GB/T 28074-2011 苹果蠹蛾检疫鉴定方法

　　ICS 65. 020. 01 B 16

　　中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准

　　GB/T 28074—2011

　　苹果蠹蛾检疫鉴定方法

　　Detection and identification ofCydiapomonella(L. )

　　2011-12-30发布 2012-06-01实施

　　中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会

　　

　　发

　　

　　布

　　GB/T 28074—2011

　　前 言

　　本标准按照 GB/T 1. 1—2009给出的规则起草 。

　　本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271) 提出并归 口 。

　　本标准起草单位 : 中国检验检疫科学研究院 、中华人民共和国新疆出入境检验检疫局 、中华人民共和国广东出入境检验检疫局 、中华人民共和国吉林出入境检验检疫局 、中华人民共和国山西出入境检验检疫局 、中华人民共和国北京出入境检验检疫局 。

　　本标准主要起草人 : 陈乃中 、张祥林 、梁帆 、曹逸霞 、魏春艳 、李惠萍 、李建光 、张伟 、张俊华 、马菲 。

　　Ⅰ

　　GB/T 28074—2011

　　苹果蠹蛾检疫鉴定方法

　　1 范围

　　本标准明确了苹果蠹蛾 Cydiapomonella(L. ) 的取样 、饲养 、成虫生殖器解剖和鉴定等方法 。

　　本标准适用于进出境植物检疫 、国内植物检疫和大田防治工作中的苹果蠹蛾的取样 、饲养和鉴定 。

　　2 苹果蠹蛾基本信息

　　学名 Cydiapomonella (L. ) 。

　　异名 Laspeyresiapomonella L. 。

　　俗名 codling moth。

　　属鳞翅目 Lepidoptera,卷蛾科 Tortricidae,新小卷蛾亚科 Olethreutinae,小食心虫族 Grapholitini,小卷蛾属 Cydia。

　　幼虫随果实传带是主要传播途径 ,老熟幼虫或蛹也可能随包装材料传带 。

　　相关种 类 有 苹 果 异 形 小 卷 蛾 Cryptophlebia leucotreta( Meyrick) 、樱 小 卷 蛾 Cydia packardi (Zeller) 、苹小食心虫 Cydiainopinata Heinrich、李小食心虫 Cydiafunebrana(Treitschke) 和梨小食心虫 Cydiamolesta(Busck) 等 。

　　苹果蠹蛾的其他信息参见附录 A。

　　3 方法原理

　　根据苹果蠹蛾的危害状 ,在检疫现场或发生苹果蠹蛾的果园肉眼观察寄主果实 , 取得幼虫或蛹虫样 ,饲养蛹获得成虫 ,解剖制作外生殖器标本 ,用显微镜观察 ,根据形态特征对种类进行判定 。如果有可资鉴定的老熟幼虫 ,可根据老熟幼虫鉴定 ;如果仅发现蛹 ,则将蛹饲养出成虫再做鉴定 ;如果成虫前翅鳞片不够完整不能准确判断 ,则进行外生殖器解剖再做鉴定 。

　　4 器材与试剂

　　70%酒精 、体视显微镜 、手持放大镜 、昆虫针 、解剖刀 、解剖针 、载玻片 、盖玻片 、塑料盒(管) 、细沙 、小毛笔 、玻璃纸 、展翅板 、10%氢氧化钠 、酒精 、二甲苯 、加拿大胶 、乙醚 、氰化钾毒瓶 、控温控湿培养箱 。

