GB/T 37363.2-2019 涂料中生物杀伤剂含量的测定 第2部分：敌草隆含量的测定

　　ICS 87 . 040 G 50

　　中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准

　　GB/T 37363 . 2—2019

　　涂料中生物杀伤剂含量的测定第 2 部分：敌草隆含量的测定

　　Determinationofbiocidescontentofcoatingmaterials—

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　　2019-03-25 发布 2020-02-01 实施

　　国家市场监督管理总局中国国家标准化管理委员会

　　发

　　布

　　GB/T 37363 . 2—2019

　　前 言

　　GB/T 37363《涂料中生物杀伤剂含量的测定》分为以下几个部分：

　　— 第 1 部分：异噻唑啉酮含量的测定;

　　— 第 2 部分：敌草隆含量的测定;

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　　本部分为 GB/T 37363 的第 2 部分。

　　本部分按照 GB/T 1 . 1—2009 给出的规则起草。

　　本部分由中国石油和化学工业联合会提出。

　　本部分由全国涂料和颜料标准化技术委员会(SAC/TC 5)归口 。

　　本部分起草单位：中海油常州涂料化工研究院有限公司、中国船舶重工集团公司第七二五研究所厦门材料研究院、中华制漆(深圳)有限公司、托尔专用化学品(镇江)有限公司、中航百慕新材料技术工程股份有限公司、深圳市广田环保涂料有限公司、河北晨阳工贸集团有限公司、河北嘉宝莉涂料有限公司、广东省珠海市质量计量监督检测所、三棵树涂料股份有限公司、上海建科检验有限公司、黑龙江省质量监督检测研究院。

　　本部分主要起草人：李进颖、李广东、刘晓玲、吴兆敏、孙立德、王智、章叶萍、徐新祥、高婷、胡中源、叶彩平、杨冬梅、彭永森、袁骏。

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　　涂料中生物杀伤剂含量的测定

　　第 2 部分：敌草隆含量的测定

　　警示 — 使用本部分的人员应有正规实验室工作的实践经验。 本部分并未指出所有可能的安全问题 。使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规规定的条件。

　　1 范围

　　GB/T 37363 的本部分规定了采用液相色谱-质谱/质谱联用法测定涂料中敌草隆[N-(3,4-二氯苯基)-N′，N′-二甲基脲，CAS No. :330-54-1]含量的原理、试剂和材料、仪器设备、样品、试验步骤、试验数据处理、检出限、精密度、试验报告。

　　本部分适用于涂料中敌草隆含量的测定。 漆膜及涂料用原材料中敌草隆含量的测定也可参考本部分。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注 日期的引用文件，仅注 日期的版本适用于本文件 。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

　　GB/T 3186 色漆、清漆和色漆与清漆用原材料 取样

　　3 原理

　　以甲醇为提取溶剂，用超声提取和离心分离相结合的方法提取试样中的敌草隆。 提取液定容后，用液相色谱-质谱/质谱联用仪(LC-MS/MS)检测，以保留时间和选择离子定性，外标法定量。

