GB/T 40624-2021 黄瓜绢野螟检疫鉴定方法

　　ICS 65 . 020 . 0 1 CCS B 16

　　中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准

　　GB/T 40624—2021

　　黄瓜绢野螟检疫鉴定方法

　　DetectionandidentificationofDiaphanianitidalis(Stoll)

　　2021-10-1 1 发布 2022-05-01 实施

　　国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会

　　发

　　布

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　　前 言

　　本文件按照 GB/T 1 . 1—2020《标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

　　请注意本文件的某些内容可能涉及专利。 本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

　　本文件由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC 271)提出并归口 。

　　本文件起草单位：浙江省检验检疫科学技术研究院、杭州海关、青岛海关技术中心、山西农业大学、拱北海关技术中心。

　　本文件主要起草人：吴志毅、陈鹏程、魏晓棠、徐淼锋、张志伟、黄凌哲、程帆、任琰、田红伟、方文渊、吴颖。

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　　黄瓜绢野螟检疫鉴定方法

　　1 范围

　　本文件规定了黄瓜绢野螟 Diaphanianitidalis(Stoll) 的形态学检疫鉴定方法。

　　本文件适用于黄瓜绢野螟的检疫和鉴定。

　　2 规范性引用文件

　　本文件没有规范性引用文件。

　　3 术语和定义

　　下列术语和定义适用于本文件。

　　3.1

　　横带 fascia

　　横线

　　鳞翅目昆虫贯穿前后翅面的带或线。

　　注：最常见的有前中带(线)、中带(线)、后中带(线)、外缘带(线)等。

　　3.2

　　背兜 tegumen

　　鳞翅目昆虫雄性外生殖器中大而骨化的屋脊状或头巾状结构，由腹部第 9 背板和第 10 背板前面部分组成。

　　3.3

　　爪形突 uncus

　　鳞翅目昆虫雄性外生殖器背兜后伸的中背突起，由腹部第 10 背板后端形成。

　　3.4

　　囊形突 saccus

　　鳞翅目雄虫外生殖器中，第 9 腹节腹板(基腹弧)的中部向前伸入腹部形成的囊状构造，常骨化较强。

　　3.5

　　抱器瓣 valvae(单数 valva)

　　鳞翅目昆虫雄性外生殖器瓣状的成对抱握器官，着生于第 9 腹节上。

　　3.6

　　抱器背 costa

　　鳞翅目昆虫雄性外生殖器抱器瓣背缘的骨化纵带。

　　3.7

　　抱器背基突 transtilla

　　鳞翅目昆虫雄性外生殖器连接两个抱器背的横带状骨化结构。

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　　3.8

　　抱器腹 sacculus

　　鳞翅目昆虫雄性外生殖器抱器瓣腹缘的骨化纵带。

　　3.9

　　阳茎 aedoeagus

　　鳞翅目昆虫雄性外生殖器，位于第 9 腹节内凹形成的生殖腔内、稍骨化的管状构造。

　　3 . 10

　　囊突 signum

　　鳞翅目雌性外生殖器交配囊上的高度骨化的刺状或其他形状的几丁质构造，1 个或数个。

　　3 . 1 1

　　味刷 corema

　　鳞翅目雄虫腹部末端第 8 腹节、第 9 腹节节间膜上着生的鳞毛丛，用于释放雄性信息素。

　　3 . 12

　　毛序 chaetotaxy

　　昆虫幼虫体表刚毛在体节的排列方式。

　　4 黄瓜绢野基本分类信息

　　中文名：黄瓜绢野螟

　　学名：Diaphanianitidalis (Stoll, 1782)

　　异名：Diaphania ℃itralis Hübner, 1818;phalaenanitidalis Stoll, 1781;Margaronianitidalis

　　Cramer , 1782

　　英文名：Pickleworm , Cucumber worm

　　分类 地 位：属 鳞 翅 目 Lepidoptera, 螟 蛾 科 Pyralidae, 斑 野 螟 亚 科 Spilomelinae, 绢 野 螟 属Diaphania Hübner。

　　黄瓜绢野螟是我国进境检疫性有害生物之一，以幼虫取食、钻蛀寄主植物果实及花等造成危害。 绢

　　野螟属在 全 世 界 已 知 有 100 余 种，属 内 黄 瓜 绢野 螟 的 常 见 近 似 种 主 要 有 Diaphania aroalis、 D.cla℃ata、D.hemicitralis、瓜绢野螟 D.indica、褐翅绢野螟 D.nigribasalis、黄杨绢野螟D.perspectalis和 D.praxialis等。

