GB/T 37040-2018 染料产品中致癌染料的限量和测定

　　ICS 7 1 . 100 . 0 1 ;87 . 060 . 10 G 55

　　中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准

　　GB/T 37040—2018

　　染料产品中致癌染料的限量和测定Limitanddeterminationofcarcinogenicdyesindyeproducts

　　2018-12-28 发布 2019-1 1-01 实施

　　国家市场监督管理总局中国国家标准化管理委员会

　　发

　　布

　　GB/T 37040—2018

　　前 言

　　本标准按照 GB/T 1 . 1—2009 给出的规则起草。

　　本标准由中国石油和化学工业联合会提出。

　　本标准由全国染料标准化技术委员会(SAC/TC 134)归口 。

　　本标准起草单位：沈阳化工研究院有限公司、浙江博澳染料工业有限公司、金华双宏化工有限公司、金华恒利康化工有限公司、中国化工经济技术发展中心、国家染料质量监督检验中心。

　　本标准主要起草人：吕双、周松林、徐建成、楼益义、薛岩、季浩、黄俊峰、章国栋、吴平、姬兰琴。

　　GB/T 37040—2018

　　染料产品中致癌染料的限量和测定

　　警示 — 使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验。 本标准并未指出所有可能的安全问题 。使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规规定的条件。

　　1 范围

　　本标准规定了染料产品中 12 种致癌染料(见附录 A)的限量和测定方法。

　　本标准适用于各种剂型的染料产品。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注 日期的引用文件，仅注 日期的版本适用于本文件 。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

　　GB/T 6682—2008 分析实验室用水规格和试验方法 (ISO 3696:1987, MOD)

　　GB/T 8170—2008 数值修约规则与极限数值的表示和判定

　　3 要求

　　染料产品中的各致癌染料(见附录 A)的含量应不大于 150 mg/kg。

　　4 原理

　　样品经溶解(或萃取)后，采用高效液相色谱-二极管阵列检测器法(HPLC-DAD) 进行定性，采用峰面积外标法对致癌染料进行定量;对有检出且不确定的样品，采用液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS) 进行定性测定。

　　5 试验方法

　　5 . 1 一般规定

　　除非另有规定，仅使用确认为分析纯的试剂和 GB/T 6682—2008 中规定的三级水。 检验结果的判定按 GB/T 8170—2008 中的 4 . 3 . 3 修约值比较法进行。

　　5 . 2 试剂和材料

　　5 . 2 . 1 致癌染料标准品(见附录 A) 。

　　5 . 2 . 2 甲醇，色谱纯。

　　5 . 2 . 3 乙腈，色谱纯。

　　5 . 2 . 4 正四丁基溴化铵。

　　GB/T 37040—2018

　　5 . 2 . 5 磷酸二氢钾。

　　5 . 2 . 6 乙酸铵 。

　　5 . 3 仪器和设备

　　5 . 3 . 1 液相色谱仪：输液泵 —流量范围 0 . 1 mL/ min~ 5 . 0 mL/min, 在此范围内其流量稳定性为±1% ;带二极管阵列检测器(DAD) 。

　　5 . 3 . 2 液相色谱-质谱联用仪：配有电喷雾离子源。

　　5 . 3 . 3 色谱工作站或积分仪。

　　5 . 3 . 4 平头微量注射器。

　　5 . 3 . 5 超声波发生器。

　　5.3.6 磨口具塞锥形瓶：150 mL。

　　5.3.7 0.45 μm 聚四氟乙烯薄膜过滤头。

　　5 . 4 标准溶液的配制

　　5.4. 1 标准储备溶液(200 mg/L)

　　配制有效浓度为 200 mg/L 的附录 A所列的单组分致癌染料标样标准储备甲醇溶液，在冰箱冷冻室避光保存，有效期为 1 年 。

　　5 . 4 . 2 标准工作溶液

　　A组：从碱性紫 14 标准储备溶液中取 0 . 5 mL 置于 50 mL容量瓶中，用甲醇稀释定容。

　　B组：从其余 11 个标准储备溶液中各取 0 . 5 mL 置于 50 mL容量瓶中，用甲醇稀释定容。

　　标准工作液可根据需要配制成其他合适的浓度，现用现配。

　　5 . 5 样品溶液的制备

　　甲醇可溶解染料：称取 0 . 5 g试样(精确至 0 . 000 1 g) ,置于 50 mL 容量瓶中，用甲醇溶解，稀释定容，于超声波发生器中震荡、充分溶解后备用。

