GB/T 38583-2020 刺参

　　ICS 65 . 150 B 51

　　中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准

　　GB/T 38583—2020

　　刺 参

　　Seacucumber

　　2020-03-06 发布 2020-10-01 实施

　　国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会

　　发

　　布

　　GB/T 38583—2020

　　前 言

　　本标准按照 GB/T 1 . 1—2009 给出的规则起草。

　　请注意本文件的某些内容可能涉及专利。 本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

　　本标准由中华人民共和国农业农村部提出。

　　本标准由全国水产标准化技术委员会(SAC/TC 156)归口 。

　　本标准起草单位：山东省海洋资源与环境研究院、大连海洋大学、胜田(福清)食品有限公司、中国标准化研究院。

　　本标准主要起草人：刘丽娟、常亚青、孙国华、任利华、席兴军、宋坚、姜向阳、姜会超、王玮云、刘爱英、姜芳、杨建敏、王凤青、崔艳梅、王锦锋、胡正红。

　　GB/T 38583—2020

　　刺 参

　　1 范围

　　本标准给出了刺参 Apostichopusjaponicus(Selenka,1867) 的术语和定义、学名与分类、主要形态

　　与构造特征、繁殖、分子遗传学特性、检测方法和判定规则。

　　本标准适用于刺参的种质鉴定和检测。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注 日期的引用文件，仅注 日期的版本适用于本文件 。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

　　GB/T 18654 . 2 养殖鱼类种质检验 第 2 部分：抽样方法

　　3 术语和定义

　　下列术语和定义适用于本文件。

　　3.1

　　管足 podia

　　棘皮动物特有的一种组织器官，具有吸附、辅助运动、感觉、摄食等功能，内部和水管系统相通，末端有吸盘，吸盘由钙质骨板所支持。

　　注：管足是棘皮动物辐管系统的主要组成部分之 一 。

　　3.2

　　疣足 papillae

　　由管足失去行动功能而形成，与水管系统相通，仅限于背面和侧面，常不规则地散布于步带区，呈锥形肉刺状。

　　3.3

　　步带区 ambulacralzone

　　体壁上有管足分布的区域。

　　3.4

　　骨片 sclerite

　　皮层含有的碳酸钙质的内骨骼。

　　3.5

　　呼吸树 respiratorytrees

　　排泄腔背面腔壁向体腔突出一短管，由短管向左右伸出两枝多分支的树枝状盲管。

　　4 学名与分类

　　4 . 1 学名

　　刺参 Apostichopusjaponicus(Selenka,1867)。

　　GB/T 38583—2020

　　4 . 2 分类地位

　　海参纲(Holothuroidea)、楣手目(Aspidochirotida)、刺参科 (Stichopodidae)、仿刺参属(Aposticho- pus)。

　　5 主要形态与构造特征

　　5 . 1 外部形态

　　体呈扁的圆筒形，两端稍细，横断面略呈四角形。 背面隆起，上有 4 列 ~6 列大小不等、排列不规则的圆锥形疣足(肉刺)。成参体长一般 20 cm~30 cm。口在前端，口周生有 20 个楣状触手，偏于腹面。肛门在后端。 体色变化大，一般背面为黄褐色或栗褐色，腹面为浅黄褐色或赤褐色;此外还有绿、赤褐、紫褐、紫、灰白、红或纯白等色。 腹面平坦，管足密集，排成不很规则的 3 条纵带。 见图 1 。

　　图 1 刺参外部形态

　　5 . 2 内部构造

　　5 . 2 . 1 体壁

　　5 . 2 . 1 . 1 皮层

　　由角质层、表皮、结缔组织和无数小型骨片组成。 体壁分为 5 个步带区和 5 个间步带区，彼此相间排列，呈五辐射结构。

　　5 . 2 . 1 . 2 骨片

　　刺参各组织中存在数量很多的桌形体、扣形体、杆状体、花纹状体、复合盘状体和长孔状体 6 种主要骨片类型(图 2) 。棘和触手中主要骨片类型为扣形体、桌形体和杆状体;管足中主要骨片类型为特有的复合盘状骨片、扣形体和桌形体;呼吸树和肠中主要骨片类型为花纹状体;体壁中主要骨片类型为扣形体和桌形体：刺参幼体体壁骨片为桌形体，塔部高;成体桌形退化，塔部变低或消失，形成小而不规则的扣形体。

　　GB/T 38583—2020

　　说明：

　　A — 桌形体;

　　B — 扣形体;

　　C — 杆状体;