　　该虫主要以幼虫、蛹随寄主植物及其包装材料运输而进行远距离传播。

　　黄瓜绢野螟的寄主、地理分布和生物学特性等信息，见附录 A。

　　5 方法原理

　　黄瓜绢野螟的为害状、生物学特性和传播方式是确定现场检疫方式的主要依据，成虫形态特征是进行种类鉴定的主要依据。 如利用成虫外部形态特征判定其种类仍有疑问时，需进一步解剖制作成虫外生殖器玻片标本，用生物显微镜观察，根据外生殖器形态特征对种类进行判定。

　　6 器材和试剂

　　6 . 1 器材

　　体视显微镜、生物显微镜、培养箱、扩大镜、镊子、剪子、昆虫解剖针、小毛笔、指形管、三角纸袋、样品袋、养虫盒、培养皿、昆虫针、展翅板、硫酸纸、三级台、标签纸、载玻片、盖玻片、烧杯、量筒等。

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　　6 . 2 试剂

　　氢氧化钠或氢氧化钾、蒸馏水、二甲苯、霍氏封固液或加拿大树胶(显微镜用)、无水乙醇、乙醇-甘油

　　保存液(100 mL 75%乙醇，加入 0.5 mL~1 mL 甘油)。

　　7 检疫与培养

　　7 . 1 现场检疫

　　首先确定进境瓜果等寄主货物是否来自或过境黄瓜绢野螟疫区，如是，则需进行现场详细检查。 根据黄瓜绢野螟的为害状(见图 A. 1、图 A. 2),详细检查寄主植物可能携带的幼虫、蛹或成虫等。 注意检查寄主花、芽、茎表面是否有食痕和昆虫排泄物，果实、花等表面是否有蛀孔、虫粪等。 同时详细检查寄主植物包装材料、运输工具表面及缝隙处是否有老熟幼虫或蛹，如有，则进行现场取样，并根据形态初步判定是否疑似黄瓜绢野螟，按照附录 B 和附录 C,将检查获得的幼虫或蛹连同寄主植物一起放入样品袋，老熟幼虫和蛹可单独放入指形管，将获得的成虫装入三角纸袋再放入样品袋。 做好虫样的标识及记录，带至实验室进一步确认。

　　7 . 2 培养

　　将幼虫连同寄主植物一起放入养虫盒，蛹通常单独放入盛有已消毒湿细沙的培养皿，将养虫盒、培

　　养皿置于培养箱内，在温度范围 25 ℃ ~30 ℃、相对湿度分别为 70%~80%(幼虫)和 60%~70%(蛹)

　　的条件下，将幼虫、蛹培养至成虫。

　　8 标本的制备

　　8 . 1 成虫针插标本

　　用小毛笔、镊子、硫酸纸和昆虫针，通过三级台、展翅板将成虫制成针插标本。 干成虫样品需回软后制作。

　　8 . 2 成虫外生殖器玻片标本

　　将成虫腹部取下，浸泡在盛有 10%氢氧化钠水溶液烧杯中，煮沸 3 min~5 min,取出解剖，去掉与外生殖器无关的体壁、肌肉、内脏等，再放到 75%、85%、95%和 100%乙醇中各 10 min,最后置于二甲苯

　　中透明，体视显微镜下整姿，尽量使雄外生殖器构造在视野中为正面图像，再放到载片上，滴加拿大树胶，盖片风干，加贴标签，制成玻片标本。

　　9 实验室鉴定

　　9 . 1 斑野螟亚科的特征

　　喙发达。 下唇须发达，通常弯曲上举，少数平伸。 触角丝状;缺毛隆。 前翅第三径脉 R3 和第四径脉 R4 共柄，第二径脉 R2 与共柄的第三、四径脉 R3+4 靠近或共柄，第五径脉 R5 游离，第二臀脉 2A 与第

　　一臀脉 1A通常形成一封闭的环。后翅共柄的亚前缘脉和第一径脉 Sc+R1 与径分脉 Rs 共柄。前、后

　　翅第二中脉 M2 和第三中脉 M3 从中室后角发出。 听器间突双叶状。 雄性外生殖器爪形突通常发达，形状多变;颚形突通常无;无抱器内突。 雌性外生殖器囊突有或无，若有则形状多变，但不为菱形。

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　　9 . 2 绢野螟属的鉴别特征

　　体细长有光泽，翅有光泽如丝绢;前翅狭三角形，后翅宽呈三角形。 额圆或扁平，下唇须宽阔，略斜向上伸，第 3 节稍前伸，不明显;下颚须末节鳞片扩展。

　　前翅中室约为翅长的一半，第一径脉 R1 出 自 中室前缘 4/5 处，第三径脉 R3 与第四径脉 R4 共柄长度约为中室前角至顶角距离的 3/5,第二径脉 R2 靠近共柄的第三、四径脉 R3+4 ,第五径脉 R5 基部弯向