　　5 检测与饲养

　　5. 1 果实表面检查

　　肉眼观察或用手持放大镜观察寄主果实表皮有无细小突起伤疤 、虫孔 、虫粪或流胶 。

　　5. 2 剖果检查

　　将疑似被害果实 ,用解剖刀将果实剖开 ,检查果实内是否有幼虫(见附录 B) 。 如发现疑似幼虫 ,用70%酒精浸泡 ,带回实验室 。

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　　5. 3 包装材料检查

　　在检疫现场 ,检查包装材料上有无老熟幼虫或蛹 。如发现疑似幼虫 ,用 70%酒精浸泡 ,如发现蛹 ,可用指形管盛装 ,带回实验室 。

　　5. 4 蛹的培养

　　将蛹置于有透气孔 的 塑 料 盒(管) 内 的 湿 细 沙 表 层 中 , 将 塑 料 盒 (管) 置 于 养 虫 箱 内 , 以 25 ℃ ~ 30 ℃ 、相对湿度为 65%的条件饲养至成虫羽化 。在容器内投入滴有乙醚的棉球将蛾晕倒 ,将蛾取出置于氰化钾毒瓶内 ,使之真正死亡 。然后针插 ,使用小毛笔和玻璃纸展翅制成针插标本 ,供鉴定 。

　　6 标本的制作准备

　　6. 1 成虫针插标本

　　针插成虫标本 ,供鉴定 。

　　6. 2 成虫外生殖器玻片标本

　　将成虫腹部取下 ,浸泡在 10%氢氧化钠水溶液中,煮沸 5 min,取出解剖 ,去掉与外生殖器无关的体壁 、肌肉 、内脏等 ,再放到 75%、85%、95%和 100%酒精中各 10min,最后置于二甲苯中透明 ,整形 ,再放到载片上 ,滴加拿大胶 ,盖片风干 ,加贴标签 。

　　7 实验室鉴定

　　用体视显微镜观察将幼虫标本 ,用手持放大镜或体视显微镜观察成虫标本 ,或用显微镜观察成虫外生殖器玻片标本 ,判断是否符合以下形态特征(见附录 B、附录 C 和附录 D) 。

　　7. 1 成虫

　　7. 1. 1 概貌

　　体长 8 mm ,翅展 19 mm~ 20 mm ,体灰褐色而带紫色光泽 。雄蛾色深 、雌蛾色浅 。

　　7. 1. 2 头部

　　复眼深棕褐色 。头部具有发达的灰白色鳞片丛 ;下唇须向上弯曲 ,第 2 节最长 ,末节着生于第 2 节末端的下方 。

　　7. 1. 3 翅

　　前翅翅基部淡褐色 ;外缘突出略呈三角形 ,在此区内杂有较深的斜行波状纹 ;翅的中部颜色最浅 ,也杂有波状纹 。臀角处的肛上纹呈深褐色 ,椭圆形 ,有 3条青铜色条斑 ,其间显出 4 条 ~ 5 条褐色横纹 ,这是本种外形上的显著特征 。雄蛾前翅腹面中室后缘有一黑褐色条斑 ,雌蛾无 。后翅深褐色 ,基部较淡 。

　　7. 1. 4 外生殖器

　　7. 1. 4. 1 雄

　　抱器瓣在中间有明显颈部 ;抱器腹在中部有明显凹陷 ,其外侧有一指状尖突 ;抱器端圆形 ,具有许多长毛 ; 阳茎短粗 ,基部稍弯 ; 阳茎针 6枚 ~ 8枚 ,分两行排列 。

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　　7. 1. 4. 2 雌

　　产卵瓣内侧平直 ,外侧弧形 ;交配孔宽扁 ;后阴片圆大 ;囊导管短粗 ,在近口处强烈几丁质化 ,扩大呈半圆 ;囊突两枚 ,牛角状 。

　　7. 2 卵

　　椭圆形 ,扁平 , 中央略隆起 ;初产时半透明 ,后期卵上可见一圈红色斑纹 ,卵壳上有很细的皱纹 。

　　7. 3 幼虫

　　老熟幼虫体长 14 mm~ 18 mm。幼龄幼虫淡黄白色 ,渐长呈淡红色 。 头部黄褐色 ,两侧有较规则的褐色斑纹 。前胸气门前毛片上有 3 根毛(L毛) 。胸足跗爪背侧刚毛短于跗爪 。腹部第 8 节与 9 节每侧 SV 毛数量通常为 2 ∶ 1,第 9节 L 毛 3 根 ,第 3 根通常着生在单独的毛片上 。腹足趾钩单序(几乎同一长度) 环状 ,外侧通常有缺 口 。肛上板较前胸背板浅 ,上面有淡褐色斑点 ,无臀栉(肛上板腹面梳齿状骨化刺) 。

