GB/T 39878-2021 疑似毒品中艾司唑仑检验 气相色谱和气相色谱-质谱法

　　ICS 13 . 310 A 92

　　中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准

　　GB/T 39878—2021

　　疑似毒品中艾司唑仑检验

　　气相色谱和气相色谱-质谱法

　　Examinationmethodsforestazolaminsuspecteddrugs—

　　Gaschromatographyandgaschromatography-massspectrometry

　　2021-04-30 发布 2021-08-01 实施

　　国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会

　　发

　　布

　　GB/T 39878—202 1

　　GB/T 39878—202 1

　　前 言

　　本标准按照 GB/T 1 . 1—2009 给出的规则起草。

　　请注意本文件的某些内容可能涉及专利。 本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

　　本标准由中华人民共和国公安部提出。

　　本标准由全国刑事技术标准化技术委员会(SAC/TC 179)归口 。

　　本标准起草单位：公安部物证鉴定中心。

　　本标准主要起草人：高利生、张春水、郑珲、赵阳、钱振华、常颖、翟晚枫、李彭、赵彦彪、杨虹贤、郑晓雨、闻武、刘克林、黄星、王一、王蔚昕。

　　GB/T 39878—202 1

　　疑似毒品中艾司唑仑检验气相色谱和气相色谱-质谱法

　　1 范围

　　本标准规定了艾司唑仑的气相色谱-质谱(GC-MS)定性检验方法和气相色谱(GC)定量检验方法的原理、试剂和材料、仪器和设备、操作方法以及结果评价与表述。

　　本标准适用于疑似毒品固体样品中艾司唑仑的定性分析和定量分析。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注 日期的引用文件，仅注 日期的版本适用于本文件 。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

　　GB/T 27418 测量不确定度评定和表示

　　GA/T 122 毒物分析名词术语

　　3 术语和定义

　　GA/T 122 界定的术语和定义适用于本文件。

　　4 原理

　　对疑似毒品固体样品中的艾司唑仑进行提取。 采用气相色谱-质谱检测，以保留时间、特征离子碎片和离子丰度比作为定性判断依据;采用气相色谱检测，以色谱峰面积作为定量依据，用外标单点法或内标标准曲线法进行定量分析。

　　5 试剂

　　除非另有说明，在分析中使用的试剂均为色谱纯。

　　5 . 1 甲醇 。

　　5 . 2 内标物：丙基解痉素(SKF525A)(纯度不小于 95%) 。

　　5 . 3 标准物质储备液：1 . 0 mg/mL艾司唑仑标准物质储备液，0 ℃ ~4 ℃冷藏保存，有效期 12 个月。

　　5 . 4 内标标准曲线法定量用内标储备液：称取 SKF525A 500 mg,用甲醇定容到 50 mL容量瓶中，配制成

　　10.0 mg/mL SKF525A 内标储备液。0 ℃ ~4 ℃冷藏保存，有效期 12 个月。

　　5 . 5 定性用标准工作溶液：移取艾司唑仑标准物质储备液适量，用甲醇稀释，配制成 0 . 1 mg/mL 的艾司唑仑标准工作溶液。 0 ℃ ~4 ℃冷藏保存，有效期 3 个月。

　　5 . 6 定性质控标准工作溶液：移取艾司唑仑标准物质储备液适量，用甲醇稀释，配制成 0 . 005 mg/mL的艾司唑仑标准工作溶液。 0 ℃ ~4 ℃冷藏保存，有效期 1 个月。

　　5 . 7 外标单点 法 定 量 用 标 准 工 作 溶 液：移 取 艾 司 唑 仑 标 准 物 质 储 备 液 适 量，用 甲 醇 稀 释，配 制 成

　　0 . 1 mg/mL 的艾司唑仑标准工作溶液。 0 ℃ ~4 ℃冷藏保存，有效期 3 个月。

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　　5 . 8 内标标准曲线法定量用标准工作溶液：制备方法参见附录 A 中表 A. 1,移取相应体积的艾司唑仑标准物 质 溶 液、10 . 0 mg/mL SKF525A 内 标 储 备 液、甲 醇 至 进 样 瓶 中，配 制 成 艾 司 唑 仑 质 量 浓 度 为

