T/CVA 5-2026 辣椒商业化种子质量分级

　　ICS 65.020

　　CCS B05

　　T/CVA

　　中 国 蔬 菜 协 会 团 体 标 准

　　T/ CVA 5-2026

　　辣椒炭疽病抗性人工接种鉴定标准

　　Criteria for evaluating anthracnose resistance in chili pepper after artificial

　　inoculation

　　2026-03-28 发布 2026-03-29 实施

　　中国蔬菜协会 发布

　　T/CVA 5—2026

　　前 言

　　本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准文件的结构和起草规则》的规定起草。

　　请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中国蔬菜协会提出并归口。

　　本文件起草单位：中国农业科学院蔬菜花卉研究所、重庆市农业科学院、广西壮族自治区农业科学院蔬菜研究所。

　　本文件主要起草人：周黛媛、王立浩、于海龙、苏强、王日升、张世才、王飞、高升华、张正海、曹亚从、吴华茂。

　　T/CVA 5—2026辣椒炭疽病抗性人工接种鉴定标准

　　1 范围

　　本文件确立了取样规则、人工接种炭疽菌的方法、平均病斑直径的计算、辣椒炭疽病分级标准、辣椒炭疽病抗性划分标准和辣椒炭疽病抗性鉴定结果记载表。

　　本文件适用于辣椒抗炭疽病的人工接种鉴定。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

　　GB/T 8321.10 农药合理使用准则(十)

　　NY/T 1276 农药安全使用规范总则

　　3 术语和定义

　　3.1

　　病斑直径 lesion diameter

　　取病斑的纵向最大长度和横向最大长度，二者平均值即为病斑直径。

　　3.2

　　平均病斑直径 average lesion diameter

　　全部病斑直径之和与接种点总数的比值。

　　3.3

　　病情指数 disease index

　　通过对植物个体发病程度即病情级别数值的计算获得的群体发病程度的数值化描述，是描述发病严重程度的综合指标。

　　3.4

　　辣椒炭疽病 pepper anthracnose

　　由半知菌亚门炭疽菌属(Colletotrichum)真菌引起的病害。病原菌分类、菌落形态描述等见附录 A。

　　4 取样规则

　　田间耕作管理应均匀一致。整个生育期不进行病害防治，虫害防治中农药的使用应符合GB/T 8321.10 和 NY/T 1276 的规定。

　　于辣椒采收期，选择生长状况正常、无病害侵染的植株进行取样。应选择无机械损伤、

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　　无病害侵染、未失水和未萎蔫的辣椒青熟果进行取样。采用随机取样法，取 15 株辣椒，每株辣椒摘取 3 个果实，取样时应保证果柄与果实一并摘下。

　　5 人工接种炭疽菌的方法

　　5.1 炭疽菌和炭疽菌的活化

　　炭疽菌为炭疽菌属 Colletotrichum致病生理小种。将在固体培养基上的炭疽菌用消毒的手术刀切成长和宽约 8～9 mm 的小块，放入新配制的马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA 培养基)中，28 ℃倒置暗培养 7～10 d。马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA 培养基)的配制详见附录 A.2.2。

　　5.2 孢子悬浮液的配制

　　将 8～9 mm 的炭疽菌菌块转接到马铃薯液体培养基中，将其在 28±1 ℃ 、200 rpm 的避光摇床上摇 3～4 d，诱导产生大量孢子，在超净工作台里将液体培养基用4 层无菌的纱布过滤，除去菌丝以获得孢子悬浮液，用血球计数板在显微镜下计算孢子数量，用无菌水将孢子悬浮液的浓度调整为 5×105 个/mL，用于炭疽病的接种。马铃薯液体培养基的配置方法详见附录 A.2.1。

　　5.3 微量注射接种炭疽菌的流程

　　用自来水把果实表面冲洗 30 s，剪掉果柄。将果实在 75%酒精中浸泡 30 s，期间不停翻滚果实使其表面充分与酒精接触。果实表面晾干。用 10 μL 微注射器在果表面扎出一个深 1 mm、直径 0.4 mm 的伤口，并注入 1 μL 的孢子悬浮液。分级每株接种 3 个果实，每个果实接种 3-5 个点。病情指数调查 15 株。3 次生物学重复。

　　5.4 接种后保存条件

　　在 26 ℃下进行暗培养，湿度为 80%～100%，接种炭疽菌 7 d 后，对果实的病斑直径进行统计。

　　6 平均病斑直径的计算

　　平均病斑直径以“ALD ”计，数值以“mm ”表示，按式(1)计算：

　　ALD ………………………………………………………(1)