　　苹果蠹蛾及其重要近缘种幼虫的鉴别见附录 D。

　　7. 4 蛹

　　长 7 mm~ 10 mm ,黄褐色 。通常雌大于雄 。雌腹 3节可活动 ,而雄 4节可动 。第 2~ 7腹节背面各有两排整齐的刺 ,前排粗大 ,后排细小 ,第 8~ 10腹节背面则各有 1排刺 。腹末有臀栉 。

　　8 结果判定

　　以老熟幼虫或成虫形态特征为依据 ,符合上述 7. 1. 3 或 7. 1. 4. 1 或 7. 1. 4. 2 或 7. 3 者可判定为苹果蠹蛾 。

　　9 样本保存

　　鉴定后的标本要永久保存 ,并加注明时间 、地点 、寄主 、采集人等信息的标签 。 幼虫可保存在 70%的酒精中 。

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　　附 录 A

　　(资料性附录)

　　苹果蠹蛾其他信息

　　A. 1 主要寄主

　　苹果 、榅桲 、杏 、李 、桃 、梨等 。

　　A. 2 生物学

　　雌蛾多产卵在果树上层的果实和叶片上 。幼虫孵出后 ,从果萼 、果胴 、果蒂等部位蛀入果内 ,取食果肉和种子 。幼虫共 5 龄 。幼虫老熟后 ,往往近直线钻出脱果 ,在树干皮下 、裂缝处或地上隐蔽物内或土中结茧化蛹 。 以末代老熟幼虫在树干皮下 、裂缝处等处越冬 ,翌年春季化蛹 、羽化 。被害寄主果实可见细小突起伤疤或虫孔 ,有时虫孔处还可见虫粪或流胶 。

　　A. 3 地理分布

　　目前已广泛分布于全球各大洲寒温带地区 ,仅我国北方大部分省区还没有发现 ,具体分布地区 :

　　欧洲 : 阿尔巴尼亚 、奥地利 、白俄罗斯 、比利时 、保加利亚 、塞浦路斯 、捷克 、斯洛伐克 、丹麦 、爱沙尼亚 、芬兰 、法国(包括科西嘉岛) 、德国 、希腊 、匈牙利 、爱尔兰 、意大利(包括撒丁岛 、西西里岛) 、拉脱维亚 、立陶宛 、马耳他 、摩尔多瓦 、荷兰 、挪威 、波兰 、葡萄牙(包括亚逊尔群岛 、马德拉群岛) 、罗马尼亚 、俄罗斯联邦(俄罗斯欧洲部分 、俄罗斯远东 、西伯利亚) 、塞黑 、斯洛伐克 、西班牙(包括加那利群岛) 、瑞典 、瑞士 、乌克兰 、英国(英格兰和威尔士 、北爱尔兰 、苏格兰) 。

　　亚洲 : 阿富汗 、亚美尼亚 、阿塞拜疆 、乔治亚共和国 、印度(喜马偕尔邦 、克什米尔 、北方邦) 、伊朗 、伊拉克 、以色列 、约旦 、哈萨克斯坦 、吉尔吉斯斯坦 、黎巴嫩 、巴基斯坦 、叙利亚 、塔吉克斯坦 、土耳其 、土库曼斯坦 、乌兹别克斯坦等地 。 中国新疆 、甘肃等局部地区也已有发生 。

　　非洲 : 阿尔及利亚 、埃及 、利比亚 、毛里求斯 、摩洛哥 、南非 、突尼斯 。

　　北美洲 :美国(加利福尼亚 、伊利诺斯 、印第安那 、爱荷华 、马萨诸塞 、密歇根 、密苏里 、纽约 、北卡罗莱那 、俄亥俄 、俄勒冈 、宾夕法尼亚 、犹他 、维吉尼亚 、华盛顿 、西维吉尼亚 、威斯康星) 、加拿大(大不列颠哥伦比亚 、新不伦瑞克 、新斯科舍 、安大略 、爱德华王子岛 、魁北克) 、墨西哥 。

