GB/T 31740.2-2015 茶制品 第2部分：茶多酚

　　ICS 67. 140. 10 X 55

　　中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准

　　GB/T 31740.2—2015

　　茶制品 第 2 部分 :茶多酚

　　Teaproducts—Part2:Teapolyphenols

　　2015-07-03发布 2015-11-02实施

　　中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会

　　发

　　布

　　GB/T 31740.2—2015

　　前 言

　　GB/T 31740《茶制品》分为如下几个部分 :

　　— 第 1部分 : 固态速溶茶 ;

　　— 第 2部分 :茶多酚 ;

　　— 第 3部分 :茶黄素 。

　　本部分为 GB/T 31740的第 2部分 。

　　本部分按照 GB/T 1. 1—2009给出的规则起草 。

　　本部分由中华全国供销合作总社提出 。

　　本部分由全国茶叶标准化技术委员会(SAC/TC339)归 口 。

　　本部分起草单位 : 中华全国供销合作总社杭州茶叶研究院 、杭州大茗堂生物科技有限公司 、杭州怡倍嘉茶叶科技有限公司 、晨光生物科技集团股份有限公司 、浙江茶资源跨界应用技术重点实验室 、浙江茶能科技股份有限公司 、湖州荣凯植物提取有限公司 、宁波建明生物科技发展有限公司 、浙江大学 、浙江省茶叶集团股份有限公司 、浙江绍兴东灵保健食品有限公司 。

　　本部分主要起草人 :杨秀芳 、张士康 、孔俊豪 、徐建峰 、周军勇 、田洪 、谭蓉 、涂云飞 、刘相真 、梁慧玲 、高玉萍 、陈丽 、施济人 、屠幼英 、王岳飞 、毛立民 、张铰铣 、高悦 、李大伟 、应维强 、潘学贵 、杨贤强 。

　　茶制品 第 2 部分 :茶多酚

　　1 范围

　　GB/T 31740的本部分规定了茶多酚的分类与规格 、技术要求 、试验方法 、检验规则 、标志标签 、包装 、运输和贮存 。

　　本部分适用于以茶叶或茶鲜叶为原料 ,经提取而成的以儿茶素为主体的酚类化合物的固态产品 。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注 日期的引用文件 ,仅注 日期的版本适用于本文件 。凡是不注日期的引用文件 ,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件 。

　　GB/T 191 包装储运图示标志

　　GB 2760 食品安全国家标准 食品添加剂使用标准

　　GB 2762 食品安全国家标准 食品中污染物限量

　　GB 2763 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量

　　GB 5749 生活饮用水卫生标准

　　GB 7718 食品安全国家标准 预包装食品标签通则

　　GB/T 8306 茶 总灰分测定

　　GB/T 18798. 1 固态速溶茶 第 1部分 :取样

　　GB/T 18798. 2 固态速溶茶 第 2部分 :总灰分测定

　　定量包装商品计量监督管理办法(国家质量监督检验检疫总局〔2005〕第 75号令)

　　国家质量监督检验检疫 总 局 关 于 修 改《食 品 标 识 管 理 规 定》的 决 定(国 家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 局〔2009〕第 123号令)

　　3 分类与规格

　　按照产品茶多酚含量分为 TP30、TP70和 TP80等三种规格 。

　　4 技术要求

　　4. 1 原辅材料要求

　　4. 1. 1 茶叶原料(含茶鲜叶)应品质正常 ,无异味 ,无霉变 ,不着色 ,不含有非茶类物质 ,卫生指标应符合GB 2762、GB 2763的规定 。

　　4. 1.2 生产用水应符合 GB 5749的规定 。

　　4. 1.3 加工过程中所用加工助剂应符合 GB 2760的规定 。

　　4.2 性状

　　呈淡黄色至红褐色或茶褐色的粉末 ,味涩 ,易溶于水 、乙醇和乙酸乙酯 ,在碱性条件或遇铁质时易变色 ,有吸湿性 。

　　GB/T 31740.2—2015

　　4.3 理化指标

　　理化指标应符合表 1 的规定 。

　　表 1 理化指标

　　4.4 净含量

　　应符合《定量包装商品计量监督管理办法》的规定 。

　　5 试验方法

　　5. 1 茶多酚

　　按附录 A规定的方法检验 。

　　5.2 儿茶素类

　　按附录 B规定的方法检验 。

　　5.3 咖啡碱

　　按附录 B规定的方法检验 。

　　5.4 水分

　　按附录 C规定的方法检验 。

　　5.5 总灰分

　　TP30按 GB/T 18798. 2规定的方法检验 ,TP70、TP80按 GB/T 8306规定的方法检验 。

　　6 检验规则

　　6. 1 检验批次

　　6. 1. 1 取样以 “批 ”为单位 , 由生产企业的质量管理部门按照其相应的规则确定产品组批 , 同批产品的品质和规格一致 。

　　6. 1.2 取样按 GB/T 18798. 1 的规定执行 。

　　6.2 出厂检验

　　每批产品出厂时 ,应做出厂检验 ,经检验合格签发合格证后 ,方可出厂 。 出厂检验项目为水分 、总灰分 、茶多酚 、儿茶素类 、咖啡碱 。

　　6.3 型式检验

　　型式检验为第 4章(4. 1 除外)规定的所有项 目 。型式检验每年 1 次 ,或当出现下列情况之一时进行检验 :

