GB/T 29635-2013 疑似毒品中海洛因的气相色谱、气相色谱-质谱检验方法

　　ICS 13. 310 A 92

　　中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准

　　GB/T 29635—2013

　　疑似毒品中海洛因的气相色谱、气相色谱-质谱检验方法

　　GC and GC-MS examination methodsforheroin in suspecteddrug

　　2013-07-19发布 2013-11-01实施

　　中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会

　　

　　发

　　

　　布

　　GB/T 29635—2013

　　前 言

　　本标准按照 GB/T 1. 1—2009给出的规则起草 。

　　请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任 。

　　本标准由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析标准化分技术委员会(SAC/TC 179/SC 1) 提出并归 口 。

　　本标准起草单位 :公安部物证鉴定中心 。

　　本标准主要起草人 :高利生 、张春水 、郑珲 、钱振华 、徐鹏 、黄星 、王一 、王蔚昕 、常颖 、刘克林 。

　　Ⅰ

　　GB/T 29635—2013

　　疑似毒品中海洛因的气相色谱、

　　气相色谱-质谱检验方法

　　1 范围

　　本标准规定了海洛因的气相色谱-质谱(GC-MS)定性分析和气相色谱(GC)定量分析 。

　　本标准适用于毒品案件固体样品中海洛因的定性定量检验鉴定 。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注 日期的引用文件 ,仅注 日期的版本适用于本文件 。凡是不注日期的引用文件 ,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件 。

　　GA/T 122 毒物分析名词术语

　　JJF 1059. 1—2012 测量不确定度评定与表示

　　3 术语和定义

　　GA/T 122界定的术语和定义适用于本文件 。

　　4 原理

　　本方法采用内标法或外标法进行质量控制 ,对疑似毒品固体样品中的海洛因进行有机溶剂提取 ,用气相色谱-质谱联用(GC-MS)进行定性分析 ,用气相色谱-氢火焰离子化检测器(GC-FID)对海洛因进行定量分析 。

　　5 试剂及标准物质、仪器及量器具

　　5. 1 试剂及标准物质

　　所用试剂均为分析纯 ,试剂及标准物质包括 :

　　a) 氯仿 。

　　b) 甲醇 。

　　c) 提取试剂配制 :将氯仿和甲醇以 9 ∶ 1 的比例混合 ,制备成提取试剂 。

　　d) 可溯源标准物质 :海洛因 。

　　e) 外标定量用 1. 0 mg/mL海洛因标准储备液 :称取海洛因标准物质(根据标准物质纯度和盐型换算后等于 50. 0 mg的海洛因) ,放入 50 mL容量瓶中 ,加入 20 mL提取溶剂振荡溶解后 ,用提取溶剂稀释至刻度 ,配制成 1. 0 mg/mL海洛因标准储备液 ,置冰箱冷冻保存 ,保存时间为 6个月 。

　　f) 外标定量用 0. 1 mg/mL海洛因标准工作液 :移取 1. 0 mg/mL海洛因标准储备液 5 mL加入到 50 mL容量瓶中 ,用提取溶剂稀释至刻度 ,配制成 0. 1 mg/mL海洛因标准工作液 ,置冰箱

　　1

　　GB/T 29635—2013

　　中冷藏保存 ,保存时间为 3个月 。

　　g) 外标定量用 0. 01mg/mL海洛因标准工作液 :移取 0. 1 mg/mL海洛因标准工作液 1 mL加入到 10 mL容量瓶中 ,用提取溶剂稀释至刻度 ,配制成 0. 01 mg/mL海洛因标准工作液 ,置冰箱中冷藏保存 ,保存时间为 1个月 。

　　h) 内标物 :苯海拉明或丙基解痉素(SKF525A ) 。

　　i) 内标物溶液 :称取苯海拉明或 SKF525A (根据标准物质纯度换算后等于 500. 0 mg的苯海拉明或SKF525A ) ,放入 50 mL容量瓶中 ,加入约 20 mL提取溶剂 ,振摇至样品溶解 ,超声 5 min,用提取溶剂定容至刻度 ,配制成 10 mg/mL苯海拉明或 SKF525A 内标储备液(置于冰箱中保存 ,保存时间为 12个月) 。使用时用提取溶剂逐级稀释到 0. 1 mg/mL。 内标物溶液应置于冰箱中保存 ,使用前取出放至室温后方可使用 ,保存时间为 2个月 。