　　甲醇不溶解染料：称取 0 . 5 g试样(精确至 0 . 000 1 g) ,置于 100 mL磨口具塞锥形瓶中，精确加入50 mL 甲醇，与超声波发生器中萃取 30 min,冷却至室温后，用 0 . 45 μm 聚四氟乙烯薄膜过滤头将萃取液过滤备用。

　　5 . 6 色谱分析

　　5 . 6 . 1 HPLC-DAD分析方法

　　5 . 6 . 1 . 1 HPLC-DAD色谱条件

　　5 . 6 . 1 . 1 . 1 由于测试结果取决于所使用的仪器，因此不可能给出色谱分析的普遍参数。 采用下列参数已被证明对测试是合适的。 可根据不同仪器设备，选择最佳分析条件。

　　5.6. 1 . 1 .2 色谱柱：长为 150 mm, 内径为 3.9 mm 的不锈钢柱，固定相为 RP18 ,粒径 5 μm。

　　5.6. 1 . 1 .3 检测波长：200 nm~700 nm。

　　5.6. 1 . 1 .4 定量波长：400 nm、500 nm、540 nm、590 nm、620 nm。

　　5.6. 1 . 1 .5 流速：0.8 mL/min。

　　GB/T 37040—2018

　　5.6. 1 . 1 .6 进样量：20 μL。

　　5.6. 1 . 1 .7 柱温：40 ℃。

　　5 . 6 . 1 . 1 . 8 流动相：流动相 A：乙腈;流动相 B: 2 g/L正四丁基溴化铵水溶液，2 g/L磷酸二氢钾水溶液。浓度梯度：35 min线性浓度梯度从 A ∶ B=25 ∶ 75(体积比)至 A ∶ B= 60 ∶ 40(体积比)。

　　5 . 6 . 1 . 2 操作

　　开启液相色谱仪。 待仪器各项操作条件稳定后，用微量注射器吸取 20 μL试样溶液和标准工作溶液 A、B分别注入进样阀中，待最后一个组分流出完毕(参见附录 B),用色谱工作站或积分仪进行结果处理。 在规定的检测波长下(见附录 A),通过目标化合物的保留时间及紫外-可见光谱进行定性，以峰面积外标法进行定量。

　　5 . 6 . 1 . 3 结果计算

　　各种致癌染料的含量以质量分数 ∞i 计，数值用毫克每千克(mg/kg)表示，按式(1)计算：

　　…………………………( 1 )

　　式中：

　　Ai —试样溶液(试样萃取液)中致癌染料 i 的峰面积数值;

　　cis —标准工作溶液中致癌染料 i 的浓度，单位为毫克每升(mg/L) ;

　　V —样品溶液的体积，单位为毫升(mL) ;

　　Ais —标准工作溶液中致癌染料 i 的峰面积数值;

　　m —试样的质量，单位为克(g) 。

　　计算结果保留到整数位。

　　5.6.2 HPLC-MS分析方法

　　5.6.2. 1 HPLC-MS色谱条件

　　5 . 6 . 2 . 1 . 1 由于测试结果取决于所使用的仪器，因此不可能给出色谱分析的普遍参数。 采用下列参数已被证明对测试是合适的。 可根据不同仪器设备，选择最佳分析条件。

