资料介绍
ICS 17 . 180 A 40
中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准
GB/T 24369 . 2—2018
金纳米棒表征
第 2 部分:光学性质测量方法
Characterizationofgoldnanorods—
part2:Measurementmethodsforopticalproperties
2018-03-15 发布 2018-10-01 实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会
发
布
GB/T 24369 . 2—2018
GB/T 24369 . 2—2018
前 言
GB/T 24369《金纳米棒表征》分为以下三个部分:
— 第 1 部分:紫外/可见/近红外吸收光谱方法;
— 第 2 部分:光学性质测量方法;
— 第 3 部分:表面电荷密度测量方法。
本部分为 GB/T 24369 的第 2 部分。
本部分按照 GB/T 1 . 1—2009 给出的规则起草。
本部分由中国科学院提出。
本部分由全国纳米技术标准化技术委员会(SAC/TC 279)归口 。
本部分起草单位:国家纳米科学中心。
本部分主要起草人:吴晓春、纪英露、胡志健、陈佳琪、郭玉婷。
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引 言
金纳米棒是一种棒状金纳米颗粒,因其优异的光、电性能,在生物医学、能源和信息等领域具有潜在应用前景。 其中,金纳米棒局域电磁场增强的光学性质,如:局域表面等离激元共振吸收/散射、双光子(多光子)荧光、表面增强拉曼散射、表面增强荧光、光热和光声转换及等离激元光催化等性质,可望在生物检测、生物成像、疾病诊断与治疗等领域获得广泛应用。 本部分列表给出了金纳米棒主要光学性质的表征方法并规定了表面等离激元介电敏感度、单光子激发相对荧光量子产率和表面增强拉曼散射增强因子的测量方法。
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金纳米棒表征
第 2 部分:光学性质测量方法
1 范围
GB/T 24369 的本部分规定了金纳米棒主要光学性质的表征方法。
本部分适用于表面等离激元共振峰介电敏感度、相对荧光量子产率和表面增强拉曼散射增强因子的计算。
其他贵金属纳米结构的相关性质亦可参照执行。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注 日期的引用文件,仅注 日期的版本适用于本文件 。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 24369 . 1—2009 金纳米棒表征 第 1 部分:紫外/可见/近红外吸收光谱方法
GB/T 32006—2015 金纳米棒光热效应的评价方法
GB/T 32269—2015 纳米科技 纳米物体的术语和定义 纳米颗粒、纳米纤维和纳米片
IEC 62607-3-1 纳米工业 关键特性控制 第 3-1 部分:发光纳米材料量子产率(Nanomanufac- turing—Key control characteristics—Part 3-1 : Luminescent nanomaterials—Quantum efficiency)
3 术语和定义
GB/T 32006—2015、GB/T 32269—2015 和 IEC 62607-3-1 界定的下列术语和定义适用于本文件。
为了便于使用,以下重复列出了 GB/T 32006—2015、GB/T 32269—2015 和 IEC 62607-3-1 中的 一些术语和定义。
3.1
纳米棒 nanorod
实心纳米纤维。
[GB/T 32269—2015,定义 4 . 5]
3.2
表面等离激元共振 surfaceplasmonresonance;SPR
光入射到金属纳米结构表面或介电材料界面时,使金属表面的 自 由电子与光子耦合而产生的集体振荡。
[GB/T 32006—2015,定义 3 . 3]
3.3
长波表面等离激元共振 longitudinalSPR;LSPR
沿棒状颗粒长轴方向的表面等离激元共振。
3.4
介电敏感度 dielectricsensitivity