　　a) 原料 、工艺发生较大变化时 ;

　　b) 停产后重新恢复生产时 ;

　　c) 出厂检验结果与前一批检验结果有较大差异时 ;

　　d) 国家法定质量监督机构提出型式检验要求时 。

　　6.4 判定规则

　　按第 4章(4. 1 除外)要求的项 目 ,任一项不符合规定的产品均判为不合格产品 。

　　6.5 复验

　　检验项目结果有争 议 时 , 可 以 在 同 批 产 品 中 加 倍 抽 取 样 品 对 不 合 格 项 目 进 行 复 验 , 以 复 验 结 果为准 。

　　7 标志标签、包装、运输和贮存

　　7. 1 标志标签

　　包装储运图示标志应符合 GB/T 191的规定 ,产品标签应符合 GB 7718和《国家质量监督检验检疫总局关于修改<食品标识管理规定>的决定》的规定 。

　　7.2 包装

　　包装容器应清洁 、干燥 、不透光 、无异味 、无毒 ,不影响茶多酚品质 。

　　7.3 运输

　　运输工具应清洁 、干燥 、无异味 、无污染 。运输时应有防雨 、防潮 、防暴晒措施 ,不得与有毒 、有害 、有异味 、易污染的物品混装 、混运 。

　　7.4 贮存

　　产品应在包装状态下贮存于低温 、清洁 、干燥 、无异气味的专用仓库中 ,不得与有毒 、有害 、有异味 、易污染的物品混放 。

　　附 录 A

　　(规范性附录)

　　茶多酚含量检测方法

　　A. 1 原理

　　福林酚(Folin-Ciocalteu)试剂氧化茶多酚中—OH基团并显蓝色 ,最大吸收波长 λ 为 765 nm ,用没食子酸作校正标准定量茶多酚 。

　　A.2 仪器

　　A.2. 1 分析天平 :感量 0. 000 1 g。

　　A.2.2 分光光度计 。

　　A.3 试剂

　　A.3. 1 本方法所用水均为重蒸馏水 ,除特殊规定外 ,所用试剂为分析纯 。

　　A.3.2 无水碳酸钠(Na2CO3 ) 。

　　A.3.3 福林酚(Folin-Ciocalteu)试剂 。

　　A.3.4 10%福林酚(Folin-Ciocalteu)试剂(现配) :将 10 mL福林酚(Folin-Ciocalteu) 试剂(A. 3. 3) 转移到 100 mL容量瓶中 ,用水定容并摇匀 。

　　A.3.5 7. 5% Na2CO3 (质 量 分 数) : 称 取 37. 50 g± 0. 01 g Na2CO3 (A. 3. 2) , 加 适 量 水 溶 解 , 转 移 至500 mL 容量瓶中 ,定容至刻度 ,摇匀(室温下可保存 1个月) 。

　　A.3.6 没食子酸标准储备溶液(1 000 μg/mL) :称取 0. 110 g±0. 001 g一水合没食子酸(GA,相对分子质量 188. 14) ,于 100 mL容量瓶中溶解并定容至刻度 ,摇匀(现配) 。

　　A.3.7 没食子酸工作液 :用移液管分别移取 1. 0 mL、2. 0 mL、3. 0 mL、4. 0 mL、5. 0 mL 的没食子酸标准储备溶液(A. 3. 6)于 100 mL容量瓶中 ,分别用水定容至刻度 ,摇匀 ,浓度分别为 10 μg/mL、20 μg/mL、 30 μg/mL、40 μg/mL、50 μg/mL。

　　A.4 操作步骤

　　A.4. 1 干物质含量测定

　　按附录 C 的规定 ,先测定水分含量 ,再计算干物质含量 。干物质含量= (1-水分含量) ×100% 。

　　A.4.2 测试液的制备

　　样品溶液 :称取 0. 1 g(精确到 0. 000 1 g)茶多酚 ,加入 ≤60℃水溶解 ,冷却后定容至 100 mL。如有浑浊或沉淀 ,过滤后待用 。 吸取 2. 5 mL母液定容至 50 mL容量瓶中 , 即为茶多酚测试液 。

