GB/T 23296.26-2009 食品接触材料 高分子材料 食品模拟物中甲醛和六亚甲基四胺的测定 分光光度法

　　ICS 67 . 250 C 53

　　中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准

　　GB/T 23296 . 26—2009

　　食品接触材料 高分子材料

　　食品模拟物中甲醛和六亚甲基四胺

　　的测定 分光光度法

　　Food contactmaterials—polymer—

　　Determination offormaldehydeandhexamethylenetetramine

　　in foodsimulants—Spectrophotometry

　　2009-03-31 发布 2009-09-01 实施

　　中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会

　　

　　发

　　

　　布

　　GB/T 23296 . 26—2009

　　前 言

　　本标准的附录 A 为规范性附录，附录 B 、附录 C 为资料性附录 。

　　本标准由国家认证认可监督管理委员会提出 。

　　本标准由全国进出口食品安全检测标准化技术委员会(SAC/TC 445)归 口 。

　　本标准起草单位：中华人民共和国宁波出入境检验检疫局检验检疫技术中心 、中国检验检疫科学研究院 、中华人民共和国上海出入境检验检疫局 。

　　本标准主要起草人：陈少鸿 、孙利 、朱晓艳 、雍炜 、刘在美 、陈建国 、曹国洲 、周宇艳 、黄姣 。

　　Ⅰ

　　GB/T 23296 . 26—2009

　　引 言

　　甲醛(HCHO)及六亚甲基四胺(C6 H 12 N4 ) 都是化工原料，可用于制造与食品接触的塑料材料及制品 。 甲醛单体和六亚甲基四胺(HMTA)可能残留在制成的产品中，随着制品与食品接触而迁移到食品中 。 HMTA在一定条件下会分解产生甲醛，其转化的化学反应式如下：

　　C6 H 12 N4 +6H2 O→ 6HCHO+4NH 3

　　将 HMTA转化为甲醛后，可通过测定甲醛间接测定 HMTA 的迁移量，本标准中对 HMTA 迁移量的测定方法即基于此 。理论上，当样品 中 不 含 残 留甲 醛 单 体 时，通 过 测 定 迁 移 HMTA 转 化 的 甲 醛量，再根据上述反应式的数量关系即可得出 HMTA 迁移量 。然而，对第三方实验室而言，往往无法确定实际样品是否仅含甲醛或仅含 HMTA,且由于更关注的是甲醛对人体健康的影响，对甲醛或 HMTA的迁移限量都是以甲醛和 HMTA转化甲醛之和计，故本标准方法中将试样迁移的 HMTA转化成甲醛测定后，不再分别计算甲醛和 HMTA各自的迁移量 。

　　Ⅱ

　　GB/T 23296 . 26—2009

　　食品接触材料 高分子材料

　　食品模拟物中甲醛和六亚甲基四胺

　　的测定 分光光度法

　　1 范围

　　本标准规定了食品模拟物中甲醛和六亚甲基四胺(以甲醛计)的测定方法 。

　　本标准适用于水 、3%(质量浓度)乙酸溶液 、10%(体积分数)乙醇溶液和橄榄油四种食品模拟物中甲醛和六亚甲基四胺(以甲醛计)的测定 。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 。凡是注 日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本 。凡是不注 日期的引用文件，其最新版本适用于本标准 。

　　GB/T 602 化学试剂 杂质测定用标准溶液的制备

　　GB/T 6379 . 2—2004 测量方法与结果的准确度(正确度与精密度) 第 2 部分：确定标准测量方

　　法重复性与再现性的基本方法(ISO 5725-2:1994 , IDT)

　　GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法(GB/T 6682—2008 , ISO 3696 : 1987 , MOD)

　　GB/T 9721 化学试剂 分子吸收分光光度法通则(紫外和可见光部分)