介电常 数 引起 的 表 面 等 离 激 元 共 振 峰 的 变 化,表 示 为 单 位 折 射 率 变 化 引起 的 峰 位 移 动
(nm · RIU-1 ) [1,2] 。
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3.5
单光子荧光 singlephotonfluorescence
吸收单个光子发出的荧光。
3.6
表面等离激元荧光辐射 surfaceplasmonfluorescenceradiation
带间跃迁激发产生的电子、空穴对转化到表面等离激元共振态并辐射出光子的过程[5] 。
3.7
荧光量子产率 fluorescencequantum efficiency/quantum yield
荧光材料的发射光子数与吸收光子数之比。
注:修改 IEC 62607-3-1,定义 3 . 14 。
3.8
相对荧光量子产率 relativefluorescencequantum efficiency
以标准物质为基准得到的待测样品的荧光量子产率。
[IEC 62607-3-1,定义 3 . 14]
3.9
双光子荧光 two-photonfluorescence
同时吸收两个光子发出的荧光[6] 。
3 . 10
吸收截面 absorptioncrosssection
吸收特定波长光子的能力。
3 . 1 1
双光子吸收截面 two-photonabsorptioncrosssection
同时吸收两个光子的吸收截面[6] 。
3 . 12
双光子作用截面 two-photonactioncrosssection
双光子吸收截面与荧光量子产率之积[6] 。
3 . 13
表面增强拉曼散射 surfaceenhancedRamanscattering;SERS
微纳米尺度的粗糙表面或颗粒具有的拉曼增强效应[7] 。
3 . 14
光热效应 photothermaleffect
光被物质吸收后转换为热能的效应。
[GB/T 32006—2015,定义 3 . 3]
3 . 15
光声效应 photoacousticeffect
光被物质吸收后转换为声波的效应[8] 。
4 金纳米棒及其分子复合体系主要光学性质表征方法
金纳米棒及其分子复合体系主要光学性质及表征方法分别见表 1 和表 2[9] ,本部分规定了其中的表面等离激元共振峰介电敏感度、相对荧光量子产率和表面增强拉曼散射增强因子的表征方法。
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表 1 金纳米棒主要光学性质及表征方法
表 2 金纳米棒-分子复合体系主要光学性质及表征方法
5 仪器及附件
5 . 1 光谱仪
紫外/可见/近红外吸收光谱仪;配有脉冲激光器或连续激光器的荧光光谱仪;拉曼光谱仪。
5 . 2 比色池
石英/玻璃吸收池或自制样品池。
6 试样
6 . 1 介电敏感度测量用试样
将不同折射率溶剂中混合均匀的金纳米棒,参见附录 A。
6 . 2 荧光量子产率测量用试样
用适当溶剂稀释至激发波长处消光度低于 0 . 05 的金纳米棒样品,参见附录 B。
6 . 3 SERS增强因子测量用试样
拉曼探针分子孵化适当时间以保证探针分子稳定吸附的金纳米棒样品,参见附录 C。
7 测量条件和步骤
7 . 1 概述
对于每一种测量方法,至少取 3 个试样,每个试样测试 2 次 。
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7 . 2 介电敏感度测量
7 . 2 . 1 设置紫外/可见/近红外吸收光谱仪的扫描波长范围(推荐 400 nm~1 100 nm 之间)和扫描速度(推荐小于 600 nm · min-1 )。
7 . 2 . 2 取两个吸收池,均加入参比样品(分散介质)至池子体积的 2/3,分别置于参比光路和样品光路,进行自动校零操作。
7 . 2 . 3 将置于样品光路的吸收池取出,加入测试样品。
7 . 2 . 4 将装好测试样品的吸收池置于样品光路,扫描得到消光谱图。
7 . 2 . 5 将仪器所测谱图或图像保存,并记录仪器状态和测量数据。
7 . 3 相对荧光量子产率测量
7 . 3 . 1 设置荧光光谱仪的样品激发波长(推荐小于 530 nm)。
7 . 3 . 2 样品池中放入适量待测样品置于样品光路中,扫描得到荧光光谱图。
7 . 3 . 3 将仪器所测谱图或图像保存,并记录仪器状态和测量数据。
7 . 4 SERS增强因子测量
