GB/T 33123-2016 斜纹卷蛾检疫鉴定方法

　　ICS 65. 020. 01 B 16

　　中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准

　　GB/T 33123—2016

　　斜纹卷蛾检疫鉴定方法

　　Detection and identification ofCtenopseustisobliquana (Walker)

　　2016-10-13发布 2017-05-01实施

　　中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会

　　发

　　布

　　GB/T 33123—2016

　　前 言

　　本标准按照 GB/T 1. 1—2009给出的规则起草 。

　　本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归 口 。

　　本标准起草单位 : 中 华 人 民 共 和 国 山 东 出 入 境 检 验 检 疫 局 、中 华 人 民 共 和 国 珠 海 出 入 境 检 验 检疫局 。

　　本标准主要起草人 :张京宣 、魏晓棠 、尼秀媚 、白桦 、衣维贤 、粟智平 、廖力 、王建力 。

　　斜纹卷蛾检疫鉴定方法

　　1 范围

　　本标准规定了斜纹卷蛾 Ctenopseustisobliquana (Walker)的检测 、饲养 、标本制作和鉴定方法等 。本标准适用于斜纹卷蛾的检测 、饲养和鉴定 。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注 日期的引用文件 ,仅注 日期的版本适用于本文件 。凡是不注日期的引用文件 ,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件 。

　　SN/T 2959 昆虫常规检疫规范

　　3 术语和定义

　　下列术语和定义适用于本文件 。

　　3. 1

　　翅斑 speckle

　　由鳞片排列成的斑纹 。

　　注 : 在翅基部的为基斑 ,翅中部的为中带 ,靠翅外缘前端的为端纹 。

　　3.2

　　抱器瓣 valva

　　鳞翅目雄性外生殖器中两侧成对的由第九腹节演变而来的片状结构 ,大而显著 。

　　3.3

　　抱器端 cucullus

　　鳞翅目雄性外生殖器中 ,抱器瓣的背面端部区域 。

　　3.4

　　阴片 sterigma

　　鳞翅目雌性生殖系统中围绕交配孔周围的骨化结构 ,其中包括前阴片和后阴片 。

　　3.5

　　背兜 tegumen

　　鳞翅目雄性外生殖器中形似屋脊状或头巾状结构 , 由第 9腹节背板演变形成 。

　　3.6

　　爪形突 uncus

　　背兜后端向下弯曲的片状或者钩状结构 ,发达 ,上面有毛 。

　　3.7

　　颚形突 gnathos;scaphium;subscaphium

　　又称 “下齿形突 ”, 由背兜后缘发生的一对附器 ,位于爪形突之下 ,并可以向下向后围绕肛管 ,在其下方中央会合 。

　　GB/T 33123—2016

　　3. 8

　　尾突 socius

　　在爪形突两侧基部下垂的凸出部分 ,大而明显 。

　　3.9

　　囊导管 ductusbursae

　　鳞翅目雌性生殖系统中由阴门伸至交配囊的导管 。

　　3. 10

　　囊突 signum

　　鳞翅目雌性生殖系统中交配囊壁内高度骨化的刺状或小钩状构造 ,1个或数个 。

　　4 斜纹卷蛾基本信息

　　中文名 :斜纹卷蛾 。

　　别名 :棕头卷叶蛾 。

　　学名:Ctenopseustisobliquana (Walker) 。

　　英文名 :oblique tortrix,light-brown apple moth,apple laef roller。

　　异 名 : Teras obliquana Walker, Teras spurcatana Walker, Sciaphila transtrigana Walker, Sciaphila turbulentana Walker, Tortrix ropeana Felder & Rogenhofer , Tortrix herana Felder & Rogenhofer,Cacoecia charactana Meyrick,Cacoeciainana Meyrick。

　　分类地位 :属鳞翅目 Lepidoptera,卷蛾科 Tortricidae,黄卷蛾族 Archipini,Ctenopseustis属 。

　　斜纹卷蛾幼虫为杂食性害虫 ,主要以幼虫为害幼果和收获后的果实 ,也可以取食嫩梢 、叶 、茎和芽等 。 主要以幼虫藏匿于果萼部位远距离转播扩散 。其寄主 、地理分布和生物学特性参见附录 A。