　　共柄的第三、四径脉 R3+4 ,中室端脉略弯，第二中脉 M2、第三中脉 M3 和第一前肘脉 CuA1 由中室下角均匀发出，第二前肘脉 CuA2 从中室后缘 4/5 处发出。后翅中室不及翅长一半;共柄的亚前缘脉和第一径脉 Sc+R1 与径分脉 Rs共柄长度约为径分脉 Rs 的 1/4, 中室端脉弯，第二中脉 M2、第三中脉 M3 与第一前肘脉 CuA1 从中室下角发出，基部接近但不互相融合，第二前肘脉 CuA2 脉从中室后缘 2/3 处发

　　出(见图 B. 1) 。

　　9 . 3 黄瓜绢野螟的鉴别特征

　　9 . 3 . 1 成虫

　　头成虫前翅长约 30 mm,翅面大部分黑褐色，略带紫色金属光泽。

　　前翅外横带不规则，中部膨大，两端收缩，白色至浅黄色，半透明，伸达翅后缘而不达翅前缘。 前中带不明显，末端膨大为浅黄色斑(见图 B. 2) 。

　　后翅除端部 1/4 区域黑褐色，其余部分为浅黄色，中室下角具一黑色斑点。

　　雄性腹部背面大部分褐色，仅第 7~8 腹节白色，腹部末端味刷通常膨大展开(见图 B.2)。

　　雄虫外生殖器：爪形突细长，背兜宽大，囊形突指状，抱器瓣宽大，抱器腹末端具一枚细钩状抱握器(见图 B. 3) 。

　　黄瓜绢野螟与 Diaphania aroalis、D.cla℃ata、D.hemicitralis等主要近缘种成虫检索表，见附

　　录 D。

　　9 . 3 . 2 卵

　　椭圆状，扁平，长约 0.8 mm,宽 0.4 mm~0.6 mm,最初白色，24 h后变为黄色。卵成块状产在寄主植物的花、芽、茎等生长旺盛部位，每卵块有 2 粒~7 粒。

　　9 . 3 . 3 幼虫

　　共 5 龄 。幼龄幼虫体白色，每节体背具深灰或黑色毛瘤(见图 C. 1 和图 C. 2) ,至 5 龄时毛瘤消失。幼虫体色取决于食物种类，多为灰白色、绿色、黄色、橙色，接近化蛹时为深紫铜色。 老熟幼虫体长

　　15 mm~25 mm(见图 C.3),幼虫具颊斑(见图 C.4);上颚外侧不具齿状突起(见图 C.5);第 1 腹节(A1)的亚腹毛群(SV)具 2 根刚毛;前胸盾片呈椭圆形，前胸背板 SD2 刚毛后侧无黑斑;第 1 腹节~ 7 腹节(A1~A7)D1 刚毛比 D2 长，第 8 腹节(A8) D2 刚毛 比 D1 长(见图 C. 6 和图 C. 7);第 3 腹节~ 6 腹节(A3~A6)趾钩缺环(见图 C.8)。

　　9 . 3 . 4 蛹

　　体长约 13 mm,宽约 4 mm,浅褐色，后变成深褐色;蛹体两端逐渐变尖。

　　10 结果判定

　　以成虫或幼虫形态特征为主要鉴定依据，以卵和蛹的形态特征为参考依据。 符合 9 . 3 . 1 或 9 . 3 . 3

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　　时，可以判定为黄瓜绢野螟。

　　1 1 标本保存

　　成虫针插标本经风干(或烘干)定型，插入标本盒，幼虫用乙醇-甘油保存液保存。 各标本均需附上时间、地点、寄主、寄主来源、采集人等基本信息的标签，将标本放置于具防潮、防虫蛀且可避免阳光直射的标本室或标本柜保存。 一般保存期不少于 6 个月，鉴定后的标本要永久保存。

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　　附 录 A

　　(资料性)

　　黄瓜绢野螟的其他信息

　　A.1 地理分布

　　北美洲：百慕大群岛、加拿大、墨西哥、美国。

　　中美洲：伯利兹、哥斯达黎加、多米尼加、洪都拉斯、巴拿马、波多黎各、圣基茨和尼维斯联邦、特立尼达和多巴哥共和国、维尔京群岛、危地马拉、萨尔瓦多、巴哈马群岛等。

　　南美洲：厄瓜多尔、阿根廷、巴西、智利、哥伦比亚、圭亚那、秘鲁、苏里南、委内瑞拉、乌拉圭等。

　　A.2 寄主植物

　　主要为害葫芦科，常见寄主植物有西葫芦 cucurbitapepo，黄瓜 cucumissati℃us，笋瓜 cucurbita maxima，西瓜 citrulluslanatus，南瓜 cucurbitamoschata，西印度香瓜 cucumisanguria，葫芦 Lage- nariasiceraria，甜瓜 cucumismelo，垂瓜果 Melothriapendula，苦瓜 Momordicacharantia等。也可