7 . 4 . 1 设置拉曼光谱仪样品激发波长(推荐 600 nm~1 100 nm 之间)。
7 . 4 . 2 样品池中放入适量样品置于样品光路中,扫描得到拉曼光谱图。
7 . 4 . 3 将仪器所测谱图或图像保存,并记录仪器状态和测量数据。
8 金纳米棒介电敏感度、荧光量子产率和SERS增强因子计算
8 . 1 计算金纳米棒介电敏感度
金纳米棒介电敏感度 IS计算公式见式(1) [1,2] :
IS …………………………( 1 )
式中:
IS —样品介电敏感度,单位为纳米每折射率单元(nm · RIU-1 ) ;
△λ—金纳米棒表面等离激元共振峰峰位的变化值,单位为纳米(nm) ;
△n—溶剂折射率的变化值。
通过测量金纳米棒在不同折射率溶剂中的长波表面等离激元共振峰峰位,以折射率为自变量,长波表面等离激元共振峰峰位为应变量进行线性拟合,拟合直线的斜率即为介电敏感度数值。
8 . 2 计算金纳米棒荧光量子产率
金纳米棒单光子激发相对荧光量子产率 η 计算公式见式(2) :
…………………………( 2 )
式中:
η 和 ηr —样品和标准物质的荧光量子产率;
F 和 Fr — 样品和标准物质的荧光发射谱强度;
A 和 Ar — 样品和标准物质在激发波长处的吸光度;
n 和 nr —溶解样品和标准物质所用溶剂的折射率。
以荧光标准物质的荧光量子产率为基准,将金纳米棒和标准物质的荧光发射谱强度、在激发波长处
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的消光度及溶剂的折射率代入式(2),即可求出金纳米棒的相对荧光量子产率。
8 . 3 计算金纳米棒 SERS增强因子
金纳米棒 SERS增强因子 EF 计算公式见式(3) :
EF …………………………( 3 )
式中:
Cbulk —探针分子浓度,单位为摩尔每升(mol · L-1 ) ;
Cads — 吸附于金棒表面探针分子浓度,单位为摩尔每升(mol · L-1 ) ;
ISERS — 吸附于金棒表面探针分子特征拉曼模式信号强度;
IRaman —探针分子溶液中探针分子特征拉曼模式强度。
将探针分子浓度、吸附于金棒表面探针分子浓度、探针分子溶液中和吸附于金棒表面探针分子的特征拉曼模式信号强度代入式 (3),即可求出金纳米棒 SERS增强因子。
9 测量结果及分析
9 . 1 介电敏感度结果分析参见附录 A。
9 . 2 单光子荧光量子产率结果分析参见附录 B。
9 . 3 SERS增强因子结果分析参见附录 C。
9 . 4 测试结果的不确定度分析参见附录 D。
10 检测报告
10 . 1 介电敏感度测试报告格式参见附录 E。
10 . 2 荧光量子产率测试报告格式参见附录 F。
10 . 3 SERS增强因子测试报告格式参见附录 G。
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附 录 A
(资料性附录)
金纳米棒介电敏感度表征实例
A.1 制备聚对苯乙烯磺酸钠(pss)包覆金纳米棒
在十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)浓度为 0.5 mmol/L 的金纳米棒溶胶([Au NRs] =0.5 nmol/L)中加入 20 mg/mL PSS溶液 0.05 mL,超声 10 min,放置 3 h。在 9 500 × g离心 10 min,去掉上清液,加
入等体积的配置好的溶剂,超声 15 min,用所配置的溶剂稀释至 3 mL后用于紫外/可见/近红外消光光谱表征。
A.2 不同折射率溶剂的配置
按二甲基亚砜与去离子水(DMSO/H2 O) 体积比为 0 ∶ 1、1 ∶ 5、3 ∶ 7、9 ∶ 11、1 ∶ 1、3 ∶ 2、4 ∶ 1 和1 ∶ 0 , 配置不同折射率溶剂。
A.3 实验内容
金纳米棒介电敏感度表征。
A.4 实验分析方法
紫外/可见/近红外消光光谱法(Cary 50 紫外/可见光谱仪)。
A.5 测试条件
Cary紫外/可见/近红外光谱仪;波长扫描范围:400 nm~1 100 nm;扫描速度:600 nm/min;步长 : 1 nm 。
A.6 分析结果和表达方式
此实验所用金纳米棒在水中的长波表面等离激元共振峰(LSPR)峰位为 837 nm。 将 A. 2 配置的不同折射率溶剂加入到 A. 1 制备的 PSS 包覆金纳米棒离心底物中,进行紫外/可见/近红外消光光谱测