　　式中：Lh——病斑横向最大长度;Lz——病斑纵向最大长度;d——果实接种总点数。计算结果精确到小数点后两位。

　　7 辣椒炭疽病分级标准

　　辣椒炭疽病分级标准参见表 1。

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　　表 1 辣椒炭疽病病情分级标准表

　　8 辣椒炭疽病抗性划分标准

　　辣椒炭疽病抗性评价标准参见表 2。

　　病情指数以“DI ”计，按式(2)计算：

　　DI = Σ(s×") × 100…………………………………………………(2)

　　N×s

　　式中：s——各病情级别的果实数;n——相对应病情级别的数值;N——调查总果数; S——最高病情级别的代表数值;计算结果精确到小数点后两位。

　　表 2 辣椒炭疽病抗性评价标准表

　　9 辣椒炭疽病抗性鉴定结果记载表

　　辣椒炭疽病抗性鉴定结果记载表参见附录 B。

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　　附录 A

　　(资料性附录)

　　辣椒炭疽病菌

　　炭疽菌分类与菌落形态见 A.1、A.2。

　　A.1 炭疽菌分类

　　炭疽菌属 Colletotrichum 为半知菌类真菌，隶属于腔孢纲 Coelomycetes，黑盘孢目Melanconiales，黑盘孢科 Melanconiaceae。我国发现的辣椒炭疽菌主要为 C. scovillei (以前鉴定为 C. acu tatum)、C. truncatum(以前鉴定为 C. capsici)和 C. siamense(以前鉴定为 C. g loeosporioides)，其中 C. scovillei在我国广泛流行，严重危害辣椒生产。

　　辣椒炭疽病的典型症状为凹状坏死病斑，并伴有黑色的同心环。炭疽菌也可以感染辣椒种子，被侵染的种子会使萌发后的幼苗在出苗前或者出苗后死亡。炭疽菌也可以感染辣椒叶片，被侵染的叶片在衰老时才表现出发病的症状，在幼苗期处于静止阶段。

　　A.2 病原菌培养及形态

　　A.2.1 马铃薯液体培养基

　　培养基组成为去皮马铃薯200 g、葡萄糖20 g，以蒸馏水定容至1000mL。制备流程如下：首先称取去皮马铃薯200 g并切成碎块，置于锅中加蒸馏水1000mL，置于加热装置上煮沸并保持微沸状态30min;随后采用双层纱布趁热过滤至量杯中，去除残渣保留滤液，加入葡萄糖20 g，同时以玻璃棒持续搅拌，定容至1000mL。使用500 mL三角瓶分装，装液量为300mL。瓶口以封口膜密封后，外层使用皮筋扎紧。标注信息包括培养基名称、实验组别及配制日期。最后采用121 ℃高压蒸汽灭菌法处理20 min。

　　A.2.2 马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA 培养基)

　　该培养基每升含去皮马铃薯 200 g、葡萄糖 20 g 及琼脂 17 g，以蒸馏水定容至 1000mL。制备时先称取去皮马铃薯 200 g 并切碎，置于锅中加蒸馏水 1000 mL，加热至沸腾后持续微沸 30min;随后以双层纱布趁热过滤至量杯，弃去残渣，将滤液补至 1000mL。将滤液倒回锅中，依次加入葡萄糖 20 g 与琼脂 17 g，同时以玻璃棒持续搅拌直至琼脂完全溶解，再次定容至 1000 mL。分装环节根据容器类型分别处理。试管装液量为管高的 1/5，三角瓶则不超过容积的 50%。容器口以棉塞或封口膜密封后，使用皮筋扎紧，并以记号笔记录培养基名称、实验组别及配制日期。试管经 121 ℃高压蒸汽灭菌 20 min 后摆成斜面;三角瓶同条件灭菌后趁热倒入已灭菌培养皿，凝固后即为 PDA 平板培养基。

　　A.2.3 培养特性

　　在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上，菌丝初期为白色絮状，后期转为灰黑色，显微镜下可见菌丝直径 2-6 μm 且分支较多。

　　A.2.4 炭疽菌的菌落形态

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　　C. scovillei、C. siamense和 C. truncatum 的菌落形态特征见下表。

　　表 A2.1 我国辣椒主要炭疽病菌(Colletotrichum spp.)菌落形态特征

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　　附录B

　　(资料性附录)

　　辣椒炭疽病抗性鉴定结果记载表

　　表 B.1 辣椒炭疽病抗性鉴定结果记载表

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