　　A.4.3 测定

　　A.4.3. 1 用移液管分别移取没食子酸工作液(A. 3. 7) 、水(作空白对照用) 及测试液(A. 4. 2) 各 1 mL 于

　　刻度试管内 ,在每个试管内分别加入 5. 0 mL 的福林酚(Folin-Ciocalteu)试剂(A. 3. 4) ,摇匀 ,反应 3 min~ 8 min 内 ,加入 4. 0 mL 7. 5% Na2CO3 溶液(A. 3. 5) ,摇匀 。 室温下放置 60 min。用 10 mm 比色皿 ,在765 nm 波长条件下用分光光度计测定吸光度(A) 。

　　A.4.3.2 根据没食子酸工作液(A. 3. 7)的吸光度(A)与各工作溶液的没食子酸浓度 ,制作标准曲线 。

　　A.5 结果计算

　　A.5. 1 计算方法

　　没食子标准曲线定量 ,茶多酚含量按式(A. 1)计算 :

　　茶多酚含量

　　式中 :

　　A — 样品测试液吸光度 ;

　　V — 样品溶液体积 ,100 mL;

　　d — 稀释因子(通常为 2 mL稀释成 10 mL,则其稀释因子为 5) ;

　　SLOPEStd— 食子酸标准曲线的斜率 ;

　　m — 样品质量 ,单位为克(g) ;

　　w — 样品干物质含量 , % 。

　　如果符合重复性(A. 5. 2) ,取两次测定的算术平均值作为结果 ,保留小数点后一位 。

　　A.5.2 重复性

　　同一样品两次测定值的绝对差值不得超过算术平均值的 10% 。

　　附 录 B

　　(规范性附录)

　　儿茶素类及咖啡碱含量的检测方法

　　B. 1 原理

　　茶多酚用 ≤60℃水溶解 ,用 C18柱 、检测波长 278 nm、梯度洗脱 、HPLC分析测定茶多酚产品中儿茶素类及咖啡碱含量 ,外标法定量 。

　　B.2 仪器

　　B.2. 1 分析天平 :感量 0. 000 1 g。

　　B.2.2 水浴 。

　　B.2.3 高压液相色谱仪(HPLC) :包含梯度洗脱及紫外检测器(检测波长 278 nm) 。

　　B.2.4 数据处理系统 。

　　B.2.5 液相色谱柱 :C18 (粒径 5 μm ,250 mm×4. 6 mm) 。

　　B.3 试剂

　　B.3. 1 本方法所用水为重蒸馏水 ,除特殊规定外 ,所用试剂为分析纯 。

　　B.3.2 乙腈 :色谱纯 。

　　B.3.3 甲醇 。

　　B.3.4 冰乙酸 。

　　B.3.5 甲醇水溶液(体积比) :7/3。

　　B.3.6 EDTA-2Na溶液 :10 mg/mL(现配) 。

　　B.3.7 抗坏血酸溶液 :10 mg/mL(现配) 。

　　B.3. 8 稳定溶液 :分别将 25 mL EDTA-2Na溶液(B. 3. 6) , 25 mL抗坏血酸溶液(B. 3. 7) , 50 mL 乙腈(B. 3. 2)加入 500 mL容量瓶中 ,用水定容至刻度 ,摇匀 。

　　B.3.9 液相色谱流动相

　　B.3.9. 1 流动相 A:分别将 90 mL乙腈(B. 3. 2) ,20 mL冰乙酸(B. 3. 4) ,2 mL EDTA-2Na溶液 (B. 3. 6)加入1 L 容量瓶中 ,用水定容至刻度 ,摇匀 。溶液需过 0. 45 μm 膜 。

　　B.3.9.2 流动相 B:分别将 800 mL乙腈(B. 3. 2) ,20 mL冰乙酸(B. 3. 4) ,2 mL EDTA-2Na溶液(B. 3. 6)加入1 L 容量瓶中 ,用水定容至刻度 ,摇匀 。溶液需过 0. 45 μm 膜 。

　　B.3. 10 标准储备溶液

　　B.3. 10. 1 咖啡碱储备溶液 :2. 00 mg/mL。

　　B.3. 10.2 儿茶素类储备溶液 : +C 1. 00 mg/mL, +EC 1. 00 mg/mL, +EGC 2. 00 mg/mL, +EGCG 2. 00 mg/mL, +ECG 2. 00 mg/mL。

　　B.3. 11 标准工作溶液 :用稳定溶液(B. 3. 8)配制 。

　　标准工作溶液的浓度 :咖啡碱 50μg/mL~150μg/mL、+C 50μg/mL~150μg/mL、+EC 50μg/mL~

　　150μg/mL、+EGC 100 μg/mL~ 300 μg/mL、+EGCG 100 μg/mL~ 400 μg/mL、+ECG 50 μg/mL~ 200 μg/mL。

