫鉴定方法 。

　　本标准适用于李叶蜂的检疫和鉴定 。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注 日期的引用文件 ,仅注 日期的版本适用于本文件 。凡是不注日期的引用文件 ,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件 。

　　SN/T 2959 昆虫常规检疫规范

　　3 术语和定义

　　下列术语和定义适用于本文件 。

　　3. 1

　　单眼三角区 ocellartriangle

　　昆虫成虫中三个单眼所在位置 ,形成三角形的小区 。

　　3.2

　　唇基 clypeus

　　昆虫头部位于额唇基沟和上唇之间的区域 。

　　3.3

　　翅痣 pterostigma

　　翅前缘上的加厚深色部分 ,一般位于接近径脉的中部或者末端 。

　　3.4

　　翅脉 veins

　　昆虫翅上的管状加厚的构造 ,用以加强翅面 。

　　注 : 主要包括前缘脉(costa “C”) 、亚 前 缘 脉(subcosta “Sc”) 、径 脉(radius “R”) 、径 分 脉(radial sector “Rs”) 、中 脉(media“M”) 、肘脉(cubitus “Cu”) 、横脉(crossvein)等脉序 。

　　3.5

　　闭室 closed cell

　　完全被翅脉所围绕的翅室 。

　　注 : 主要有上闭室(Rs室) 、下闭室(M 室) 。

　　3.6

　　孤雌生殖 parthenogenesis

　　卵未经受精而直接发育成新个体的生殖方式 。

　　3.7

　　阳茎瓣 penisvalve

　　第九腹节腹板后节间膜的外长物 ,生殖孔开口在它的末端 。一般位于阳茎两侧 ,一对 。

　　GB/T 33118—2016

　　3. 8

　　产卵器 ovipositor

　　雌虫用于产卵的器官 ,是位于腹部末端的刀片状构造 , 由 4个产卵瓣组合而成 。

　　注 : 其中腹侧的 1对产卵瓣称为锯腹片(Lancet) ,其腹缘具锯齿状构造 。

　　4 李叶蜂基本信息

　　学名 :Hoplocampaflava (L. )

　　别名 :黄实蜂

　　异名 :Tenthredoflava Kulg

　　英文名:plum sawfly

　　分类地位 :膜翅目 Hymenoptera,叶蜂科 Tenthredinidae,突瓣叶蜂亚科 Nematinae,实蜂属 Hoplo- campa。

　　李叶蜂以卵 、幼虫随寄主传带为主要的传播途径 ,其地理分布 、寄主和生物学特征等参见附录 A。

　　实蜂属在全世界目前已知有 44个种 。Benson(1968)将本属分为 3 个种组 , 即 Hoplocampatestu- dinea种组 、H.oregonensis种组和 H.flava 种组 。H.flava 种组包括 10个已知种 ,具有重要经济意义的主要有李叶蜂 H. flava、樱 桃 叶 蜂 H. cookei和 李 小 叶 蜂 H.minuta,三 者 的 主 要 区 分 特 征 参 见 附录 B。

　　5 方法原理

　　根据李叶蜂的为害状 、形态特征进行种类鉴定 。在检疫现场时 ,仔细观察寄主果实 ,若发现疑似李叶蜂幼虫 ,需连同被危害寄主一起送实验室饲养获得成虫 ,利用体视显微镜进行观察鉴定 。如果利用外部形态特征判定其种类仍有疑问时 ,需进一步解剖雌雄成虫外生殖器并制成玻片标本 ,在生物显微镜下观察鉴定 。

　　6 器材和试剂

　　6. 1 器材

　　可封口塑料袋 、标签 、吸水纸 、镊子 、手持放大镜 、生物培养箱 、小毛笔 、指形管 、纱布 、冰箱 、三角纸剪刀 、昆虫针 、滴管 、培养皿 、载玻片 、盖玻片 、体视显微镜 。