　　注：也可选择其他经确认的合适溶剂作为提取溶剂。

　　4 试剂和材料

　　除非另有规定，在分析中仅使用确认为分析纯及以上纯度的试剂和符合 GB/T 6682—2008 要求的一级水。

　　4 . 1 甲醇：色谱纯。

　　4 . 2 乙酸铵：色谱纯。

　　4 . 3 甲酸：色谱纯。

　　4 . 4 敌草隆：质量分数不小于 99% 。

　　4.5 微孔滤膜：孔径 0.22 μm。

　　4 . 6 不锈钢金属筛：孔径 0 . 5 mm。

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　　5 仪器设备

　　5 . 1 液相色谱-质谱/质谱联用仪(LC-MS/MS),配反相色谱柱。

　　5 . 2 超声波提取仪：功率 ≥500 W。

　　5 . 3 高速离心机：转速 12 000 r/ min 以上，可控温。

　　5.4 天平：精度 0.1 mg。

　　5 . 5 容量瓶：适合的规格，GB/T 12806—2011 A 级 。

　　5 . 6 分度吸量管：适合的规格，GB/T 12807—1991 A 级 。

　　注：也可使用精度满足要求的其他移液设备，如活塞式移液枪等。

　　5 . 7 单标线吸量管：适合的规格，GB/T 12808—2015 A 级 。

　　注：也可使用精度满足要求的其他移液设备，如活塞式移液枪等。

　　6 样品

　　按 GB/T 3186 的规定取样，也可按商定方法取样，取样量根据检验需要确定。

　　7 试验步骤

　　7 . 1 平行试验

　　平行做两份试验。

　　7 . 2 样品前处理

　　将样品搅拌均匀[如样品为固态，可在室温下用粉碎设备将样品粉碎，并用孔径 0 . 5 mm 不锈钢金属筛(4 . 6)过筛]，称取试样约 2 . 5 g,精确到 0 . 1 mg,置于 25 mL容量瓶(5 . 5) 中，记录试样质量 m，用甲醇(4 . 1)稀释至刻度，充分振摇使试样得到最大程度分散，制成试样溶液，记录定容体积 V。用超声波提取仪(5 . 2)超声提取 20 min后，移取上述溶液约 7 mL 于离心管中(也可根据实际情况调整进行离心的溶液体积)，在离心机腔体温度不超过 25 ℃的条件下离心，至上层出现清液 A,如离心效果不佳，不能有效分层，可适当增加转速或增加离心时间。 用 0 . 22 μm微孔滤膜(4 . 5)过滤清液 A,保留滤液 B,用于提取溶液的测定(7 . 7) 。

　　当选择其他溶剂作为提取溶剂时，用单标线吸量管(5 . 7) 移取 1 mL 清液 A 于 10 mL 容量瓶(5 . 5)中，用甲醇(4 . 1)定容至刻度。 取适量上述溶液，用 0 . 22 μm 微孔滤膜(4 . 5) 过滤，保留滤液 C,用于提取溶液的测定(7 . 7) 。

　　7 . 3 空白试验

　　空白试验应与测试平行进行，并采用相同的试验步骤，取相同量的所有试剂，但不加样品。

　　7 . 4 LC-MS/MS测试条件

　　根据所用 LC-MS/MS 的性能及试样的实际情况选择适宜的测试条件。

　　由于测试结果取决于所使用的仪器，因此不能给出色谱和质谱分析的普适参数，列于附录 A 中 A. 1的参数已被证明对测试是适用的。

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　　7 . 5 标准工作溶液的配制

　　称取约 0 . 02 g敌草隆(4 . 4),精确到 0 . 1 mg, 于 100 mL容量瓶中，用甲醇(4 . 1)定容至刻度。 再采用

　　逐级稀释的方法，用分度吸量管(5 . 6)或单标线吸量管(5 . 7)移取上述溶液于适合的容量瓶(5 . 5) 中，用甲醇(4 . 1)稀释上述溶液成适用浓度的敌草隆标准工作溶液。

　　注 1 ：可根据所使用的仪器及试样的情况调整敌草隆标准工作溶液的浓度范围。

　　注 2：也可直接使用已知浓度的有证敌草隆标准溶液。

　　7 . 6 绘制标准工作曲线

　　按 7 . 4 的液相色谱-质谱/质谱联用仪条件测定敌草隆标准工作溶液(7 . 5) 。每一个标准工作溶液进样两次，峰面积取平均值，其相对偏差应不大于 5%。 根据定量选择离子和定性离子(参见表 A. 1) 记录多反应监测(MRM)色谱图，以峰面积(扣除不加标工作溶液中敌草隆的峰面积)为纵坐标，相应标准工作溶液浓度为横坐标，绘制标准工作曲线。 标准工作曲线至少应包括 5 个敌草隆标准工作溶液(7 . 5) 。标准工作曲线的线性相关系数 R2 应大于 0 . 995,否则应重新绘制新的标准工作曲线。