　　该属中具有重要经济意义的种类除斜纹卷蛾 C.obliquana (Walker) 外 ,还主要有以下 4 种 :C. ser- vana Walker;C.herana Felder & Rogenhofer;C. filicis Dugdale;C. fraterna Philpott,其区分特征参见附录 B 和附录 C。

　　5 方法原理

　　根据斜纹卷蛾的为害状 、生物学特性和形态特征进行种类鉴定 。在检疫现场仔细检查寄主植物 ,如果发现幼虫或蛹 ,需送实验室饲养至成虫 ,利用体视显微镜进行观察鉴定 。如果利用外部形态特征判定其种类仍有疑问时 ,需进一步解剖雌雄成虫外生殖器并制成玻片标本 ,在生物显微镜下观察 。

　　6 器材和试剂

　　6. 1 器材

　　可封口塑料袋 、标签 、吸水纸 、镊子 、光照培养箱 、小毛笔 、指形管 、纱布 、冰箱 、剪刀 、刀片 、昆虫针 、滴管 、培养皿 、载玻片 、盖玻片 、体视显微镜 、生物显微镜 。

　　6.2 试剂

　　霍氏封固剂(用阿拉伯树胶 30 g ∶ 蒸馏水 50 mL ∶ 水合氯醛 200 g ∶ 甘油 20 mL配制而成) 、幼虫

　　保存液[甘油 ∶ 福尔马林 ∶ 乙醇(体积比)= 1 ∶ 1 ∶ 1 配制而成] 、树脂胶 、无水乙醇 、75%乙醇 、85%乙

　　7 检测与饲养

　　7. 1 检测

　　根据斜纹卷蛾的为害状对寄主植物进行检查 。观察寄主有无虫蛀孔与蛀屑或者有疑似虫道 ,重点观察叶片 、果实 、花或者幼茎 ,如发现疑似幼虫 、蛹粒 , 用刀片等工具进行剖检后 , 可疑虫体用指形管盛装 ; 同时 ,注意检查集装箱或者包装材料的缝隙处是否有可疑虫体 。如发现上述幼虫或者蛹粒 ,用可封口塑料袋装 。上述管、袋均加标签 ,或编号 ,记录时间、地点、寄主、采集人等 ,带回实验室 ,按照 SN/T 2959进行检测 。

　　7.2 饲养

　　将幼虫连同寄主植物一起放入养虫笼内 ,蛹盛于指形管中 ,用纱布扎 口 , 防止羽化成虫逃逸 ,放入光照培养箱中 20 ℃ ~ 25 ℃ ,在相对湿度 70% ~ 75%的条件下培养至成虫 。

　　8 标本的制作

　　8. 1 成虫标本

　　8. 1. 1 针插标本

　　将羽化后成虫冷冻杀死(可置于冰箱 -20℃下 1 h左右) ,软化后在展翅板上展翅 ,制成针插标本 。干成虫标本需回软后制作 。

　　8. 1.2 浸泡标本

　　幼虫一般制作浸泡标本 。将幼虫清洗干净后保存在幼虫保存液中 。如果要备分子试验用 ,则可用无水乙醇浸泡幼虫或成虫 ,并冷冻保存 。

　　8.2 展翅标本的制作

　　用手术剪剪下成虫的翅膀 ,放入 75%的乙醇中 ,用小毛笔小心刷去鳞片 ,再顺次放入 75%、85%、 95%的乙醇和无水乙醇中脱水各约 10 min,然后放入醋酸红溶液中染色约 5 min,最后置于二甲苯中透明 ,再放到载玻片上整形 ,滴一滴封片胶 ,盖上盖玻片 ,风干 。

　　8.3 成虫外生殖器玻片标本

　　用昆虫针取下成虫腹部投入 10%氢氧化钠或氢氧化钾溶液中煮沸 5 min~ 10 min(体视显微镜下观察 , 以骨质部分保留深色 、肌肉脂肪等溶解为佳) ;用滴管吸移至培养皿装薄层蒸馏水中浸洗 ;在体视显微镜下(载物台为白色背景)用细针解剖 ,除去背腹板等物 ,仅剩第 9 背板及其附属构造(成虫外生殖器) ;用针尖粘取第 9 背板及其附属构造至载玻片上霍氏封固剂滴中 ,体视显微镜下整姿 ,尽量使成虫外生殖器构造在视野中为正面图像 ;封片 ; 自然干燥或用烘箱 45 ℃ ,24h烘干 。