　　0 . 01 mg/mL~0 . 5 mg/mL范围的标准工作溶液，至少配制 5 个浓度。

　　6 仪器和设备

　　6 . 1 气相色谱仪(GC) ：配有氢火焰离子化检测器(FID) 。

　　6 . 2 气相色谱-质谱仪(GC-MS)：配有电子轰击源(EI) 。

　　6 . 3 离心机。

　　6 . 4 电子天平：定性检验实际分度值 d 小于或等于 0 . 1 mg,定量检验实际分度值 d 小于或等于 0 . 01 mg。

　　6 . 5 涡旋振荡器。

　　6 . 6 移液器或移液管。

　　6 . 7 容量瓶。

　　6 . 8 具盖离心管。

　　7 操作方法

　　7 . 1 定性分析

　　7 . 1 . 1 样品制备

　　样品充分研磨混匀，根据实际需求，称取 10 mg~100 mg 于具盖离心管中，加入 10 mL 甲醇，密封并振荡 10 min, 以不低于 4 000 r/min离心 5 min,取上清液作为样品溶液，供 GC-MS分析。 或根据实际需要，将上清液用甲醇稀释，稀释液作为样品溶液，供 GC-MS分析。

　　7 . 1 . 2 仪器检测

　　7 . 1 . 2 . 1 气相色谱-质谱仪条件

　　以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整：

　　a) 色谱柱：DB-5 MS石英玻璃毛细柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)或其他等效柱;

　　b ) 色谱柱温程：初始温度 60 ℃ ,以 15 ℃/min速率升温至 300 ℃ ,保持 15 min;

　　c) 进样口温度：280 ℃ ;

　　d) 传输线温度：250 ℃ ;

　　e) 离子源温度：230 ℃ ;

　　f) 进样方式：分流进样，分流比为 20 ∶ 1 ;

　　g) 载气：高纯氦气;

　　h) 柱流量(恒流)：1.0 mL/min;

　　i) 质量范围：40 u~500 u;

　　j) 采集方式：全扫描(Scan) ;

　　k) 溶剂延迟时间：3 min。

　　7 . 1 . 2 . 2 进样

　　分别吸取样品空白(甲醇)、样品溶液、标准溶液空白(甲醇)和定性用标准工作溶液，按 7 . 1 . 2 . 1 条件

　　GB/T 39878—202 1

　　进样分析。 根据实际需求，再分别吸取标准溶液空白(甲醇)和定性质控标准工作溶液，按 7 . 1 . 2 . 1 条件

　　进行分析。

　　7 . 2 定量分析

　　7 . 2 . 1 外标单点法

　　7 . 2 . 1 . 1 含量预分析

　　根据实际需求，称取 10 mg~100 mg样品置于具盖离心管中，加入 10 mL 甲醇，密封并振荡 10 min,以不低于 4 000 r/min离心 5 min,取上清液作为样品溶液，供 GC分析。 或根据实际需要，将上清液用甲醇稀释，稀释液作为样品溶液，供 GC分析。 采用外标单点法定量用标准工作溶液作为定量参照。 按照公式(1)计算样品中目标物的预分析含量(质量分数)。

　　式中：

　　∞ —样品中 目标物的含量(质量分数);

　　ρ0 —外标单点法定量用标准工作溶液中 目标物的质量浓度，单位为毫克每毫升(mg/mL) ;

　　A — 样品溶液中 目标物的色谱峰面积值;

　　V1 —样品初次定容体积，单位为毫升(mL) ;

　　V2 —从V1 中移取的体积，单位为毫升(mL) ;

　　V3 —将V2 稀释时加入甲醇的体积，单位为毫升(mL) ;

　　A0 — 外标单点法定量用标准工作溶液中 目标物的色谱峰面积值;

　　m —样品的称量质量，单位为 mg。

　　7 . 2 . 1 . 2 准确定量

　　7 . 2 . 1 . 2 . 1 称量质量的计算

　　根据预分析中艾司唑仑含量测定结果，选择合适的定容体积、稀释倍数(样品提取操作参数参见附录 A 中表 A. 2),并按照公式(2)计算出样品称量质量(m)，使样品溶液中 目标物的浓度在所用标准工作溶液浓度的(100±30) %范围内。

　　m ………………………………( 2 )

