GB/T 33111-2016 达氏鲟

　　ICS 65. 150 B 52

　　中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准

　　GB/T 33111—2016

　　达 氏 鲟

　　Dabry’s sturgeon

　　2016-10-13发布 2017-05-01实施

　　中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会

　　发

　　布

　　GB/T 33111—2016

　　前 言

　　本标准按照 GB/T 1. 1—2009给出的规则起草 。

　　请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任 。

　　本标准由中华人民共和国农业部提出 。

　　本标准由全国水产标准化技术委员会(SAC/TC156)归 口 。

　　本标准起草单位 : 中国水产科学研究院长江水产研究所 。

　　本标准主要起草人 :危起伟 、吴金明 、张书环 、李罗新 、杜浩 、汪登强 。

　　达 氏 鲟

　　1 范围

　　本标准给出了达氏鲟(Acipenserdabryanus Duméril, 1868) 的 主 要 形 态 构 造 特 征 、生 长 和 繁 殖 特性 、细胞遗传学特性 、生化遗传学特征 、检测方法和判定规则 。

　　本标准适用于达氏鲟的种质检测和鉴定 。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注 日期的引用文件 ,仅注 日期的版本适用于本文件 。凡是不注日期的引用文件 ,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件 。

　　3 学名与分类

　　3. 1 学名

　　达氏鲟(AcipenserdabryanusDuméril,1868) 。

　　3.2 分类

　　硬骨鱼纲(Osteichthyes) 、鲟形目(Acipenseriformes) 、鲟科(Acipenseridae) 、鲟属(Acipenser) 。

　　4 主要形态构造特征

　　4. 1 外部形态

　　4. 1. 1 外形

　　体延长呈梭状 。头较小呈楔形 。 口下位 ,横裂状 。具触须 2 对 ,位于吻部腹面 。 眼位于头侧上方 。背鳍高 ,鳍基部长 ,起点在腹鳍起点后上方 ;胸鳍长 ,位于胸部腹侧 ;腹鳍 、臀鳍较短小 ;尾鳍歪形 ,上叶长于下叶 。鱼体背部 、体侧及腹部具骨板 5行 。体表骨板以外区域裸露 ,具颗粒状小突起 。背部和体侧上半部青灰色 ,下半部白色 ,腹部黄白色 。各鳍青灰色 ,边缘为灰白色 。

