NY/T 4665-2025 犬精液品质检测技术规范

犬精液品质检测技术规范（NY/T 4665-2025）主要内容总结

​​1. 适用范围​​

本规范规定了犬精液品质的实验室检测标准，涵盖质量要求、外观检查、采精量、精子密度、精子活力及畸形率的检测方法。适用于犬精液的质量评估。

​​2. 术语与定义​​

• ​​精液​​：公犬射出的分泌物，含精子和精清。
• ​​采精量​​：单次射精中第二段精液的体积（≥0.5 mL）。
• ​​精子密度​​：单位体积精液中的精子数（≥0.5×10⁸个/mL）。
• ​​精子活力​​：37℃下前进运动精子的百分比（≥70%）。
• ​​精子畸形率​​：畸形精子占总精子的比例（≤20%）。

​​3. 质量要求​​

​​4. 检测方法​​

​​4.1 外观检查​​

• ​​方法​​：目测法，观察颜色、异物及分泌物。

​​4.2 采精量检查​​

• ​​器材​​：精度0.1 mL的刻度试管（量程5-10 mL）。
• ​​步骤​​：收集第二段精液，直接测量体积。

​​4.3 精子密度检查（血细胞计数板法）​​

• ​​器材​​：血细胞计数板、移液器、3.0%氯化钠溶液、显微镜。
• ​​步骤​​：
  1. 取20 μL精液与0.38 mL 3.0% NaCl混合（稀释20倍）。
  2. 将稀释液滴入计数板，显微镜下计数5个中方格精子数。
• ​​计算​​：

  /rho = N /times 10^6 /quad（/text{个/mL}，N为5个中方格精子数）

  • 两计数室误差超过5%需重检。

​​4.4 精子活力检查​​

• ​​器材​​：37℃恒温显微镜、载玻片、盖玻片。
• ​​步骤​​：
  1. 取10 μL精液制片，37℃保温。
  2. 观察3个视野的前进运动精子比例。
• ​​计算​​：两样片活力平均值，保留两位小数。

​​4.5 精子畸形率检查​​

• ​​器材​​：吉姆萨染液、显微镜、载玻片。
• ​​步骤​​：
  1. ​​制片​​：精液抹片，中性福尔马林固定15分钟。
  2. ​​染色​​：吉姆萨染液染色1.5小时，冲洗晾干。
  3. ​​镜检​​：400-600倍显微镜下观察200个以上精子。
• ​​计算​​：

  A = /frac{A_1}{S} /times 100/% /quad（A_1为畸形数，S为总数）

  • 两片变异系数＞20%需重检。

​​5. 溶液配制（附录A）​​

• ​​磷酸盐缓冲液​​：NaH₂PO₄·2H₂O 0.55g + Na₂HPO₄·12H₂O 2.25g，定容至100 mL。
• ​​中性福尔马林固定液​​：甲醛8mL + 磷酸盐缓冲液，定容至100 mL。
• ​​吉姆萨染液​​：原液（吉姆萨染料1g + 甘油66mL + 甲醇66mL）稀释后现用。

​​6. 注意事项​​

• ​​温度控制​​：活力检查需在37℃恒温下进行。
• ​​重复检测​​：密度、活力、畸形率检测结果差异超限时需重检。
• ​​染色时效​​：吉姆萨染液现配现用，原液储存越久效果越好。

本规范为犬精液质量提供了系统化的实验室检测流程，确保繁殖用精液符合标准，提升犬类繁殖效率与遗传质量。