　　9 实验室鉴定

　　将成虫标本置于体视显微镜下 ,成虫外生殖器玻片标本置于生物显微镜下 ,观察是否符合以下鉴定特征(参见附录 D 和附录 B) 。

　　9. 1 Ctenopseustis属成虫鉴别特征

　　下唇须长度约为复眼的 2 倍 ~ 4 倍 ;雌雄均具单眼 ,头顶与额上部鳞片突起 ;成虫休息时翅平覆体背 ;雄虫前翅具有前缘褶 ,后翅具有肘栉 ; 雄虫外生殖去爪形突铲状 , 尾突棍棒状 ,抱器长方形 , 阳茎弯曲 ,端部具有微刺 , 中部具有阳茎针 。

　　9.2 斜纹卷蛾成虫的鉴别特征

　　9.2. 1 雌虫

　　体长约 8 mm~ 12 mm ,翅展约 20 mm~ 28 mm。触角粗壮 ,锯齿状 ,具有纤毛 。触角 5 节 ~ 10节基部具有黑色鳞片 。下唇须前伸(参见附录 D) ,长度变化大 ,下唇须约为复眼长的 3. 0 倍 。具有单眼 ;头顶与额上部鳞片突起 ;胸 、肩鳞片平覆体表 。翅深褐色到浅褐色 ,翅面斑纹变异大 ,前翅有一斜纹从前缘斜向后伸 ,雌虫的斜纹更加明显 ,成虫休息时翅平覆体背 。翅脉 :前翅 M 脉干和索脉退化 ;前翅外缘M1 、M2 脉处略凹 ; R4 和 R5 不共柄;R4 脉止于前缘脉 ,R5 止于外缘;R5 与 M1 脉有时共柄; M1 和 M2不共柄;R1 由中室上缘中部发出 ,R2 在中室三分之二处发出 ,CuA2 约在中室下缘四分之三处发出 。后翅具有肘栉;R5 和 M1 发自中室顶角;M2、M3 和 CuA1 发自中室下角;CuA2 发自中室下缘四分之三出处 。雌虫外生殖器 :囊导管呈 S状 ,与交配囊连接处膨大 ;管带长 ,变化大 ,一般超过囊导管长度的三分之一 ;囊突 、囊导管端片 、管带骨化程度高 ,囊突爪状 ,顶端部具有明显的木塞状突起 。

　　9.2.2 雄虫

　　体长约 7 mm~ 11 mm ,翅展约 17 mm~ 24 mm。触角粗壮 ,锯齿状 ,具有纤毛 。触角 5 节 ~ 10节基部不具有黑色鳞片 。下唇须前伸 ,长度变化大 ,下唇须约为复眼长的 2. 25倍 ~ 2. 75倍 。具有单眼 ;头顶与额上部鳞片突起 ;胸 、肩鳞片平覆体表 。翅深褐色到浅褐色 ,翅面斑纹变异大 ,前翅有一斜纹从前缘斜向后伸 ,雄虫的斜纹无雌虫明显 ,成虫休息时翅平覆体背 。翅脉 : 同雌虫 ,雄虫前缘褶约为前翅长度的一半 。雄虫外生殖器 :抱器长方形 ,抱器背基突锯齿状 ;爪形突匙状 ,具软毛 ; 尾突棍棒状 ; 颚形突臂细长 ,末端合并呈平的铲状 ; 阳茎基环近方形 ,前端中部凹陷 ,底部较宽 ; 阳茎弯曲 ,端部具有微刺 , 中部具有阳茎针 ,14条 ~ 22条 ; 阳茎端膜基部圆形凸出 ,手指状 。

　　9.3 卵

　　呈块状 。初产时呈浅绿色 ,接近孵化时浅黄色 。约 0. 7 mm~ 1. 0 mm。

　　9.4 幼虫

　　幼虫粗壮 , 圆筒形 ,两端逐渐变小 ;浅绿色 ,背面浅蓝色 。两侧及分节部分浅黄色 ;体表斑点比较暗淡 ;老熟幼虫头部可见红褐色斑纹 ,幼虫头多为深褐色或黑色 ,后缘锯齿状 ,第二分节淡绿色 ,后缘和尾角具有黑色斑纹 。