　　危害十字花科、茄科、芸香科及单子叶植物等。

　　A.3 危害与主要生物学特性

　　黄瓜绢野螟幼虫主要取食花、芽、茎及钻蛀果实(见图 A. 1 和图 A. 2) ,受害部位常滋生真菌或细菌

　　病害，受害植物失去经济价值。该虫完成一个世代约 30 d,在热带地区一年可发生 4 代，在加利福尼亚北部一年可发生 2 代~3 代。卵块产于寄主植物的花、芽、茎等生长旺盛部位，每块卵 2 粒~7 粒，卵期约 4 d;幼虫共 5 龄，历期约 14 d,蛹期 8 d~ 9 d;成虫羽化后交配产卵，每头雌虫一般可产 300 粒~ 400 粒卵，成虫主要活动在夜间，飞翔能力较强，可在田间迅速扩散。成虫寿命 35 d~40 d。

　　图 A.1 黄瓜绢野螟为害花(引自 John，2000) 图 A.2 黄瓜绢野螟为害果实(引自 Natasha，2007)

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　　附 录 B

　　(规范性)

　　黄瓜绢野螟成虫形态特征图

　　黄瓜绢野螟成虫形态特征见图 B.1~图 B.3。

　　图 B.1 绢野螟属翅脉特征图(仿王平远，1963)

　　图 B.2 成虫背面观(https：//upload.wikimedia.org) 图 B.3 雄虫外生殖器图(Landry，2016)

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　　附 录 C

　　(规范性)

　　黄瓜绢野螟幼虫形态特征图1)

　　黄瓜绢野螟幼虫形态特征见图 C.1~图 C.8。

　　图 C.1 低龄幼虫侧面观

　　图 C.2 中龄幼虫侧面观

　　图 C.3 老熟幼虫侧面观

　　1) 图 C. 1~图 C.8 引 自 Gilligan & Passoa. 2014。

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　　图 C.4 头部侧面观(示颊斑) 图 C.5 幼虫上颚

　　图 C.6 幼虫毛序图

　　图 C.7 第 1 腹节(A1)亚腹毛群(SV) 图 C.8 腹节趾钩

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　　附 录 D

　　(资料性)

　　绢野螟属常见种成虫检索表(中国与北美)

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　　参 考 文 献

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　　[3] 李后魂，等.《秦岭小蛾类》(昆虫纲：鳞翅目).北京：科学出版社，2012 : 1272 .

　　[4] 王平远.中国绢螟属(Diaphania H讥bner)记述.昆虫学报，1963 , 12 (3) : 358-365.

　　[5] 王平远.中国经济昆虫志 第二十一册 鳞翅目：螟蛾科.北京：科学出版社，1980 : 229 .

　　[6] Arias Q. & Clavij o J.A.Clave pictórica de las especies de Diaphania Hübner, 1818 (Lepi- doptera: Crambidae) de Venezuela. Entomotrópica, 2001 , 16 : 1-13.

　　[7] Capinera J L. Pickleworm, Diaphanianitidalis (Stoll) (Insecta: Lepidoptera: Pyralidae) [M]. University of Florida Cooperative Extension Service, Institute of Food and Agricultural Sciences , EDIS.

　　[8] Clavij o A.J. Systematics of Black and White Species of the Genus Diaphania Hübner (Lep- idoptera: Pyralidae: Pyraustinae) . Ph.D.Diss. , McGill University, Montreal, 1990 : 276.

　　[9] Clavij o A. J. , Munroe E. G. & Arias C. Q. El género DiaphaniaHübner (Lepidoptera: Crambidae) : Clave para las especies de importancia económica. Agronomía Tropical, 1995 , 45 (3) : 347-358 .

　　[10] Gilligan T.M. & Passoa S.C. LepIntercept-An identification resource for intercepted Lepi- doptera larvae [EB/OL] [2014-02-01].http://idtools.org/id/leps/lepintercept.

　　[11] Landry B. Taxonomic revision of the Spilomelinae (Lepidoptera, Pyralidae s. l.) of the Galápagos Islands, Ecuador. Revue suisse de Zoologie, 2016,123(2) : 315-399.

　　[12] Natasha Wright. Pickleworm(Diaphania nitidalis)[EB/OL] [2007-08-27]. http:// www.forestryimages.org/ browse/ subthunb.cfm? sub=8599.