　　6.2 试剂

　　霍氏封固剂(用阿拉伯树胶 30 g ∶ 蒸馏水 50 mL ∶ 水合氯醛 200 g ∶ 甘油 20 mL配方配制而成) 、树脂胶 、无水乙醇 、5%氢氧化钠或氢氧化钾 、蒸馏水 。

　　7 检测与饲养

　　7. 1 检测

　　按照 SN/T 2959对寄主植物进行检查 。若发现可疑幼虫 , 需 连 同 被 害 果 实 一 起 装 入 可 封 口 塑 料袋 ,并加注标签 ,注明时间 、地点 、寄主 、采集人等 。

　　7.2 饲养

　　将带有幼虫的果实放入光照培养箱中的养虫笼内 ,在 22 ℃ ~ 28 ℃ 、相对湿度 65% ~ 75%、光照周期(LD)14h ∶ 10 h 的条件下饲养至成虫羽化 。饲养时 , 可在养虫笼内放一些瓦楞纸板或蜂窝纸板 ,供幼虫化蛹用 。每天观察 ,需要时再放几个同种类果实 , 以备幼虫转果 。

　　8 标本的制作

　　8. 1 成虫标本

　　8. 1. 1 针插标本

　　将羽化后成虫冷冻杀死(可置于冰箱 -20℃下 1 h左右) ,软化后在展翅板上展翅 ,制成针插标本 。干成虫标本需回软化后制作 。

　　8. 1.2 浸渍标本

　　用 70%乙醇浸泡保存成虫或幼虫标本 。如果要备分子试验用 ,则可用无水乙醇浸泡 ,并冷冻保存 。

　　8.2 雄外生殖器玻片标本

　　用昆虫针取下雄虫腹部投入 10%氢氧化钠或氢氧化钾溶液中煮沸 5 min~ 10 min(体视显微镜下观察 ,虫体几近透明 ,仅留下外骨骼部分为佳) ;用滴管吸移至有薄层蒸馏水的培养皿中浸洗 ;在体视显微镜下(载物台为白色背景)用细针解剖 ,除去背腹板等物 ,仅剩第九背板及其附属构造(雄外生殖器) ;用针尖粘取第九背板及其附属构造至载玻片上霍氏封固剂中 ,体视显微镜下整姿 ,尽量使雄外生殖器构造在视野中为正面图像 ;封片 ; 自然干燥或在 40 ℃ ~45 ℃烘箱中干燥 。

　　9 实验室鉴定

　　9. 1 叶蜂科成虫鉴定特征

　　触角 7节 ~ 10节 ,大多数 9节 ,通常为鞭状 、丝状或者棍棒状 ,第 1 节短于第 3 节 ;触角窝接近额唇基沟 。前胸背板后缘深凹 ,前胸腹板游离 , 中胸小盾片具明显附片 ,后胸侧板不与腹部第 1 背板愈合 。前足胫节端距 1对 , 内距常分叉 ,各足胫节无亚端距 。前翅前缘室狭窄 ,2 R 脉常存在 ,至少具 1 个完整的端臀室 。后翅通常具 5个 ~ 7个封闭翅室 。腹部背板无侧缘脊 ,第 1 背板常具中缝 。产卵器短小 , 常稍伸出腹部末端 。

　　9.2 实蜂属鉴定特征

　　成虫小型 ,唇基前缘具深浅不等的缺 口 ,非平截 。额区圆钝 ,不向前突出 。复眼较小 , 内缘间距宽于复眼长径 。触角 9节 ,总长短于腹部 ,第 2节长明显大于宽 ,各节长宽比不大于 4。上颚端部具 2 齿 ,颚眼距不窄于单眼直径 。后足跗节稍短于后 3节长度之和 ;爪有明显的小内齿 。前翅(参见图 1)具有 2 R脉 ,1 M-Cu 和 2 M-Cu脉分别交于 1 Rs和 2 Rs室内 ,臀室具收缩中柄 ;后翅具上闭室(Rs室)和下闭室(M室) ,臀室封闭 ,臀室柄长 。产卵器骨化程度弱 ,节缝刺突种类间有变化 ,常有近腹缘距 。