　　GB/T 23296 . 1—2009 食品接触材料 塑料中受限物质 塑料中物质向食品及食品模拟物特定迁移试验和含量测定方法以及食品模拟物暴露条件选择的指南

　　3 术语和定义

　　GB/T 23296 . 1—2009 确立的以及下列术语和定义适用于本标准 。

　　3 . 1

　　甲醛迁移量 migration offormaldehyde

　　试样中的残留甲醛单体向食品模拟物中迁移的甲醛量 。

　　3 . 2

　　甲醛迁移总量 totalmigration offormaldehyde

　　试样中的残留六亚甲基四胺和甲醛单体在食品模拟物中的迁移量，以甲醛计 。

　　3 . 3

　　甲醛特定迁移量 specificmigration offormaldehyde

　　按照 GB/T 23296 . 1—2009 规定的迁移试验方法和条件，以一定分析方法测定计算得出的试样向拟接触食品迁移的甲醛量 。

　　注：在一定条件下，甲醛特定迁移量可由甲醛迁移量计算得出，也可由甲醛迁移总量计算得出 。

　　方法 一 乙酰丙酮比色法

　　4 方法提要

　　食品模拟 物 与 试 样 接 触 后，试 样 中 残 留 的 甲 醛 和 六 亚 甲 基 四 胺 ( HMTA) 迁 移 至 模 拟 物 中 。

　　1

　　GB/T 23296 . 26—2009

　　HMTA 在酸性介质中加热转化成甲醛 。在乙酸铵存在下，试液中的甲醛与乙酰丙酮反应生成黄色化合物 。试液颜色深浅与甲醛浓度成正比 。用分光光度计在 410 nm 处测定试液的吸光度，与标准系列比较定量，得出食品模拟物中的甲醛含量 。

　　5 试剂

　　除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和符合 GB/T 6682 规 定 的 二 级 以 上 纯 度 的水 。所有试剂经本方法检测均不得检出甲醛 。

　　5 . 1 冰乙酸 。

　　5 . 2 无水乙醇 。

　　5 . 3 乙酰丙酮(2 , 4-戊二酮，C5 H8 O2 ) 。

　　5 . 4 硫酸(ρ= 1 . 84 g/mL) ：优级纯 。

　　5 . 5 无水乙酸铵 。

　　5 . 6 正戊烷 。

　　5 . 7 丙酮溶液(900 mL/L) 。

　　5 . 8 氢氧化钠溶液(40 g/L) ：贮存于塑料瓶中 。

　　5 . 9 硫酸溶液(30 mL/L) ：用硫酸(5 . 4)配制 。

　　5 . 10 食品模 拟 物：包 括 水 基 模 拟 物 A 、B、C 和 油 基 模 拟 物 D ,应 符 合 GB/T 23296 . 1—2009 的 相 关规定 。

　　5 . 10 . 1 模拟物 A：去离子水 。

　　5 . 10 . 2 模拟物 B:3%(质量浓度)乙酸溶液 。

　　5 . 10 . 3 模拟物 C:10%(体积分数)乙醇溶液 。

　　5 . 10 . 4 模拟物 D：橄榄油，化学纯 。

　　注：符合 GB/T 23296 . 1—2009 规定的使用条件时，可用其他水基模拟物和诸如葵花籽油 、玉米 油 或 合 成 甘 油 三 酸酯混合物等油基模拟物代替上述食品模拟物 。模拟物 B(5 . 10 . 2) 也可改为 40 mL/L 的乙酸溶液 。

　　5 . 1 1 乙酰丙酮溶液：称取 15 g 乙酸铵(5 . 5)溶于适量水中，移入 100 mL 的容量瓶 。加入 40 μL 乙酰丙酮(5 . 3) 和 0 . 5 mL 乙 酸 (5 . 1) ,用 水 定 容 至 刻 度 。 此 溶 液 pH 值 约 为 6 。 0 ℃ ~ 4 ℃保 存，一 周 内使用 。

　　5 . 12 乙酰丙酮空白溶液：除不加乙酰丙酮外按 5 . 11 配制 。

　　5 . 13 乙酸溶液(60 mL/L) 。

　　5 . 14 甲醛标准储备溶液：按 GB/T 602 方法配制，或直接使用标准物质，其质量浓度均为 10. 0 mg/mL。

　　0 ℃ ~ 4 ℃保存，有效期 12 个月 。

　　5 . 15 甲醛 标 准 溶 液：1 000 μg/mL 。 准 确 移 取 10 . 00 mL 甲 醛 标 准 储 备 溶 液 ( 5 . 14) , 用 水 定 容 至100 mL , 0 ℃ ~ 4 ℃保存，有效期 12 个月 。

　　5 . 16 甲醛标准 储 备 溶 液 S: 100 μg/mL 。 准 确 移 取 10 . 00 mL 甲 醛 标 准 溶 液 ( 5 . 15) , 用 水 定 容 至100 mL , 0 ℃ ~ 4 ℃保存，有效期 3 个月 。