　　式中：

　　m —称量质量，单位为毫克(mg) ;

　　ρ0 —外标单点法定量用标准工作液中 目标物的质量浓度，单位为毫克每毫升(mg/mL) ;

　　V —初次定容体积，单位为毫升(mL) ;

　　D — 稀释倍数;

　　∞ —样品中艾司唑仑的预分析含量(质量分数)。

　　7 . 2 . 1 . 2 . 2 样品制备

　　根据 7 . 2 . 1 . 2 . 1 计算结果，平行称取样品 2 份于具盖离心管中(当需要对定量结果进行不确定度评定时，至少平行称取 6 份);根据预分析含量结果，加入相应初次定容体积的甲醇，密封并振荡 10 min,以不低于 4 000 r/min离心 5 min,取上清液作为样品溶液，供 GC分析;当样品溶液需要稀释时，按照稀释倍数进行稀释定容，稀释液作为样品溶液，供 GC分析。

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　　7 . 2 . 1 . 2 . 3 仪器检测

　　7 . 2 . 1 . 2 . 3 . 1 气相色谱仪条件

　　以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整：

　　a) 色谱柱型号：DB-5 石英玻璃毛细柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)或其他等效柱;

　　b) 色谱柱温程：初始温度 150 ℃ ,以 15 ℃/min速率升温至 280 ℃ ,保持 15 min;

　　c) 进样口温度：280 ℃ ;

　　d) 检测器温度：300 ℃ ;

　　e) 载气：高纯氮气;

　　f) 进样方式：分流进样，分流比为 20 ∶ 1 ;

　　g) 柱流速(恒流)：1 mL/ min;

　　h) 燃烧气：氢气;

　　i ) 燃烧气流速：仪器默认值;

　　j) 助燃气：空气;

　　k) 助燃气流速：仪器默认值。

　　7 . 2 . 1 . 2 . 3 . 2 进样

　　分别吸取样品空白(甲醇)、样品溶液、标准溶液空白(甲醇)和外标单点法定量用标准工作溶液，按7 . 2 . 1 . 2 . 3 . 1 条件进样分析。 当称取 2 份样品时，每份样品进样 2 针 ~3 针 。

　　7 . 2 . 1 . 2 . 4 计算含量

　　按照公式(1)计算样品中艾司唑仑含量(质量分数)。

　　7 . 2 . 2 内标标准曲线法

　　7 . 2 . 2 . 1 标准工作曲线绘制

　　采用 5 . 1 中配制的内标法定量用标准工作溶液及标准溶液空白绘制成线性范围为 0 . 01 mg/mL~ 0 . 5 mg/mL 的艾司唑仑标准工作曲线。

　　7 . 2 . 2 . 2 样品制备

　　根据实际需求，平行称取样品 2 份各 20 mg~200 mg 于具盖离心管中，加入 10 mL 甲醇，密封并振荡 10 min, 以不低于 4 000 r/min 离心 5 min后取上清液 250 μL 于自动进样小瓶中，加入 10 mg/mL SKF525A 内标储备液 100 μL、甲醇 650 μL,振荡溶解均匀后作为样品溶液，供 GC分析。

　　7 . 2 . 2 . 3 仪器检测

　　7 . 2 . 2 . 3 . 1 气相色谱仪条件同 7 . 2 . 1 . 2 . 3 . 1 。

　　7 . 2 . 2 . 3 . 2 进样

　　分别吸取样品空白(甲醇)、样品溶液适量，按 7 . 2 . 2 . 3 . 1 条件进样分析，每份样品平行进样 2 针 ~ 3 针 。

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　　7 . 2 . 2 . 4 计算含量

　　以内标标准曲线法定量用标准工作溶液中 目标物与内标物的峰面积比的平均值为纵坐标、内标标准曲线法定量用标准工作溶液中 目标物的浓度为横坐标进行线性回归，得到线性方程。 根据样品溶液中 目标物及内标物的峰面积值，按公式(3)计算出样品中目标物的含量(质量分数)。

