GB/T 27641-2011 马螨病诊断技术

　　ICS 11. 220 B 41

　　中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准

　　GB/T 27641—2011

　　马 螨 病 诊 断 技 术

　　Diagnostictechniquesforhorsemange

　　2011-12-30发布 2012-04-01实施

　　中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会

　　

　　发

　　

　　布

　　GB/T 27641—2011

　　前 言

　　本标准按照 GB/T 1. 1—2009的规则起草 。

　　本标准由中华人民共和国农业部提出 。

　　本标准由全国动物防疫标准化技术委员会(SAC/TC181)归 口 。

　　本标准起草单位 : 中华人民共和国山东出入境检验检疫局 、中国动物卫生与流行病学中心 。

　　本标准主要起草人 :梁成珠 、朱来华 、郑小龙 、肖西志 、邓明俊 、岳志芹 、毕道荣 、梁君妮 、徐彪 。

　　Ⅰ

　　GB/T 27641—2011

　　马 螨 病 诊 断 技 术

　　1 范围

　　本标准规定了马螨病临床检查 、病原样品采集与鉴定等诊断技术要求 。

　　本标准适用于马螨病的检疫和诊断 。

　　2 临床检查

　　2. 1 临床特征

　　马患本病时 ,先由头 、颈 、体侧开始 , 随后蔓延至肩 、背 、全身 ,足螨则主要寄生于四肢的下半部 。 主要表现为皮肤发痒 ,骚动不安 ,舔 、咬 、踢瘙痒部 ,常倚物摩擦 ;被毛凌乱 ,拨开患部被毛 ,患部皮肤出现结节 、水泡 ,破溃后形成痂皮 ,被毛脱落 ,皮肤肥厚 ,皱褶 ,病马 日渐消瘦 。在诊断中 ,可观察动物是否有用嘴轻咬或摩擦患处皮肤的表现 。在拥挤的围栏中强迫动物运动 ,使机体发热,促进皮肤吸收螨虫的抗原或刺激物(分泌物) ,激发临床症状 。

　　2. 2 初步判定

　　2. 2. 1 根据临床症状如剧痒 、皮肤增厚 、有痂皮 、脱毛和消瘦等特征可做出初步判定 。

　　2. 2. 2 当发现可疑马匹时 ,需继续观察或采取病料送实验室进一步病原学检查 。

　　3 病原样品采集与鉴定

　　3. 1 设备、器械与试剂

　　3. 1. 1 设备、器械

　　显微镜(100×) 、恒温箱(4℃ ~ 60℃) 、离心机(离心速度 3000 r/min) 、酒精灯 、凸刃小刀 、棉拭子 、骨科刮勺 、自封袋 、平皿 、试管 、载玻片等 。

　　3. 1. 2 试剂

　　甘油或液体石蜡 、10%氢氧化钾(钠)溶液 、60%硫代硫酸钠溶液等 。

　　3. 2 显微镜检查

　　3. 2. 1 病料的采集

　　3. 2. 1. 1 保定马匹 ,将患部与健康部交界处被毛剪掉 ,用通过火焰灭菌的凸刃小刀倾斜 45°刮取裸露部皮屑直到皮肤微出血为止 。 收集刮下的病料进行实验室检查 。

　　3. 2. 1. 2 用适当大小的棉拭子插入外耳道直到遇到阻力 ,然后轻轻地旋转并退出 。插入外耳道要轻柔细心 ,注意马匹的反应 。或用骨科刮勺刮取马耳内廓耳垢 。

　　3. 2. 1. 3 将皮屑和耳垢迅速转移到自封袋或平皿内密封后送往实验室待检 。

　　3. 2. 1. 4 采集病料前 ,滴一滴甘油或液体石蜡在皮肤或器具上有助于螨虫的收集 。

　　1

　　GB/T 27641—2011

　　3. 2. 2 检查方法

　　3. 2. 2. 1 直接检查法

　　取适量病料 ,37℃恒温箱中作用 15min~ 30min,直接放在平皿上进行镜检 。

　　3. 2. 2. 2 温水检查法

　　将病料浸入 40℃ ~45℃的水中 ,置恒温箱内 ,在温热水的作用下 ,螨虫由皮屑或耳垢内爬出 ,集成团而沉入水底 ,1 h~ 2 h后 ,将浸过病料的液体倒出 ,将沉渣倾入平皿中镜检 。

　　3. 2. 2. 3 沉淀法

　　将采集的病料置于试管中 ,加入 10%氢氧化钾(钠) 溶液 ,在酒精灯上煮数分钟(或浸泡 2 h) ,然后2000r/min离心沉淀 5 min,弃上清液 , 吸取沉淀物 ,放在载玻片上 ,进行镜检 。

　　3. 2. 2. 4 漂浮法

　　将采集的病料置于试管中 ,加入 10%氢氧化钾(钠)溶液,煮沸数分钟(或浸泡 2 h) ,然后 2000 r/min离心沉淀 5 min,弃上清液 ,取沉淀物 ,用蒸馏水将其中的氢氧化钾(钠)浸洗干净 ,在沉淀物中加入 60%硫代硫酸钠溶液使液体满于管 口 ,但不溢出 。静置 5 min~ 10min,螨即浮集于液面 ,可用载玻片直接蘸取镜检 。