　　5 . 17 甲醛标准储备溶液 Y: 100 μg/mL 。准确移取 10 . 0 mL 甲醛标准溶液(5 . 15) ,用丙酮溶液(5 . 7)定容至 100 mL , 0 ℃ ~ 4 ℃保存，有效期 3 个月 。

　　5 . 18 甲醛标准工作溶液 A、B、C：水基模拟物介质，10 μg/mL 。准确移取 10. 0 mL 甲醛标准储备溶液 S (5 . 16) ,分别用模拟物 A(5 . 10 . 1) 、模拟物 B(5 . 10 . 2)和模拟物 C(5 . 10 . 3)定容至 100 mL,现用现配 。

　　注：根据迁移试验(7 . 2) 中使用的模拟物选择相应的标准工作溶液介质，不一定需要配制以上所有介质的标准工作溶液 。

　　6 仪器和设备

　　6 . 1 紫外-可见分光光度计：带 10 mm 光程比色皿 。仪器的波长准确度 、分辨率 、吸光度的准确度应符

　　2

　　GB/T 23296 . 26—2009

　　合 GB/T 9721 的规定 。

　　6 . 2 水浴：室温至 100 ℃ ,温度控制符合表 A. 1 的要求 。

　　6 . 3 烘箱：室温至 200 ℃ ,温度控制符合表 A. 1 的要求 。

　　6 . 4 分液漏斗：250 mL 。

　　6 . 5 具塞比色管：10 mL(带刻度)。

　　7 分析步骤

　　7 . 1 分析步骤选择

　　确认样品中不含 HMTA 时，迁移试验后按 7 . 4 步骤操作，7 . 5 步骤不需进行;样品中含 HMTA 或不能确定时，迁移试验后直接按 7 . 5 步骤操作 。

　　注：对样品是否含 HMTA 的确认基于对样品材料及其生产工艺的了解和生产 者 、供 应 商 提 供 的 信 息 。例 如，以 脲醛树脂为主要原料生产的制品，其加工过程中通常需加入 HMTA作为碱性稳定剂 。10 . 1 同理 。

　　7 . 2 迁移试验

　　根据待测样品的预期用途和使用条件，按 GB/T 23296 . 1—2009 规定的迁移试验方法及试验条件，用适当的模拟物(5 . 10)进行甲醛的迁移试验 。 由于甲醛具挥发性和水溶性，迁移试验前不应用水清洗样品，如产品使用说明中规定必须清洗，则按规定处理;迁移试验过程中至测定前，应注意密封，以避免迁移至模拟物中的甲醛挥发损失 。

　　7 . 3 空白试验

　　除不与待测样品接触外，按 7 . 2 及 7 . 4 或 7 . 5 步骤进行空白试验 。

　　7 . 4 用于测定甲醛迁移量的模拟物试液的制备

　　7 . 4 . 1 水基模拟物试液的制备

　　移取 5 . 0 mL 经迁移试验(7 . 2)得到的水基模拟物至比色管(6 . 5)中，继续按 7 . 7 . 1 处理 。

　　7 . 4 . 2 油基模拟物试液的制备

　　称取 20 . 0±0 . 2 g 迁 移 试 验 (7 . 2) 得 到 的 橄 榄 油 或 其 他 油 基 模 拟 物 于 分 液 漏 斗( 6 . 4) 中 。 加 入2 mL 丙酮溶液(5 . 7)和 40 mL正戊烷(5 . 6) ,混匀，再加入 5 mL 水 。按住漏斗上口塞子，振摇数次，略微打开塞口放气，随即盖紧再次振摇，如此反复数次后，静置 。待两相完全分层后，将下层水相通过慢速滤纸放入 50 mL容量瓶中 。再次加入 5 mL水萃取，共萃取四次 。萃取完全后，将容量瓶中的水溶液用水定容，充分混匀，由此得到溶液 E 。移取 5 . 0 mL溶液 E 至比色管(6 . 5)中，继续按 7 . 7 . 1 处理 。

　　注：水相与有机相的分离程度会影响最终的萃取效 率 。通 过 滤 纸 排 放 水 相，可 使 少 量 随 水 带 出的 油 基 介 质 得 到 分离 。7 . 5 . 2 、7 . 6 . 2 、10 . 4 . 2 同理 。