量,每个折射率溶剂配置 2 个样品,测量数据见表 A. 1 。金纳米棒在 DMSO/H 2 O 体积比为 0 ∶ 1 、1 ∶ 1和 1 ∶ 0 混合溶剂中的消光光谱图见图 A. 1(在最大消光值处归一化)。将表 A. 1 数据按 D. 1 进行拟合计算和不确定度评定,数据拟合见图 A. 2,介电敏感度测定结果为(416±20)nm · RIU- 1(置信水平为95%时,k0.95 =2.15)。
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表 A.1 金纳米棒周围环境折射率和其 LSPR峰位关系表
图 A.1 DMSO/H2O体积比为 0 ∶ 1 、1 ∶ 1 和 1 ∶ 0 时对应的金纳米棒溶胶的消光光谱图
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图 A.2 分散液折射率对金纳米棒长波表面等离激元共振峰峰位的影响
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附 录 B
(资料性附录)
金纳米棒单光子荧光量子产率测量实例
B.1 实验样品
金纳米棒水溶胶。
B.2 实验内容
测定 514 nm 激光激发下,H 2 O、金纳米棒水溶胶和罗丹明 6G水溶液的单光子荧光光谱。
B.3 实验分析方法
单光子荧光光谱法。
B.4 测试条件
连续激光器激发波长:514 nm,波长扫描范围:520 nm~700 nm,积分时间:10 s,样品:金纳米棒水溶胶和 0 . 5%罗丹明 6G水溶液。
B.5 分析结果和表达方式
用功率为 30 mW 的激光照射金纳米棒溶胶样品,每个样品测量三次,扣除水背景后得到金纳米棒的荧光光谱,记录峰值荧光强度 F。将激光衰减片减弱激光强度 200 倍后测量罗丹明 6G 水溶液的荧
光光谱,记录峰值荧光强度 Fr , 见图 B. 1a),荧光测量示意图见图 B. 2 。 由紫外可见消光光谱仪测得金纳米棒和罗丹明 6G水溶液在激发波长 514 nm处的吸收度 A 和Ar , 见图 B. 1b) 。将以上相关参数代入式(2)中得出相对荧光量子产率,相关参数见表 B. 1 。 取样 4 次,根据式 D. 4 和 D. 7 , η= (1.09±0. 11) × 10-4(置信水平为 95%时,k0.95 =2.23)。
表 B.1 金纳米棒溶胶样品的荧光量子产率及各个参量
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表 B.1(续)
a)金纳米棒水溶胶(红色)、罗丹明 6G水溶液(蓝色)及
水(黑色)的单光子荧光谱图,插图为扣除水背景后金纳米
棒水溶胶单光子荧光谱图
b)金纳米棒水溶胶和罗丹明 6G水溶液的
紫外消光近红外吸收光谱
图 B.1 金纳米棒溶胶样品的荧光测试示意图
a)俯视图 b)侧视图
图 B.2 荧光测量示意图
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附 录 C
(资料性附录)
金纳米棒 SERS增强因子计算实例
C.1 实验样品
对氨基苯硫酚 (4-ATP) 水溶液和吸附了 ATP分子的金纳米棒水溶胶。
C.2 测试样品制备
在 1 mL 的金纳米棒(LSPR 峰位 640 nm)水溶胶中,加入 5 μL 1 mmol/L 4-ATP 水溶液,混匀后放置于 30 ℃水浴中 24 h后取出备用。
C.3 实验内容
测定 785 nm激光激发下,金纳米棒-ATP分子水溶胶和 1 mmol/ L 4-ATP水溶液的拉曼光谱。
C.4 实验分析方法
拉曼光谱法。
C.5 测试条件
仪器:显微共焦拉曼光谱仪;波长扫描范围:500 cm- 1 ~2 500 cm- 1 ;激光波长:785 nm;积累时间: 30 s;激光衰减:100% 。测量时,将所测溶液取出 150 μL,滴入图 B. 2 所示的小槽中。 先将光斑聚焦到液体表面,然后将物镜向下移动 500 μm,保证焦点位于测试溶液中部。 用激光激发样品,得到测试样品
Raman或 SERS光谱。
C.6 分析结果和表达方式