　　9.5 蛹

　　长约 10 mm~ 13 mm , 刚化蛹时为鲜绿色 ,很快变为浅褐色 ,羽化前为深褐色 。

　　10 结果判定

　　以成虫的外部形态特征 ,雌虫 、雄虫的外生殖器为主要的鉴定依据 , 以幼虫 、卵和蛹的形态特征为参考 ,符合 9. 2. 1 和 9. 2. 2 的可判定为斜纹卷蛾 。

　　11 标本保存

　　经过鉴定的斜纹卷蛾成虫作针插标本 ,幼虫作浸泡标本 ,建议永久保存 ,并加注明时间 、地点 、寄主 、采集人等信息的标签 。

　　附 录 A

　　(资料性附录)

　　斜纹卷蛾的其他信息

　　A. 1 地理分布

　　主要分布在新西兰境内 ,新西兰北部岛屿和南部岛屿的西海岸 ,是霍克斯湾(Hawkes Bay) 、吉斯伯恩(Gisborne) 、怀卡托(Waikato)和尼尔森(Nelson) 等地苹果上的主要害虫 ; 现已在美国夏威夷发现并定殖 。我国 目前未见有分布报道 。

　　A.2 寄主植物

　　斜纹卷蛾寄主主要为苹果(Malus sylvestris) 、草莓(Fragaria ananassa) 、柑橘(Citrus L. ) 、葡萄(Vittisvinigera) 、悬钩子(FructusRubi) 、柿(Diospyroskaki) 、李 子(Prunus spp.) 、越 橘(Vaccinium spp.) 、猕猴 桃 (Actinidia deliciosa) 、鳄 梨 (Persea americana) 、松 树 (Pinus spp.) 、合 欢 树 (Acacia spp.) 、车前草(Plantago spp.) 、常春藤(Hedera helix) 、玫瑰(Rosa spp.) 、三叶草(Trifolium spp.) 等20余科植物 。

　　A.3 传播途径

　　成虫产卵于寄主叶片表皮下 ,幼虫孵出后即潜食叶肉 , 主要为害上表皮下的栅栏组织 , 叶上表面可见弯曲缠绕的虫道 ,幼虫老熟后脱出 ,在土中或叶片上化蛹 。成虫取食叶片汁液 ,交配 、产卵 ;幼虫为害叶 、嫩芽 、花及果实 。

　　近距离传播主要靠成虫飞行 ,远距离主要以卵 、幼虫和蛹等随寄主叶片或果实传带是主要的传播途径 。

　　A.4 生物学特性

　　在新西兰 ,该虫 1 年发生 4 代 。幼虫为杂食性害虫 , 寄主超过 100多个种类 。 主要为害寄主的叶片 、花 、幼果 、成果以及嫩芽等 。该虫尤喜欢寄生苹果(见图 A. 1) 。

　　斜纹卷蛾幼虫为 4龄 , 以 2 龄 ~4龄在土层 、落叶 、果芽或者有时在树皮下越冬 ,并老熟幼虫化蛹时间大约在春末夏初 。在新西兰南部 ,该虫每年可发生 2个世代 ,在 11月 中旬开始羽化并在 12月到来年的 1 月开始扩散 ,雄虫羽化时间稍早于雌虫 ;第二代的羽化时间从 2 月 ~ 5 月 。在新西兰北部地区 ,该虫每年可发生 4个世代 ,越冬的世代在 12月前完成羽化 ,第二代成虫发生在 1 月到 3 月上旬 ,并且与第三或者第四代的成虫在 7 月发生重叠 。雌虫一般只交配一次并且通常在次日产卵 ,在数日后达到产卵的高峰 。 当 20 ℃左右时 ,大约 3周 ~4周卵就在叶片上表面开始孵化 ;幼虫 1 周 ~ 2 周内完成孵化 ,并扩散到叶下表面取食 ;幼虫逐渐发育后主要通过卷叶取食 。 当温度 20 ℃左右时 ,幼虫在苹果叶片上完全发育大概需要 30 d。