　　j) 内标法绘制标准工作曲线用标准工作液 :称取海洛因标准物质(根据标准物质纯度和盐型换算后等于 50. 0 mg的海洛因) ,放入 50 mL容量瓶中 ,加入 0. 1 mg/mL苯海拉明或 SKF525A溶液20 mL,振荡溶解后用 0. 1 mg/mL苯海拉明或 SKF525A 溶液稀释至刻度 , 配制成 1. 0 mg/mL海洛因标准溶液 ,并依次用 0. 1 mg/mL苯海拉明或 SKF525A溶液稀释到 0. 5 mg/mL、0. 1 mg/ mL、0. 05 mg/mL、0. 01 mg/mL浓度 。

　　5. 2 仪器及量器具

　　仪器及量器具包括 :

　　a) 气相色谱仪 ,配有火焰离子化检测器(FID) ;

　　b) 气相色谱-质谱联用仪 ,配有电子轰击源(EI) ;

　　c) 高速离心机 ,最大转速 8000 r/min;

　　e) 电动振荡器 ;

　　d) 电子天平 ,实际分度值 d=0. 01 mg;

　　f) 10 mL和 1 mL移液器或移液管 ;

　　g) 10 mL瓶口移液器 。

　　6 定性分析

　　6. 1 样品制备

　　样品充分研磨混匀 ,称取约 10 mg,加入 10 mL提取溶剂 ,密封并振荡 10 min,离心后取上清液 ,用GC-MS分析 。如果样品溶液中 目标物浓度过低 ,可适当增加样品称量量 2倍 ~ 10倍 。 同时用 GC-MS分析 0. 002 mg/mL 的海洛因标准溶液进行质量控制 。

　　6. 2 气相色谱-质谱联用仪参考条件

　　以下为参考条件 ,可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整 :

　　a) 离子源 :EI;

　　b) 质量范围 :40 amu~ 500 amu;

　　c) 采集方式 :全扫描(Scan) ;

　　d) 色谱柱类型 :DB-5MS石英玻璃毛细柱(5%苯基 +95%聚二甲基硅氧烷)或其他等效柱 ;

　　e) 色谱柱参数 :30 m×0. 25 mm×0. 25 μm;

　　f) 色谱柱温程 :初始温度 60 ℃ , 以 15 ℃/min升温至 280 ℃ ,保持 15 min ;

　　g) 进样口温度 :280 ℃ ;

　　h) 传输线温度 :250 ℃ ;

　　2

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　　i) 离子源温度 :230 ℃ ;

　　j) 分流比 :20 ∶ 1;

　　k) 载气 :高纯氦气(He) ;

　　l) 柱流量(恒流) :1. 0 mL/min;

　　m) 倍增器电压 :参考调谐状况 ;

　　n) 溶剂切割 :3 min。

　　7 定量分析

　　7. 1 外标法

　　7. 1. 1 含量范围预分析

　　预分析的目的在于要对样品中的海洛因含量进行初测 , 以计算准确定量分析时所用样品的称量质量 ,从而保证准确定量时样品溶液中 目标物的最终浓度尽可能接近所使用标准工作液的浓度 。

　　称量约 10 mg样品置于带盖试管中 ,加入 10 mL提取溶剂振荡使其溶解 ,离心后取上清液 ,用 GC- FID分析 ,采用 0. 1 mg/mL 的海洛因标准工作液作为定量参照 。

　　如果样品溶液中目标化合物的浓度过高 ,可适当减少样品称量质量 ,或将样品提取液用提取溶剂稀释后进行分析 。

　　如果样品溶液中目标化合物的浓度过低 ,可适当增加样品称量质量 ,或将样品提取液挥干 、定容后进行分析 。

　　按式(1)计算样品中 目标组分的含量 。

　　w

　　式中 :

　　w — 样品中海洛因的含量 , % ;