　　3. 3 结果判定

　　在显微镜下检查 ,发现有螨虫体(卵) 为阳性结果 , 未发现螨虫体(卵) 为阴 性 结 果(参 考 附 录 A 和附录 B) 。 四种检查方法只要一种方法鉴定为阳性 ,则判定为阳性结果 。

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　　GB/T 27641—2011

　　附 录 A

　　(资料性附录)

　　螨虫的形态示意图

　　图 A. 1 Sarcopticmangemite

　　疥螨

　　图 A. 2 Femalescabiesmitewith egg

　　雌性疥螨和虫卵

　　3

　　GB/T 27641—2011

　　图 A. 3 Sarcoptesscabies,male. Courtesy ofDr. Dietrich Barth,Merial

　　雄性疥螨

　　图 A. 4 Sarcoptesscabiei,female. Courtesy ofDr. Dietrich Barth,Merial

　　雌性疥螨

　　图 A. 5 Psoroptes,male. Courtesy ofDr. Dietrich Barth,Merial

　　雄性痒螨

　　4

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　　图 A. 6 Psoroptes,female. Courtesy ofDr. Dietrich Barth,Merial

　　雌性痒螨

　　图 A. 7 Chorioptes,male. Courtesy ofDr. Dietrich Barth,Merial

　　雄性足螨或皮螨

　　图 A. 8 Chorioptes,female. Courtesy ofDr. Dietrich Barth,Merial

　　雌性足螨或皮螨

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　　图 A. 9 螨的卵(未发育)

　　图 A. 10 螨的卵(已发育)

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　　GB/T 27641—2011

　　附 录 B

　　(资料性附录)螨虫的形态特征

　　B. 1 疥螨、痒螨的形态特征

　　B. 1. 1 疥螨

　　虫体近圆形或椭圆形 ,背面隆起 ,乳白或浅黄色 , 大小为 0. 2 mm~ 0. 5 mm。 口器短 ,基部有一对刺 ;螯肢和须肢粗短 。足短而圆 ,第 4对足几乎全部被遮于腹下 。躯体后半部有几对杆状刚毛和长鬃 。腹面光滑 ,仅有少数刚毛和 4对足 。足短粗 ,分 5 节 ,呈圆锥形 。前两对足与后两对足之间的距离较大 ,足的基部有角质内突 。雌螨在足 1、2、雄螨在足 1、2、4 有吸盘 , 吸盘的柄不分节 。表皮有皱纹 ; 背面中部有三角形鳞状突及棒状短刺 。肛门位于躯体末端 。雄螨无生殖吸盘 ,体末端亦不呈凸缘 。

　　B. 1. 2 痒螨

　　虫体呈长圆形 ,体长 0. 5 mm~0. 9 mm , 肉眼可见 。 口器长 ,呈圆锥形 ;螯肢细长 ,两趾上有三角形齿 ;须肢亦细长 。躯体背面表皮有细皱纹 。肛门位于躯体末端 。 足较长 ,特别是前两对 。 雌虫的第 1、 2、4对足和雄虫的前 3对足都有吸盘 , 吸盘长在一个分三节的柄上 。 雌虫的第 3 对足上各有两根长刚毛 。雄虫第 4对足特别短 ,没有吸盘和刚毛 。雄虫躯体末端有两个大结节 ,上各有长毛数根 ,腹面后部有两个性吸盘 ;生殖器居于第 4基节之间 。 雌虫躯体腹面前部有一个宽阔的生殖孔 ,后端有纵裂的阴道 , 阴道背侧为肛门 。

　　B. 1. 3 疥螨和痒螨的区别要点见表 B. 1。

　　表 B. 1 疥螨和痒螨类的区别要点(自孔繁瑶)

　　类 别

　　足 的 特 点

　　肛门位置

　　雌

　　雄

　　疥 螨 类

　　疥螨属

　　足 1、2有长柄不分节的吸盘

　　足 1、2、4有长柄不分节的吸盘

　　体末端

　　背肛螨属

　　同上

　　同上

　　体背侧

　　膝螨属

　　足无吸盘

　　足 1、2、4有长柄分节的吸盘

　　体末端

　　痒 螨 类

　　痒螨属

　　足 1、2、4有长柄分节的吸盘

　　足 1、2、4有长柄分节的吸盘

　　体末端

　　足螨属

　　足 1、2、4有短柄不分节的吸盘

　　足 1、2、3、4有短柄不分节的吸盘 ,第 4 足极小

　　体末端

　　耳痒螨属

　　足 1、2有短柄的吸盘 ,第 4 足极小

　　足 1、2、3、4有短柄的吸盘 ,

　　第 4 足极小

　　体末端

　　B. 2 螨虫卵

　　螨虫卵呈圆形或椭圆形 ,淡黄色或灰白色 ,壳薄 ,大小约 80μm×180μm ,产出后经 3d~ 5d孵化为幼虫 。