　　成虫翅透明或具弱烟斑 ,翅脉颜色变化大 ,有黄白色 、栗色和黑色等 。成虫体色在种类间常有明显且较稳定的差别 ,可用于种类鉴定 。

　　幼虫大部分为白色 ,也有黄绿色 ,头部及尾部颜色深 。体长 9 mm~ 15 mm ,胸足 3 对 ,腹足 6 对 ~ 8对 。

　　注 : 引 自 Norton。

　　图 1 实蜂属[Hoplocampa (Norton)]雌虫前翅翅脉图

　　9.3 李叶蜂的鉴定特征

　　9.3. 1 成虫

　　将成虫标本置于体视显微镜下 ,雄外生殖器玻片标本置于生物显微镜下 ,观察是否符合以下鉴定特征(参见附录 B 和附录 C) :

　　— 体长 3. 5 mm~ 5. 5 mm ,体表黄色 ;

　　— 触角 9节 ;

　　— 复眼细长 。唇基宽浅内凹 ,其深度不及唇基长的一半 ,顶缘深凹 。唇基前缘缺口近似三角形 ,深度约等于唇基长的一半 ;

　　— 颚眼距稍短于前单眼直径 ;

　　— 头部背侧 、胸部背板大部 、中胸侧板上半部具较细密小刻点 ;

　　— 中胸侧板密被毛 ,毛被均匀 ,侧板下部无光裸横带 ;

　　— 雌虫头胸部暗黄褐色 , 中 胸 背 板 无 黑 斑 , 后 胸 背 板 凹 处 黑 褐 色 , 触 角 、足 和 腹 部 浅 黄 褐 色 , 有光泽 ;

　　— 雄虫单眼区 、前胸背板横沟 、中胸背板前叶大部 、后胸背板大部 、胸部侧板沟缝黑褐色 。 头部 、触角和中胸背板主要为棕色 ,但是有时头顶和中胸背板有黑斑 ;

　　— 两性翅透明 ,翅脉为黄色 ,前翅基部的翅痣为黑色 。翅痣下无明显暗褐色横带 ,带内黄色 ,带外透明 ;前缘脉 ,亚前缘脉和痣基为黄色 。前翅基部 2/3微呈烟黄色 ,翅脉和翅痣黄褐色 ;

　　— 腹部橘黄色 ;

　　— 后足跗节稍短于胫节 ,爪具微小内齿 ;

　　— 雌虫产卵器显著短于后足胫节 ,稍短于后足跗节 ;

　　— 雄虫下生殖板长大于宽 ,端部宽圆 ,弧形突出 ; 阳茎瓣具强烈弯曲的细长端突 。

　　9.3.2 卵

　　白色 , 肾形 ,长 ,半透明 。

　　9.3.3 幼虫

　　体长 8 mm~ 11 mm , 圆柱状 ,略弯 , 白色至黄绿色 。头部橙色或者褐色 。幼虫蜕皮 4 次后 ,末龄幼虫体长达 6 mm~ 8 mm。腹足 7对 ,浅黄色 。

　　10 结果判定

　　以成虫的形态特征为判定依据 , 以卵 、幼虫的形态特征为参考 。 同时符合 9. 1、9. 2、9. 3. 1 特征的可判定为李叶蜂 。

　　11 标本保存

　　经过鉴定的李叶蜂标本应永久保存 ,并加注明时间 、地点 、寄主 、采集人等信息的标签 。

　　附 录 A

　　(资料性附录)

　　李叶蜂的其他信息

　　A. 1 地理分布

　　主要分布在西欧、小亚细亚和巴勒斯坦 ,前苏联的欧洲部分以及波罗的海和高加索地区 。有奥地利、比利时、英国、保加利亚、法国、德国、希腊、匈牙利、爱尔兰、意大利、卢森堡、荷兰、罗马尼亚、西班牙、瑞典、瑞士、斯洛文尼亚、克罗地亚、塞尔维亚、波斯尼亚、马其顿、黑山、以色列、黎巴嫩、土耳其、摩尔多瓦、克里米亚、白俄罗斯、捷克、丹麦、爱沙尼亚、约旦、波兰、俄罗斯、斯洛伐克、乌克兰、拉脱维亚和伊朗等地 。