　　C0— 标准工作液中海洛因的浓度 ,单位为毫克每毫升(mg/mL) ;

　　A — 样品溶液中海洛因的色谱峰面积值 ;

　　V1— 样品溶液初次定容体积 ,单位为毫升(mL) ;

　　V3— 将 V2 稀释时加入提取溶剂的体积 ,单位为毫升(mL) ;

　　A0— 标准工作液中海洛因的色谱峰面积值 ;

　　V2— 从 V1 中移取样品溶液的体积 ,单位为毫升(mL) ;

　　m — 用于测定的样品的称量质量 ,单位为毫克(mg) 。

　　7. 1. 2 准确定量

　　7. 1. 2. 1 称量质量的计算

　　根据预分析中海洛因含量测定结果 ,选择合适的定容体积 、稀释倍数(样品提取操作参数选择参见表 A. 1) ,并按式(2)计算出样品称量质量(m) 。

　　m …………………………( 2 )

　　式中 :

　　m — 称量质量 ,单位为毫克(mg) ;

　　C0— 标准工作液中海洛因的浓度 ,单位为毫克每毫升(mg/mL) ;

　　V — 初次定容体积 ,单位为毫升(mL) ;

　　3

　　GB/T 29635—2013

　　D — 稀释倍数 ;

　　w — 样品中海洛因的预分析含量 , % 。

　　7. 1. 2. 2 样品提取

　　根据 7. 1. 2. 1计算结果 ,平行称取样品 6份 ,根据预分析含量范围 ,加入相应初次定容体积的提取溶剂 。密封并振荡 10 min。如果样品溶液需要稀释 ,移取 1 mL样品提取液至另一试管中 ,按照稀释倍数进行稀释定容 ,离心后取上清液用 GC-FID分析 。样品提取操作参数选择参见附录 A 中表 A. 1。

　　7. 1. 2. 3 气相色谱仪参考条件

　　以下为参考条件 ,按照本法所获得的气相色谱图参见附录 B 中图 B. 1,可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整 :

　　a) 检测器 :FID;

　　b) 色谱柱型号 :DB-5石英玻璃毛细柱(5%苯基 +95%聚二甲基硅氧烷)或其他等效柱 ;

　　c) 色谱柱参数 :30 m×0. 25 mm×0. 25 μm;

　　d) 色谱柱温程 :初始温度 180 ℃ , 以 12 ℃/min升温至 280 ℃ ,保持 5 min;

　　e) 进样口温度 :280 ℃ ;

　　f) 检测器温度 :300 ℃ ;

　　g) 载气 :高纯氮气(N2 ) ;

　　h) 分流比 :20 ∶ 1;

　　i) 柱流速(恒流) :1 mL/min;

　　j) 燃烧气 : H2 ;

　　k) 燃烧气流速 :按仪器默认值 ;

　　l) 助燃气 :空气 ;

　　m) 助燃气流速 :按仪器默认值 。

　　7. 1. 2. 4 含量计算

　　按式(1)计算样品中海洛因的含量 。

　　7. 2 内标法

　　7. 2. 1 标准工作曲线绘制及监测

　　7. 2. 1. 1 标准工作曲线绘制

　　采用 1. 0 mg/mL、0. 5 mg/mL、0. 1 mg/mL、0. 05mg/mL、0. 01mg/mL等 5个浓度绘制成线性范围为 0. 01 mg/mL~ 1. 0 mg/mL 的海洛因标准工作曲线 。标准工作曲线应随内标储备液的更换而重新绘制 。

　　7. 2. 1. 2 标准工作曲线监测

　　采用 5. 1j)中浓度为 0. 05mg/mL和 1. 0 mg/mL 的标准物质溶液作为监测样品,建立标准工作曲线时 ,每个监测样品各分析 10次 ,计算海洛因与苯海拉明或 SKF525A 峰面积比值的平均值及标准偏差(SD) 。每次检验前先分析监测样品,若监测样品的结果在平均值 ±3SD之间 ,则标准工作曲线有效 ,否则 ,应重新绘制标准工作曲线 。