　　式中：

　　∞ —样品中 目标物的含量(质量分数);

　　Y — 样品溶液中 目标物与内标物的峰面积比的平均值;

　　a —线性方程的截距;

　　V —样品溶液的定容体积，单位为毫升(mL) ;

　　b —线性方程的斜率;

　　m —样品的称量质量，单位为毫克(mg) 。

　　8 结果评价与表述

　　8 . 1 定性结果评价

　　8 . 1 . 1 阳性结果评价：在相同条件下进行样品测定时，样品溶液中的 目标物与浓度接近的定性用标准工作溶液中的目标物相比，色谱峰保留时间一致(相对误差在 ±1%之内)、质谱特征离子一致，且各离子丰度比相对偏差不超过表 1 规定的范围，样品空白无干扰，则可判断样品中检出 目标物。 艾司唑仑质谱图、质谱特征离子及方法检出限参见附录 B。

　　表 1 特征离子丰度比的最大允许相对偏差范围

　　8 . 1 . 2 阴性结果评价：扣除背景后，10 . 0 mg/mL样品溶液中未出现与定性质控标准工作溶液中 目标物一致的特征离子，标准溶液空白无干扰，则可判断样品中未检出 目标物。

　　8 . 2 定量结果评价

　　8 . 2 . 1 相对相差检验

　　平行称取 2 份样品时，测定数据按照公式(4)计算相对相差(RD)。

　　RD

　　式中：

　　RD —相对相差，% ;

　　∞1、∞2 —两份样品平行定量测定的含量(质量分数)数值;

　　∞ —两份样品平行定量测定的含量(质量分数)平均值。

　　当 RD 小于或等于 10%时，数据有效;当 RD 大于 10%时，需要重新检验。

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　　8 . 2 . 2 异常值检验

　　平行称取 6 份样品时，测定数据按照公式(5)进行 Grubbs 可疑值判别。

　　G …………………………………( 5 )

　　式中：

　　Gi —Grubbs统计值;

　　∞i —可疑值;

　　∞0 — 6 个(5 个)数据的平均值;

　　s — 6 个(5 个)数据的单次测定标准差。

　　当测定份数 n= 6 时，G6(95) =1.822;当测定份数 n= 5 时，G5(95) = 1.672。

　　Gi 小于 Gn(95) 时，数据有效;Gi 大于或等于 Gn(95) 时，应剔除该数据，但只能剔除 1 个数据，否则本次测定无效，需要重新检验。

　　8 . 2 . 3 定量结果计算

　　8 . 2 . 3 . 1 平行称取 2 份样品时，以 2 份样品含量测定的平均值作为含量结果。

　　8 . 2 . 3 . 2 平行称取 6 份样品时，以 6 份(5 份)样品含量测定的平均值作为含量结果。

　　8 . 3 结果表述

　　8 . 3 . 1 阳性结果应表述为：从样品中检出艾司唑仑成分。 艾司唑仑含量用百分数表示。

　　8 . 3 . 2 阴性结果应表述为：从样品中未检出艾司唑仑成分。

　　8 . 4 测量不确定度的评定与表述

　　如需提供测量不确定度，定量结果的不确定度评定与表述按 GB/T 27418 执行。

　　9 检出限

　　本标准艾司唑仑方法检出限为 0 . 05%。

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　　附 录 A

　　(资料性附录)

　　内标法标准溶液和外标法样品提取操作参数

　　A.1 内标标准曲线法定量标准工作溶液配制操作参数选择见表 A. 1 。

　　表 A.1 内标标准曲线法定量用标准工作溶液配制操作参数

　　A.2 外标单点法样品提取操作参数选择见表 A. 2 。

　　表 A.2 外标单点法样品提取操作参数

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　　附 录 B

　　(资料性附录)

　　艾司唑仑相关资料

　　B.1 艾司唑仑的色谱图及质谱图见图 B. 1 和图 B. 2 。

　　图 B.1 艾司唑仑气相色谱图

　　图 B.2 艾司唑仑质谱图

　　B.2 艾司唑仑质谱特征离子见表 B. 1 。

　　表 B.1 艾司唑仑质谱特征离子