　　A.2 寄主植物

　　杏(Prunusarmeniaca L. )和李(Prunussalicina Lindl) 。

　　A.3 生物学特性及传播途径

　　每年一代 。成虫寿命 8 d~ 15 d。每头雌虫产卵大约 50粒 ~ 60粒 。 卵期 10 d~ 14 d。幼虫 5 龄 ,历期 25 d~ 38d。 当花萼掉落 ,幼虫孵出 ,离开果萼 ,钻入果实 ,直达果核(见图 A. 1) 。下一个阶段的危害主要在其他的果实上 。老熟后 ,坠入土中并做茧 。在 5 cm~ 8 cm 深的土中滞育至来年的 2 月化蛹 。成虫出现在 3 月 ~4 月 ,产卵于花萼内 。

　　在伊朗 ,老熟幼虫在地下越冬 ,冬季中 , 晚期化蛹 , 在即将开花的时节羽化 , 可用白色的粘卡诱集 。盛花时期成虫最多 。产卵于果实上或者花萼的基部 。

　　该虫以幼虫随被害果实远距离传播和扩散 。

　　A.4 李叶蜂的为害状

　　幼虫为害发育中的果实 ,果实的被害率高达 50% ~ 90% 。被害果实有 1个 ~ 2个虫孔 ,往往造成果实提前脱落 。

　　注: 引自 http://pic.sogou. com/d? query=hoplocampa。

　　图 A. 1 李叶蜂寄主(杏)为害状

　　附 录 B

　　(资料性附录)

　　李叶蜂成虫及近似种鉴别检索表

　　Hoplocampa属分种组检索表

　　唇基前缘缺口深 ,其深度至少达唇基长的 1/2(H. pyricola 唇基缺口深度短于唇基 1/2长) ; 中 胸前侧片下半部和中胸腹板至少部分光裸无毛 ;复眼较小 ,前缘间距总是宽于复眼长径 1. 25倍 。 基本上危害梨果类 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … H.testudinea种组2. 前面观复眼内缘向下明显分歧 ,下缘间距宽于 1. 5倍复眼长径 ; 中胸前侧片和中胸腹板大部分光 裸无毛 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … H.oregonensis种组 前面观复眼内缘向下互相近似平行 ,下缘间距窄于 1. 5倍复眼长径 ; 中胸前侧片和中胸腹板密生毛被 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … H.flava 种组

　　李叶蜂及其近似种区分检索表

　　1. 触角和虫体主要黄褐色 ,虫体局部具小型黑块或条带 ;翅脉浅褐色至黄褐色 ;唇基缺口深度不浅于唇基 1/2长 ;雄虫阳茎瓣具弯曲的细长端突 ,长度不短于阳茎瓣头叶 … 李叶蜂 H.flava L.

　　附 录 C

　　(资料性附录)

　　李叶蜂的形态特征

　　李叶蜂的形态特征见图 C. 1~ 图 C. 5。

　　注: 引自 http://www. agroatlas. ru/en/content/pests。

　　图 C. 1 李叶蜂成虫正面观和侧面观

　　注: 引自 http://www. agroatlas. ru/en/content/pests。

　　图 C.2 李叶蜂幼虫及寄主为害状

　　注 : 引 自 Rohwer。

　　图 C.3 李叶蜂翅脉特征图

　　注 : 引 自 Benson。

　　图 C.4 李叶蜂头部前面观

　　说明 :

　　1— 李叶蜂雄虫腹部末端上面观 ;

　　2— 阳茎瓣 。

　　注 : 引 自 Benson。

　　图 C.5 李叶蜂雄虫腹部末端上面观及阳茎瓣

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