　　达氏鲟的外部形态见图 1。

　　GB/T 33111—2016

　　图 1 达氏鲟的外部形态图

　　4. 1.2 可数性状

　　4. 1.2. 1 背鳍式

　　D. 43~ 59。

　　4. 1.2.2 臀鳍式

　　A. 25~ 39。

　　4. 1.2.3 骨板数

　　背骨板数 :8块 ~ 14块 。

　　侧骨板数 :左右各 1行 ,均为 26块 ~41块 。

　　腹骨板数 :左右各 1行 ,均为 8块 ~ 15块 。

　　4. 1.2.4 第一鳃弓外侧鳃耙数

　　19枚 ~ 55枚 。

　　4. 1.3 可量性状

　　不同体长组个体的可量性状范围见表 1。

　　表 1 达氏鲟不同体长组可量性状

　　4.2 内部构造

　　4.2. 1 鳔

　　鳔一室 ,前部膨大 ,两侧略突起 ,后部变小 。有鳔管与食道相通 。

　　4.2.2 消化系统

　　胃呈“J”形 。具 7个 ~ 8个螺旋瓣 。

　　4.2.3 腹膜

　　3 kg以下个体腹膜多为白色 ,3 kg以上个体腹膜呈褐色或黑褐色 。

　　5 生长和繁殖特性

　　5. 1 生长

　　不同年龄组的鱼体长和体重实测值见表 2。

　　表 2 达氏鲟(野生群体)各年龄组的体长和体重实测值

　　5.2 繁殖

　　5.2. 1 成熟年龄

　　雄鱼 4龄 ,雌鱼 6龄 。

　　5.2.2 产卵类型

　　产粘性卵 ,一年一次 ,分为春季(3月 ~4 月)和秋季(11月 ~ 12月)两种产卵群体 。

　　5.2.3 繁殖周期

　　1 年 ~ 2 年 。

　　5.2.4 怀卵量

　　绝对怀卵量 0. 6×105 粒 ~ 1. 3×105 粒 。

　　5.2.5 卵子特性

　　成熟卵子黑色或灰黑色 ,卵径 2. 8 mm~ 3. 5 mm。

　　6 细胞遗传学特性

　　染色体数 :2n= 268±;核型公式 :70 m+16 sm+26st+156±mc,染色体组型见图 2。

　　图 2 达氏鲟染色体组型

　　7 生化遗传学特征

　　达氏鲟眼晶状体苹果酸脱氢酶(MDH)同工酶电泳及扫描图见图 3。

　　图 3 达氏鲟眼晶状体苹果酸脱氢酶(MDH)同工酶电泳图和扫描图

　　8 检测方法

　　8. 1 抽样

　　按 GB/T 18654. 2 的规定执行 。

　　8.2 性状测定

　　按 GB/T 18654. 3 的规定执行 。

　　8.3 怀卵量测定

　　按 GB/T 18654. 6 的规定执行 。

　　8.4 年龄鉴定

　　以匙骨和胸鳍为年龄鉴定材料 。

　　取匙骨 ,洗净 , 晾干保存 。匙骨基部黑色带团为第一年轮 ,外部每一窄带为年轮 。

　　胸鳍年龄测定按 GB/T 18654. 4 的规定执行 。

　　整个年龄测定以匙骨年轮和胸鳍切片年轮相互补充和纠正 。

　　8.5 染色体检测

　　接 GB/T 18654. 12的规定执行 。

　　8.6 同工酶检测

　　8.6. 1 样品的采集与制备

　　取眼晶状体 , 加 200 μL双 蒸 水 在 1 mL 匀 浆 器 中 冰 浴 匀 浆 , 匀 浆 液 于 4 ℃ 、12 000 r/min离 心30 min,取上清液 ,重复离心至上清液澄清 ,将上清液保存于 -20℃冰箱中备用 。

　　8.6.2 制胶

　　将制备的 7. 5%聚丙烯酰胺凝胶液(见 A. 1. 2)倒入模板 ,插好梳子 ,静置于 37 ℃恒温箱中 30 min,待凝胶聚合后 ,置于 4 ℃冰箱中备用 。

　　8.6.3 点样

　　吸取 20 μL预先制备的样品与 2 μL加样指示剂混匀 ,加到点样孔中 。

　　8.6.4 电泳分离

　　采用垂直电泳 ,聚丙烯酰胺凝胶浓度为 7. 5% , 电极缓冲液为 Tris-甘氨酸(pH8. 3) 。在 250 V 电压下电泳 3 h。 电泳结束后 ,放入同工酶染色液 ,37 ℃恒温染色 。

　　同工酶电泳分析中使用的各种试剂见附录 A。

　　8.6.5 结果分析

　　按 GB/T 18654. 13的规定执行 。

　　9 判定规则

　　按 GB/T 18654. 1 的规定执行 。

　　附 录 A

　　(规范性附录)

　　同工酶各试剂的配制

　　A. 1 凝胶的制备

　　A. 1. 1 凝胶溶液的配制(见表 A. 1)

　　表 A. 1 溶液的配方

　　A. 1.2 凝胶的制备

　　采用 7. 5%的 丙 烯 酰 胺 凝 胶 对 达 氏 鲟 眼 晶 体 的 苹 果 酸 脱 氢 酶 进 行 电 泳 分 离 , 该 凝 胶 液 配 方 见表 A. 2。

　　表 A.2 7. 5%凝胶液制备配方

　　A.2 加样指示剂

　　0. 15%溴酚蓝-50%甘油 :称取 0. 15 g溴酚蓝溶于 50 mL蒸馏水 ,再加 50 mL甘油混匀 。

　　A.3 电极缓冲液

　　母液配 置 : 称 取 甘 氨 酸 28. 80 g 溶 于 800 mL 蒸 馏 水 , 用 Tris 调 pH 至 8. 3, 加 蒸 馏 水 定 容至1 000 mL。

　　电泳时将电极缓冲液母液稀释 10倍使用 。

　　A. 4 同工酶染色液的配制

　　先配制染色用各溶液 ,见表 A. 3,再配制染色液 。

　　表 A. 3 染色用溶液配方

　　染色液按 A ∶ B ∶ C ∶ H2 O= 12 ∶ 12 ∶ 25 ∶ 90的比例混合均匀 。