测量金纳米棒-ATP分子水溶胶样品的拉曼光谱三次,记录吸附于金棒表面 4-ATP 特征拉曼模式1 084 cm-1 处的散射强度,扣除基底背景后得到 1 084 cm-1 特征峰强 ISERS 。测量一个 ATP 水溶液试样拉曼光谱三次,其中 Cbulk 为 1 000 μM,记录分散于水中 4-ATP 特征拉曼模式 1 095 cm-1 处的散射强度,扣除基底背景后得到 1 095 cm-1 特征峰强 IRaman 。金纳米棒-4-ATP水溶胶和 4-ATP水溶液拉曼光谱见图 C. 1,每个测试样品取样 3 次,相关测试结果见表 C. 1 。
吸附于金棒表面的 4-ATP分子浓度通过金纳米棒颗粒浓度 Crod 、金纳米棒表面积 srod和 4-ATP分子占据面积 s4-ATP [10] 计算得出,即 4-ATP 最大吸附浓度 Cads=Crod×srod/s4-ATP 。其中,金纳米棒颗粒浓度 Crod 通过金纳米棒溶胶消光光谱图(见图 C. 2) 和单根棒体积计算求得。 由 Labert-Beer定律,对金
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纳米棒溶胶满足:Ext400 nm = σ400 nm × CAu × l,其中 σ400 nm 、CAu 、Ext400 nm 、l (cm) 分别为金纳 米 棒 在400 nm 处的摩尔消光系数、摩尔浓度、400 nm 处的消光值及消光测量时光程长度。 其中,σ400 nm = 2 . 02 × 103 M- 1 · cm- 1 。由金纳米棒水溶胶在 400 nm 处的消光值 0 . 245,可计算得金原子浓度 CAu 为0 . 122 5 mmol/ L。根据金原子浓度 CAu 和单个纳米棒体积VNR,可求出金纳米棒颗粒浓度 Crod :
Crod = = = 0.089 5 nmol/L
其中 CAu 为金原子浓度,M 为金的摩尔质量,VNR 为金纳米棒的体积,ρ为金的质量密度,NA 为阿伏
伽德罗常数 。将 Crod 、Srod 和 S4-ATP 代入,可求得 Cads=Crod×Srod/ S4-ATP = 0 . 089 5 nmol/ L×4 664 nm2 / 0.2 nm2 =2.09 μmol/L。
最后将所有参数代入式(D. 6) 和式(D. 7) ,可得 EF= ( 0 . 86±0 . 21 ) ×10 5(置信水平为 95%时,k0.95 =2 . 37 ) 。
表 C.1 金纳米棒 SERS增强因子测试相关参数表
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图 C.1 金纳米棒-4-ATP水溶胶和 4-ATP水溶液拉曼光谱图
图 C.2 金纳米棒水溶胶紫外可见消光光谱
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附 录 D
(资料性附录)
测试结果不确定度分析
D.1 介电敏感度测试结果不确定度分析
介电敏感度的不确定度来源主要为数据线性拟合的不确定度。 设拟合的线性方程为:y=kn+b (n为环境折射率,y 为长波表面等离激元共振峰峰位,k 为拟合直线的斜率,即为介电敏感度,b为拟合直线的截距),则根据 JJF 1059 . 1—2012 中 A. 3 . 2,采用最小二乘法进行计算,其中 s2(k)为实验方差。
D=m Σ(nj-n)2
s2 =m …………………………( D.1 )
式中:
j= 1 , 2 , … ,m;
n=( Σnj)/m;
m —测量的总次数;
nj和 yj —分别表示第 j 次测量时环境折射率和长波等离激元共振峰峰位。
D.2 相对荧光量子产率测试结果不确定度分析
测量重复性引入的标准不确定度 u1采用 A类方法进行评定,关系式为:
u
式中:
s(xi)—单次测量实验标准差;
m — 给出测量结果时所作的测量次数;
n — 给出单次测量实验标准差时的测量次数;
xi —第 i次测量值;
x —测量值的平均值。
相对荧光量子产率计算的不确定度来源主要为测试样品和标准物质荧光发射谱强度测量重复性所引入的不确定度。 对式(2)偏微分处理得:
…………………………
测量引入的不确定度按式(D. 4)计算:
u
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式中:
uF —测试样品荧光发射谱强度测量重复性引入不确定度;
uFr —标准物质荧光发射谱强度测量重复性引入不确定度。
式(D. 4)中第一项和第二项分别来源于测试样品和标准物质荧光发射谱强度测量所引入的不确定度。