　　7 . 5 用于测定甲醛迁移总量的模拟物试液的制备

　　7 . 5 . 1 水基模拟物试液的制备

　　移取 5 . 0 mL 经迁移试验(7 . 2)得到的水基模拟物，加入比色管(6 . 5) 中，再加入 1 . 0 mL 硫酸溶液(5 . 9) ,混匀 。把比色管沉浸于 60 ℃水浴中放置 30 min,取出冷却至室温后，按住管塞，将比色管反复倒转数次，使气相中的甲醛充分被硫酸溶液吸收，由此得到溶液 H 。 向管中加入 2 mL 氢氧化钠溶液(5 . 8) ,用水定容至 10 mL,由此得到溶液 F 。移取 5 . 0 mL溶液 F 至另一比色管(6 . 5)中，继续按 7 . 7 . 1处理 。

　　7 . 5 . 2 油基模拟物试液的制备

　　称取 20 . 0±0 . 2 g 迁 移 试 验 (7 . 2) 得 到 的 橄 榄 油 或 其 他 油 基 模 拟 物 于 分 液 漏 斗( 6 . 4) 中 。 加 入2 mL 丙酮溶液(5 . 7)和 40 mL正戊烷(5 . 6) ,混匀，再加入 5 mL 水 。按住漏斗上口塞子，振摇数次，略微打开塞口放气，随即盖紧再次振摇，如此反复数次后，静置 。待两相完全分层后，将下层水相通过慢速滤纸放入 50 mL容量瓶中 。再次加入 5 mL水萃取，共萃取四次 。萃取完全后，将容量瓶中的水溶液用水定容，充分混匀 。 吸取 5 . 0 mL水溶液加入 10 mL 比色管中，用乙酸溶液(5 . 13)定容至 10 mL,混匀 。

　　3

　　GB/T 23296 . 26—2009

　　把比色管沉浸于 80 ℃水浴中放置 30 min,取出冷却至室温后，按住管塞，将比色管反复倒转数次，使气相中的甲醛充分被溶液吸收，由此得到溶液 G 。 移取 5 . 0 mL 溶液 G 至另一比色管(6 . 5) 中，继 续 按7 . 7 . 1 处理 。

　　7 . 6 标准工作溶液和参比溶液的制备

　　7 . 6 . 1 水基模拟物介质的标准工作溶液系列

　　取 7 支比色管(6 . 5) ,根据迁移试验(7 . 2)所使用的模拟物种类，按表 1 分别加入甲醛标准工作溶液A(或 B或 C)(5 . 18) ,用相应的水基模拟物(5 . 10)定容至 5 . 0 mL,继续按 7 . 7 . 1 处理 。

　　表 1 水基模拟物介质的标准工作溶液系列

　　甲醛浓度/(μg/mL)

　　0

　　1 . 0

　　2 . 0

　　3 . 0

　　4 . 0

　　5 . 0

　　6 . 0

　　甲醛标准工作溶液(5 . 18) 加入量/mL

　　0

　　0 . 5

　　1 . 0

　　1 . 5

　　2 . 0

　　2 . 5

　　3 . 0

　　注：为减少浓度测量的相对误差，适宜的吸光度范围为 0 . 2 ~ 0 . 8 。可根据分光光度计的动态线性范围和实际吸光度调整标准工作溶液系列浓度 。

　　7 . 6 . 2 油基模拟物介质的标准工作溶液系列

　　取 6 支分液漏斗(6 . 4) ,分别加入 20±0 . 2 g模拟物 D(5 . 10 . 4) 。按表 2 分别移取甲醛标准储备溶液 Y(5 . 17)加入漏斗中，混匀 。各加入 40 mL正戊烷(5 . 6) ,再加入 5 mL水 。按住漏斗上口塞子，振摇数次，略微打开塞口放气，随即盖紧再次振摇，如此反复数次后，静置 。待两相完全分层后，将下层水相通过滤纸放入 50 mL容量瓶中 。再次加入 5 mL水萃取，共萃取四次 。萃取完全后，将容量瓶中的水溶液用水定容(测定甲醛迁移总量时，在定容前加入 1 . 5 mL 冰乙酸)，充分混匀 。此标准溶液用于油基模拟物中甲醛特定迁移量的测定，其甲醛浓度以毫克每千克油基模拟物计 。分别移取 5 . 0 mL 水溶液，加入比色管(6 . 5)中，继续按 7 . 7 . 1 处理 。

　　表 2 油基模拟物介质的标准工作溶液系列

　　甲醛浓度/(mg/kg 油基模拟物)