　　在室内 10℃ ~ 30℃情况下 ,斜纹卷蛾卵 、幼虫和蛹的历期分别为 8. 7 d、37. 4 d(雄)或 41. 2 d(雌)和14. 9 d(雄)或 13. 3 d(雌) 。雄蛹和雌蛹分别重 50. 5 mg和 68. 2 mg。每雌平均产卵 670粒 。发育起点温度和有效积温分别为卵 7. 8 ℃和 105 d℃ ,幼虫 5. 2 ℃和 538d℃ ,蛹 7. 2 ℃和 186 d℃ 。

　　注: 引自 http://upload. wikimedia.org/wikipedia。

　　图 A. 1 斜纹卷蛾 Ctenopseustisobliquana (Walker)幼虫在苹果上的为害状

　　附 录 B

　　(资料性附录)

　　斜纹卷蛾及其近似种成虫检索表

　　成虫非黑咖啡色或者紫棕色 ,翅斑变化大 ;雄虫触角 5 节 ~ 10节基部不具有黑色的鳞片 … …

　　… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 斜纹卷蛾 C.obliquana Walker

　　附 录 C

　　(资料性附录)

　　斜纹卷蛾及其近似种成虫形态图谱

　　斜纹卷蛾及其近似种成虫形态图谱如图 C. 1~ 图 C. 8所示 。

　　注: 引自 http://en. wikipedia. org/wiki/Ctenopseustis_

　　servana。

　　图 C. 1 C.servana 雄虫

　　注: 引自 http://en. wikipedia. org/wiki/Ctenopseustis_ herana。

　　图 C.3 C.herana雄虫

　　注: 引 自 http://en. wikipedia.org/wiki/Ctenopseustis_

　　servana。

　　图 C.2 C.servana 雌虫

　　注: 引 自 http://en. wikipedia.org/wiki/Ctenopseustis_ herana。

　　图 C.4 C.herana雌虫

　　注: 引自 http://en. wikipedia. org/wiki/Ctenopseustis_ filicis。

　　图 C.5 C.filicis雄虫

　　注: 引自 http://en. wikipedia. org/wiki/Ctenopseustis_ fraterna。

　　图 C.7 C.fraterna雄虫

　　注: 引 自 http://en. wikipedia.org/wiki/Ctenopseustis_ filicis。

　　图 C.6 C.filicis雌虫

　　注: 引 自 http://en. wikipedia.org/wiki/Ctenopseustis_ fraterna。

　　图 C. 8 C.fraterna雌虫

　　附 录 D

　　(资料性附录)

　　斜纹卷蛾的重要形态特征

　　斜纹卷蛾的重要形态特征如图 D. 1~ 图 D. 11所示 。

　　注: 引自 http://en. wikipedia. org/wiki/Ctenopseustis_ obliquana。

　　图 D. 1 斜纹卷蛾雄虫

　　注 : 引 自 Gereen。

　　图 D.3 斜纹卷蛾翅脉

　　注: 引 自 http://en. wikipedia.org/wiki/Ctenopseustis_ obliquana。

　　图 D.2 斜纹卷蛾雌虫

　　注 : 引 自 Dugdule。

　　图 D.4 斜纹卷蛾前缘褶与翅长比较

　　注 : 引 自 Gereen。 注 : 引 自 Gereen。

　　图 D.5 斜纹卷蛾头部及下唇须 图 D.6 斜纹卷蛾雌虫外生殖器

　　注 : 引 自 Gereen。 注 : 引 自 Gereen。

　　图 D.7 斜纹卷蛾雄虫外生殖器 图 D. 8 斜纹卷蛾雄虫阳茎

　　注: 引自 http://en. wikipedia.org/wiki/Ctenopseustis_obliquana。

　　图 D.9 斜纹卷蛾幼虫

　　注: 引自 http://en. wikipedia. org/wiki/Ctenopseustis_ obliquana。

　　图 D. 10 斜纹卷蛾雄虫蛹

　　注: 引 自 http://en. wikipedia.org/wiki/Ctenopseustis_ obliquana。

　　图 D. 11 斜纹卷蛾雌虫蛹

　　参 考 文 献

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