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　　7. 2. 2 内标定量

　　7. 2. 2. 1 提取操作

　　平行称取样品 2份各约 30 mg,加入 0. 1 mg/mL 内标溶液 30 mL,充分振荡 ,离心后用 GC-FID分析 ,采用 7. 2. 1. 1 的标准工作曲线进行定量计算 。

　　如样品溶液中 目标物浓度低于 0. 01 mg/mL时 ,可适当增加样品称量质量 2倍 ~ 10倍 。

　　7. 2. 2. 2 气相色谱仪参考条件

　　同 7. 1. 2. 3。

　　7. 2. 2. 3 含量计算

　　根据 7. 2. 1. 1 的标准工作曲线计算样品含量 。

　　8 结果评价

　　8. 1 定性结果评价

　　8. 1. 1 GC-MS分 析 0. 002 mg/mL 海 洛 因 标 准 溶 液 , 检 测 出 海 洛 因 m/z369特 征 离 子 峰 , 样 品 浓 度10 mg/mL,未检测出海洛因 m/z369特征离子峰 , 阴性结果可靠 。检验结果表述为 :样品中未检出海洛因成分 。

　　8. 1. 2 如果样品出峰时间与海洛因标准物质保留时间一致 ,且质谱特征峰及其丰度比与海洛因标准物质一致[海洛因的特征离子 :m/z327(基峰) 、m/z369、m/z310、m/z268,海洛因的质谱图参见图 B. 2] , 阳性结果可靠 。检验结果表述为 :样品中检出海洛因成分 。

　　8. 2 定量结果评价

　　8. 2. 1 外标法

　　8. 2. 1. 1 异常值检验

　　根据 Grubbs方程 ,按式(3)对 6份(5份)平行测定数据进行可疑值判别 ,如果 Gi

　　…………………………( 3 )

　　式中 :

　　xi — 可疑值 ;

　　x0 — 平均值 ;

　　s — 6个(或 5个)数据的单次测定标准差 。

　　当测定次数 n= 6 时 ,G6(95) = 1. 822;当测定次数 n= 5 时 ,G5(95) = 1. 672。

　　8. 2. 1. 2 含量结果计算

　　以 6份(5份)样品含量测定的平均值作为含量结果 。

　　5

　　GB/T 29635—2013

　　8. 2. 2 内标法

　　8. 2. 2. 1 含量结果有效性

　　对两个平行测定数据按式(4) 进行相对相差(RD) 计 算 , RD 不 超 过 10% , 数 据 有 效 ; 否 则 , 应 重 新检验 。

　　RD …………………………( 4 )

　　式中 :

　　RD — 相对相差 , % ;

　　X1、X2— 两个样品平行定量测定的含量数值 ; — 两个样品平行定量测定含量的平均值 。

　　8. 2. 2. 2 含量结果计算

　　以两份样品测定含量的平均值作为含量结果 。

　　8. 3 含量结果表述

　　定量检验完成后 ,检验结果应表述为 :从样品中检出海洛因成分 ,其中海洛因含量为 × × . ×% 。

　　8. 4 测量不确定度的评定与表述

　　如需提供测量不确定度 ,测定结果的不确定度评定与表述按 JJF 1059. 1—2012的规定执行 。

　　6

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　　附 录 A

　　(资料性附录)

　　外标定量法样品提取操作参数选择表

　　外标定量法样品提取操作参数选择见表 A. 1。

　　表 A. 1 外标定量法样品提取操作参数选择表

　　预分析含量/%

　　初次定容体积/mL

　　稀释倍数

　　标准溶液浓度/(mg/mL)

　　50~ 100

　　20

　　21

　　0. 1

　　30~ 50

　　20

　　11

　　0. 1

　　10~ 30

　　10

　　11

　　0. 1

　　5~ 10

　　30

　　—

　　0. 1

　　2~ 5

　　20

　　—

　　0. 1

　　1~ 2

　　10

　　—

　　0. 1

　　0. 1~ 1

　　10

　　—

　　0. 01

　　GB/T29635—2013

　　附 录 B

　　(资料性附录)海洛因相关谱图

　　海洛因的色谱图及质谱图见图 B. 1 和图 B. 2。

　　图 B. 1 海洛因气相色谱图

　　图 B. 2 海洛因质谱图