　　5.6.2. 1 .2 色谱柱：长为 150 mm, 内径为 3.9 mm 的不锈钢柱，固定相为 RP18 ,粒径 5 μm。

　　5.6.2. 1 .3 流速：0.4 mL/min。

　　5.6.2. 1 .4 柱温：40 ℃。

　　5.6.2. 1 .5 进样体积：2 μL。

　　5.6.2. 1 .6 流动相：水相 A: 0.01 mol/L 乙酸铵溶液;有机相 B：乙腈(含 0.1%甲酸)。

　　5 . 6 . 2 . 1 . 7 梯度淋洗程序见表 1 。

　　5.6.2. 1 .8 扫描方式：全扫(Scan)。

　　5 . 6 . 2 . 1 . 9 DP 电压：100 V 。

　　5 . 6 . 2 . 1 . 10 离子源电压：4 500 V。

　　5.6.2. 1 . 1 1 离子源温度：450 ℃。

　　5 . 6 . 2 . 1 . 12 HPLC-MS 流动相梯度：HPLC-MS 流动相梯度见表 1 。

　　GB/T 37040—2018

　　表 1 HPLC-MS流动相梯度

　　5 . 6 . 2 . 2 操作

　　开启液相色谱-质谱仪。 待仪器各项操作条件稳定后，用微量注射器吸取 20 μL试样溶液和标准工作溶液 A、B分别注入进样阀中，待最后一个组分流出完毕(参见附录 B),用色谱工作站进行结果处理。通过特征离子及比较试样与标样色谱峰的保留时间进行定性。

　　5 . 7 色谱图

　　使用本方法测定的致癌染料液相色谱图参见附录 B。

　　6 最小检出限、精密度和回收率

　　6 . 1 最小检出限

　　本方法各致癌染料的最小检出限为 10 mg/kg。

　　6 . 2 精密度

　　在同一实验室，由同一操作者使用相同设备，按相同的测试方法，并在短时间内对同一被测对象相互独立进行的测试获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于其算术平均值的 10%。

　　6 . 3 回收率

　　采用标准加入法，将 1 mL 的标准储备液加入到经本方法测定确定不含有致癌染料的样品中，按第5 章操作，测得的致癌染料回收率应为 70%~130%。

　　7 试验报告

　　试验报告至少应给出以下内容：

　　a) 试样描述;

　　b ) 使用的标准编号;

　　c) 试验结果;

　　d) 偏离标准的差异;

　　e) 试验日期。

　　GB/T 37040—2018

　　附 录 A

　　(规范性附录)

　　致癌染料 HPLC-DAD方法检测波长和 HPLC-MS方法特征离子致癌染料 HPLC-DAD方法检测波长和 HPLC-MS方法特征离子见表 A. 1 。

　　表 A.1 致癌染料 HPLC-DAD方法检测波长和 HPLC-MS方法特征离子

　　GB/T 37040—2018

　　附 录 B

　　(资料性附录)

　　不同检测波长下标准工作溶液的 HPLC-DAD法色谱示意图

　　B.1 标准工作溶液 A在 540 nm 波长下液相色谱示意图参见图 B. 1 。

　　说明：

　　1 — 碱性紫 14 。

　　图 B.1 标准工作溶液 A在 540 nm波长下液相色谱示意图

　　B.2 标准工作溶液 B在 400 nm 波长下液相色谱示意图参见图 B. 2 。

　　说明：

　　2 — 分散黄 3 。

　　图 B.2 标准工作溶液 B在 400 nm波长下液相色谱示意图

　　GB/T 37040—2018

　　B.3 标准溶液 B在 500 nm 波长下液相色谱示意图参见图 B. 3 。

　　说明：

　　3 — 酸性红 26 ;

　　4 — 直接红 28 ;

　　5 — 分散橙 11 。

　　图 B.3 标准溶液 B在 500 nm波长下液相色谱示意图

　　B.4 标准溶液 B在 540 nm 波长下液相色谱示意图参见图 B. 4 。

　　说明：

　　6 — 碱性红 9 。

　　图 B.4 标准溶液 B在 540 nm波长下液相色谱示意图

　　GB/T 37040—2018

　　B.5 标准溶液 B在 590 nm 波长下液相色谱示意图参见图 B. 5 。

　　说明：

　　7 — 分散蓝 1 ;

　　8 — 碱性紫 3 ;

　　9 — 直接蓝 6 ;

　　10 — 直接黑 38 。

　　图 B.5 标准溶液 B在 590 nm波长下液相色谱示意图

　　B.6 标准溶液 B在 620 nm 波长下液相色谱示意图参见图 B. 6 。

　　说明：

　　11 — 碱性蓝 26 ;

　　12 — 碱性绿 4 。

　　图 B.6 标准溶液 B在 620 nm波长下液相色谱示意图