D.3 拉曼散射增强因子测试结果不确定度
散射增强因子的不确定度来源主要为测试探针分子溶液和含有探针分子的金纳米棒溶胶拉曼散射信号强度测量重复性所引入的不确定度。 对式(3)偏微分处理得:
…………………………
测量引入的不确定度按式(D. 6)计算:
uEF
式中:
uISERS —含有探针分子的金纳米棒溶胶拉曼散射信号强度测量重复性所引入的不确定度;
uIRaman —探针分子溶液拉曼散射信号强度测量重复性所引入的不确定度。
式(D. 6)中第一项和第二项分别来源于测试含有探针分子的金纳米棒溶胶和探针分子溶液拉曼散射信号强度测量所引入的不确定度。
D.4 扩展标准不确定度的评定
当 自 由度 ν= m-2 和置信水平为 95%时,可查表获得扩展因子 k0.95 ,则扩展不确定度 u 为 :
u=k0.95 × u0 …………………………( D.7 )
式中:
u0 —测试结果的不确定度,u0=s(k)或 uη 或 uEF 。
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附 录 E
(资料性附录)
金纳米棒介电敏感度测试报告格式
金纳米棒介电敏感度测试报告
报告编号:
1 委托者
名称: 地址:
联系方式:
2 测试样品
名称: 编号:
3 测试依据:
4 紫外/可见/近红外吸收光谱仪
制造单位: 型号: 编号:
仪器检定/校准证书编号: 检定/校准结果:
5 样品的测试条件
比色皿: 温/湿度:
扫描波长范围: 扫描间隔:
扫描速度: 光谱带宽:
6 测试结果
原始谱图:
溶胶的折射率与其对应的金纳米棒 LSPR峰值的关系数据表
折射率对 SPR峰值移动的线性拟合图:
拟合的介电敏感度: 拟合度 R:
7 测试机构
测试人员: 校验人员: 测试日期:
机构名称: 地址:
8 授权机构: 授权证书编号:
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附 录 F
(资料性附录)
金纳米棒荧光量子产率测试报告格式
金纳米棒荧光量子产率测试报告报告编号:
1 委托者
名称: 地址:
联系方式:
2 测试样品和标准物质
测试样品名称: 测试样品编号:
标准物质名称: 标准物质编号:
标准物质的溶剂折射率: 标准物质的荧光量子产率:
3 测试依据:
4 荧光光谱仪
制造单位: 型号: 编号:
仪器检定/校准证书编号: 检定/校准结果:
5 样品的测试条件
样品池: 温/湿度:
连续激光器激发波长: 波长扫描范围:
激光强度: 积分时间: 激光衰减:
测试样品的折射率:
6 测试结果
测试样品和标准物质的单光子荧光谱图:
测试样品的荧光发射谱强度: 标准物质的荧光发射谱强度:
测试样品在激发波长处的吸光度: 标准物质在激发波长处的吸光度:
测试样品的荧光量子产率:
7 测试机构
测试人员: 校验人员: 测试日期:
机构名称: 地址:
8 授权机构: 授权证书编号:
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附 录 G
(资料性附录)
金纳米棒 SERS增强因子测试报告格式
金纳米棒 SERS增强因子测试报告
报告编号:
1 委托者
名称: 地址:
联系方式:
2 测试样品和 Raman探针分子
测试样品名称: 测试样品编号: Raman探针分子名称: Raman探针分子编号:
3 测试依据:
4 Raman光谱仪
制造单位: 型号: 编号:
仪器检定/校准证书编号: 检定/校准结果:
5 样品的测试条件
样品池: 温/湿度:
连续激光器激发波长: 波长扫描范围: 激光强度: 积分时间: 激光衰减:
测试样品吸附的 Raman探针分子浓度:
测试样品中 Raman探针分子特征峰 Raman强度:
6 测试结果
测试样品和 Raman探针分子的 Raman光谱图:
测试样品中 Raman探针分子特征峰 Raman强度:
Raman探针分子特征峰 Raman强度:
测试样品吸附的 Raman探针分子浓度: Raman探针分子浓度:
测试样品 SERS增强因子:
7 测试机构
测试人员: 校验人员: 测试日期:
机构名称: 地址:
8 授权机构: 授权证书编号:
GB/T 24369 . 2—2018
参 考 文 献
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