　　南美洲 : 阿根廷 、玻 利 维 亚 、巴 西 ( 巴 拉 那 、南 里 奥 格 兰 德 、圣 卡 塔 琳 娜) 、智 利 、哥 伦 比 亚 、秘 鲁 、乌拉圭 。

　　大洋洲 :澳大利亚(新南威尔士 、昆士兰 、南澳 、塔斯马尼亚 、维多利亚 、西澳) 、新西兰 。

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　　附 录 B

　　(规范性附录)

　　苹果蠹蛾图

　　图 B. 1 苹果蠹蛾成虫

　　图 B. 2 苹果蠹蛾幼虫及苹果果实种子被害状

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　　附 录 C

　　(规范性附录)

　　重要形态特征示意图

　　C. 1 卷蛾科及苹果蠹蛾成虫重要形态特征

　　卷蛾科及苹果蠹蛾成虫重要形态特征示意图见图 C. 1。

　　a) 小食心虫族前翅斑纹示意图(引自刘友樵)

　　b) 新小卷蛾亚科雄抱器瓣(引自刘友樵) c) 苹果蠹蛾雄外生殖器的阳茎(上)和抱器(仿前苏联)

　　d) 雌外生殖示意器(引自刘友樵) e) 苹果蠹蛾雌外生殖器(仿前苏联)

　　图 C. 1 卷蛾科及苹果蠹蛾成虫重要形态特征示意图

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　　C. 2 苹果蠹蛾幼虫毛序

　　苹果蠹蛾幼虫部分胸腹节毛序见图 C. 2。

　　XD— 前背毛 ;

　　D— 背毛 ;

　　SD— 亚背毛 ;

　　L— 侧毛 ;

　　SV— 亚腹毛 ;

　　V— 腹毛 。

　　图 C. 2 苹果蠹蛾幼虫部分胸腹节毛序(引自 田中健治)

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　　附 录 D

　　(规范性附录)

　　苹果蠹蛾及重要近缘种幼虫鉴别检索表

　　1 无臀栉 ; 刚毛基部有毛片 ;头部黄褐色 ,两侧有较规则的褐色斑纹 ;胸足跗爪背侧刚毛短于跗爪 ;腹部

　　第 8节与 9节每侧 SV 毛数量通常为 2 ∶ 1;第 9节 L 毛 3 根 ,第 3 根通常着生在单独的毛片上 ;腹足

　　趾钩单序环状 ,外侧有缺 口 ;肛上板较前胸背板浅 ,上面有淡褐色斑点

　　苹果蠹蛾 Cydia pomonella (L. )

　　有臀栉 ;腹第 9节每侧 1 根 D1 毛和 1 根 SD1 毛在同一毛片上 ,SV毛通常每侧 1 根 ;肛上板外侧成对

　　刚毛明显长于内侧成对刚毛 2

　　2 腹足趾钩为单序或双序 ;前胸气门前毛片不向后延伸到气门下 3

　　腹足趾钩为三序 ;前胸气门前毛片向后延伸到气门下 ;头顶中央锐角状下凹

　　苹果异形小卷蛾 Cryptophlebia leucotreta (Meyrick)

　　3 第 9节背中央毛片(D2 毛片) 与两侧毛片(D1 毛和 SD1 毛共有毛片) 相连或靠近 4

　　第 9节背中央毛片与两侧毛片有一定距离 ,不靠近 5

　　4 腹部刚毛毛片颜色与体表颜色接近 ;胸足驸爪与背侧刚毛均粗短 ;腹节背面肌肉附着点亮斑不明显 ;

　　腹足趾钩为单序环 苹小食心虫 Cydia inopinata Heinrich

　　腹部刚毛毛片颜色明显深于体表颜色 ;胸足驸爪与背侧刚毛比较细长 ;腹节背面肌肉附着点亮斑明显

　　樱小卷蛾 Cydia packardi(Zeller)

　　5 腹足趾钩为单序环 ;腹节背面肌肉附着点亮斑通常 2对 … … 梨小食心虫 Cydia molesta (Busck)

　　腹足趾钩为双序环 ;腹节背面肌肉附着点亮斑通常 1对 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 李小食心虫 Cydiafunebrana (Treitschke)