　　7 . 7 提取溶液的测定

　　按与绘制标准工作曲线(7 . 6)相同的仪器测试条件测试滤液 B或滤液 C。 记录多反应监测(MRM)色谱图，对定量选择离子(参见表 A. 1)进行峰面积积分(扣除空白试验中敌草隆的峰面积)，采用外标法定量。 如滤液 B或滤液 C 中敌草隆的含量超出标准工作曲线范围，可以用甲醇(4 . 1)适当稀释后进行提取溶液的测定。

　　8 试验数据处理

　　试样中敌草隆的含量以敌草隆的质量分数 ∞ 计，数值以毫克每千克(mg/kg)表示，按式(1)计算：

　　…………………………( 1 )

　　式中：

　　ρ —从标准工作曲线上读取的敌草隆的质量浓度，单位为微克每毫升(μg/mL) ;

　　V—试验溶液的定容体积，单位为毫升(mL) ;

　　F— 试验溶液的稀释因子;

　　m—试样的质量，单位为克(g) 。

　　计算两次平行试验测试结果的平均值，以平均值报出结果。 当测定值小于 100 mg/kg 时，结果表示到小数点后一位;当测定值大于或等于 100 mg/kg且小于 1 000 mg/kg 时，以整数值报出结果;当测定值大于或等于 1 000 mg/kg 时，以三位有效数字乘以幂次方报出结果。

　　9 检出限

　　敌草隆的检出限为 1 mg/kg。

　　10 精密度

　　10 . 1 重复性限(r)

　　在同一实验室，由同一操作者使用相同设备，按相同的测试方法，并在短时间内对同一被测对象相

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　　互独立进行测试获得的两次测试结果的相对偏差不大于 10%, 以相对偏差大于 10%的情况不超过 5%为前提。

　　10 . 2 再现性限(R)

　　在不同的实验室，由不同的操作者使用不同的设备，按相同的测试方法，对同一被测对象相互独立进行测试获得的两次独立测试结果的相对偏差不大于 20%, 以相对偏差大于 20%的情况不超过 5%为前提。

　　1 1 试验报告

　　试验报告至少应给出以下几个方面的内容：

　　— 试验对象;

　　— 所使用的标准(GB/T 37363 . 2—2019) ;

　　— 所用提取溶剂;

　　— 结果;

　　— 观察到的异常现象;

　　— 试验日期。

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　　附 录 A

　　(资料性附录)

　　液相色谱-质谱/质谱联用仪参考条件

　　A.1 液相色谱-质谱/质谱联用仪参考条件

　　A.1 . 1 色谱柱：C18 反相色谱柱，2.1 mm×50 mm, 1.8 μm。

　　A.1 .2 流速：0.3 mL/min。

　　A.1 .3 柱温：35 ℃。

　　A.1 .4 进样量：1 μL。

　　A.1 . 5 雾化气：氮气，纯度 ≥95% 。

　　A.1 .6 干燥气温度：350 ℃。

　　A.1 .7 干燥气流量：9 L/min。

　　A.1 .8 雾化气压力：344 737.85 Pa(50 psi)。

　　A.1 .9 碰撞气：高纯氮气，纯度 ≥99.999%。

　　A.1 . 10 流动相：水[5 mmol/L 乙酸铵，甲酸体积分数 0.1%] +甲醇(30+70)。

　　A.1 . 1 1 质谱离子源：电喷雾离子源(ESI) 。

　　A.1 . 12 离子化方式：正离子扫描。

　　A.1 . 13 毛细管电压：+3 000 V。

　　A.1 . 14 监测方式：多反应监测(MRM),监测条件见表 A. 1 。

　　表 A.1 敌草隆的多反应监测条件

　　A.2 液相色谱-质谱/质谱联用仪的色谱图

　　敌草隆的多反应监测(MRM)色谱图见图 A. 1 。

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　　图 A.1 敌草隆的多反应监测(MRM)色谱图