　　D — 长孔状体;

　　E — 花纹状体;

　　F — 复合盘状体。

　　图 2 刺参骨片的图片

　　5 . 2 . 1 . 3 肌肉层

　　由环肌和纵肌组成，外层为环肌，内层为纵肌，纵肌 5 束，呈五辐射分布。

　　5 . 2 . 1 . 4 体腔膜

　　在环肌与纵肌内侧为一层薄膜，附在体腔表面。

　　5 . 2 . 2 消化系统

　　由 口、食道、胃、前肠、中肠、排泄腔和肛门组成，无消化腺。

　　5 . 2 . 3 呼吸系统

　　呼吸器官为呼吸树，管足也具有呼吸功能。

　　5 . 2 . 4 水管系统

　　又称步管系统，分为环状水管和辐水管。

　　5 . 2 . 5 循环系统

　　由血管及血窦组成，无心脏，血液透明呈淡褐色。

　　5 . 2 . 6 神经系统

　　由外神经系统和深层神经系统两部分组成。

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　　5 . 2 . 7 生殖系统

　　刺参是雌雄异体，生殖腺位于食道悬垂膜的两侧，为形状似扫帚状的盲囊结构。

　　6 繁殖

　　6 . 1 性成熟年龄

　　雌性和雄性个体均在 2 龄以上性成熟。

　　6 . 2 产卵量

　　成熟雌性可多次排卵，每头雌性产卵量一般为 2 × 106 粒 ~1 × 107 粒 。

　　7 分子遗传学特性

　　16S rDNA 和 CO Ⅰ DNA序列片段如下：

　　a) 16S rDNA(核糖体 16S rRNA基因)序列片段

　　长度 690 bp。

　　b) CO Ⅰ DNA(细胞色素氧化酶 Ⅰ 基因)序列片段

　　长度 662 bp。

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　　CTTCTTTCGT TTCCGCATCT CTGGAATGAC AATACGAAAG CTTTCCACCG TCACACCATA 660

　　CG 662

　　8 检测方法

　　8 . 1 抽样

　　按照 GB/T 18654 . 2 规定执行。

　　8 . 2 外部形态

　　在充足自然光线下肉眼观察。

　　8 . 3 骨片检测方法

　　从刺参背脊中部，切取约 1 cm3 的体壁组织。 双蒸水洗净，放入 5 mL 小烧杯中，滴加 1 mL 10% NaClO 溶液消化 30 s。 挑出未消化的组织块，滴加 3 mL 双蒸水，待白色骨片沉淀。 弃去上层溶液，滴加双蒸水，重复漂洗 3 次，吸取骨片悬液显微观察骨片形态。

　　8 . 4 其他内部构造

　　解剖后用解剖镜或肉眼观察。

　　8 . 5 繁殖

　　8 . 5 . 1 年龄

　　养殖刺参可通过查阅养殖记录确定年龄，体重达 125 g 以上可进行繁殖。

　　8 . 5 . 2 排卵量

　　取发育成熟的亲参，人工诱导排卵，统计每头雌参排卵量。

　　8 . 6 分子遗传学特性分析

　　8 . 6 . 1 DNA 的提取

　　取纵肌 100 mg剪碎后，DNA提取试剂盒或常规酚-氯仿方法提取总 DNA,灭菌双蒸水溶解备用。

　　8 . 6 . 2 引物序列

　　16S F: 5′-AACAGAACAGCACCCGAAAT-3′; 16S R: 5′-TATGCTACCTTTGCACGGTC-3′。

　　CO Ⅰ F: 5′-TTCTTGTTTGGGCCCACCTT-3′;CO Ⅰ R: 5 -CGTATGGTGTGACGGTGGAA -3 。

　　8 . 6 . 3 反应条件

　　PCR反应液配方见附录 A。反应条件：94 ℃变性 3 min; 94 ℃变性 30 s, 55 ℃退火 30 s, 72 ℃延伸45 s, 35 个循环;72 ℃延伸 5 min, 4 ℃保温。

　　8 . 6 . 4 片段回收、纯化与序列测定

　　PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后，回收纯化目的片段，测序。

　　GB/T 38583—2020

　　9 判定规则

　　符合第 5 章要求，且 16S rDNA或 CO Ⅰ 基因片段测序结果与第 7 章序列比对，K2P 遗传距离小于2%,判定为合格。

　　GB/T 38583—2020

　　附 录 A

　　(规范性附录) PCR扩增反应液

　　加超纯水配制成 25 μL 的反应体系。