　　B.4 操作步骤

　　B.4. 1 干物质含量测定

　　按附录 C 的规定 ,先测定水分含量 ,再计算干物质含量 。干物质含量= (1-水分含量) ×100% 。

　　B.4.2 测试液的制备

　　称取 0. 1 g~0. 3 g (精确到 0. 0001 g)均匀的茶多酚于 100mL容量瓶 ,加入 ≤60℃水溶解 ,用水定容至刻度 ,摇匀 。用移液管移取上述提取液 2 mL至 10 mL容量瓶中 ,用稳定溶液(B. 3. 8)定容至刻度 ,摇匀 ,过 0. 45 μm 膜 ,待测 。

　　B.4.3 色谱条件

　　流动相流速 :1 mL/min,柱温 :35 ℃ ,紫外检测器 :λ= 278 nm。

　　梯度条件 : 100%A相保持 10 min

　　↓

　　15 min内由 100%A相→ 68%A相 、32%B相

　　↓

　　68%A相 、32%B相保持 10 min

　　↓

　　100%A相

　　B.4.4 测定

　　待流速和柱温稳定后 ,进行空白运行 。准确吸取 10 μL混合标准系列工作液注射入 HPLC。在相同的色谱条件下注射 10 μL测试液 。测试液以峰面积定量 。

　　B.5 结果计算

　　B.5. 1 计算方法

　　儿茶素(咖啡碱)标准物质定量 ,按式(B. 1)计算 :

　　儿茶素含量(咖啡碱含量

　　式中 :

　　A — 所测样品中被测成分的峰面积 ;

　　fStd — 所测成分的校正因子(浓度/峰面积 ,浓度单位 μg/mL) ;

　　V — 样品提取液的体积 ,单位为毫升(mL) ;

　　d — 稀释因子(通常为 2 mL稀释成 10 mL,则其稀释因子为 5) ;

　　m — 样品称取质量 ,单位为克(g) ;

　　w — 样品的干物质含量 , % 。

　　B.5.2 儿茶素类总量计算公式

　　儿茶素类总量( %)= [+EGC含量( %)] +[+C含量( %)] +[+EC含量( %)] +

　　[+EGCG含量( %)] +[+ECG含量( %)]

　　如果符合重复性(B. 5. 3) ,取两次测定的算术平均值作为结果 ,保留小数点后两位 。

　　B.5.3 重复性

　　重复条件下同一样品获得的儿茶素类总量(咖啡碱含量)测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 10% 。

　　附 录 C

　　(规范性附录)

　　水分含量的检测方法

　　C. 1 原理

　　试样在 103 ℃ ±2 ℃的恒温干燥箱中加热 2 h 除去水分 ,称重 。

　　C.2 仪器和用具

　　C.2. 1 鼓风恒温干燥箱 :能自动控制温度在 103 ℃ ±2 ℃ 。

　　C.2.2 铝质烘皿 :具盖 ,直径 75 mm~ 80 mm。

　　C.2.3 干燥器 : 内盛有效干燥剂 。

　　C.2.4 分析天平 :感量 0. 001 g。

　　C.3 操作步骤

　　C.3. 1 铝质烘皿的准备

　　将烘皿连同皿盖(C. 2. 2) 置于 103 ℃ ± 2 ℃的干燥箱(C. 2. 1) 内 , 加 热 1 h 后 加 盖 取 出 , 于 干 燥 器(C. 2. 3) 中冷却至室温 ,称量(精确至 0. 001 g) 。

　　C.3.2 测定步骤

　　称取试样 4 g(精确至 0. 001 g)于已知质量的烘皿中(C. 3. 1)中 ,置于 103 ℃ ±2 ℃干燥箱(C. 2. 1)内(皿盖斜置皿上) ,加热 2 h,加盖取出 ,于干燥器(C. 2. 3)内冷却至室温 ,称量(精确至 0. 001 g) 。

　　C.4 结果计算

　　C.4. 1 计算方法

　　水分含量以质量分数表示 ,按式(C. 1)计算 :

　　水分含量

　　式中 :

　　m1— 试样和铝质烘皿烘前的质量 ,单位为克(g) ;

　　m2— 试样和铝质烘皿烘后的质量 ,单位为克(g) ;

　　m0— 试样的质量 ,单位为克(g) 。

　　如果符合重复性(C. 4. 2)的要求 ,取两次测定的算术平均值作为结果(保留小数点后一位) 。

　　C.4.2 重复性

　　同一样品的两次测定值之差 ,每 100 g不得超过 0. 2 g。