　　0

　　1 . 5

　　5 . 0

　　10 . 0

　　15 . 0

　　20 . 0

　　甲醛标准储备溶液 Y(5 . 17) 加入量/mL

　　0

　　0 . 3

　　1 . 0

　　2 . 0

　　3 . 0

　　4 . 0

　　7 . 6 . 3 水基模拟物介质的参比溶液

　　移取 5 . 0 mL水基模拟物(5 . 10)(测定甲醛迁移量时)或 7 . 5 . 1 步骤中得到的空白溶液 F(测定甲醛迁移总量时)至比色管(6 . 5)中 。继续按 7 . 7 . 2 处理 。

　　7 . 6 . 4 油基模拟物介质的参比溶液

　　移取 5 . 0 mL 经 7 . 4 . 2 步骤处理得到的空白溶液 E(测定甲醛迁移量时)或 7 . 5 . 2 步骤中得到的空白溶液 G(测定甲醛迁移总量时)至比色管(6 . 5)中 。继续按 7 . 7 . 2 处理 。

　　7 . 7 显色反应

　　7 . 7 . 1 在每支盛有空白溶液 、试液或标准溶液的比色管中各加入 5 . 0 mL 乙酰丙酮溶液(5 . 11) ,盖上瓶塞后充分摇匀 。将比色管在 40 ℃水浴 中 放 置 30 min,取 出 在 室 温 下 冷 却 45 min ~ 60 min,按 7 . 8测定 。

　　7 . 7 . 2 在盛有参比溶液的比色管中加入 5 . 0 mL 乙酰丙酮空白溶液(5 . 12) ,盖上瓶塞后充分摇匀 。将比色管在 40 ℃水浴中放置 30 min,取出在室温下冷却 45 min ~ 60 min,按 7 . 8 测定 。

　　注：如需要快速检测，可将 7 . 7 . 1 和 7 . 7 . 2 中的室温冷却方式改为在冰水浴中冷却 2 min。

　　7 . 8 测定

　　7 . 8 . 1 测定吸光度

　　将比色管中溶液装入 10 mm 比色皿，以相应的参比溶液为参比，以 410 nm 波长分别测定标准溶液和试液的吸光度 。

　　7 . 8 . 2 绘制校准曲线

　　以甲醛浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，以标准溶液测定结果建立校准曲线 。校准曲线应呈直线，对水基模拟物介质，曲线相关系数 ≥0 . 999;对油基模拟物介质，曲线相关系数 ≥0 . 998 。

　　4

　　GB/T 23296 . 26—2009

　　7 . 8 . 3 读出试液浓度

　　以测得的试液吸光度在校准曲线上读出对应的甲醛浓度 cf,以每升食品模拟物中甲醛的毫克数计 。对油基模拟物介质，甲醛浓度以每千克食品模拟物中甲醛的毫克数计 。

　　注：若试液中甲醛含量超出校准曲线范围，可将 7 . 4 或 7 . 5 步骤得到的试液用相应的空白溶液稀释一定倍数 f 后，各取 5 . 0 mL加入比色管(6 . 5) ,按 7 . 7 . 1 处理后再行测定 。

　　方法二 变色酸比色法

　　8 方法提要

　　食品模拟物与试样接触后，试样中残留的甲醛和 HMTA迁移至模拟物中 。 HMTA 在酸性介质中加热转化成甲醛 。在硫酸存在下，试液中的甲醛与变色酸反应生成紫色化合物 。试液颜色深浅与甲醛浓度成正比 。用分光光度计在 574 nm处测定试液的吸光度，与标准系列比较定量，得出食品模拟物中的甲醛含量 。

　　9 试剂

　　9 . 1 变色酸：C10 H8 O8 S2 。

　　9 . 2 硫酸溶液(2+1) ：用硫酸(5 . 4)配制 。

　　9 . 3 变色酸溶液：0 . 5 g/100 mL 。称取 500 mg 变色酸(9 . 1) ,用适量水溶解，移入 100 mL 容量瓶中，用水定容到刻度，摇匀后用慢速滤纸过滤，收集滤液待用 。此溶液用时配制 。

　　9 . 4 甲醛标准溶液：丙酮介质，1 000 μg/mL 。准确移取 10 . 00 mL 甲醛标准储备溶液(5 . 14) , 用丙酮溶液(5 . 7)定容至 100 mL , 0 ℃ ~ 4 ℃保存，有效期 12 个月 。

　　9 . 5 甲 醛 标 准 工 作 溶 液 A 、B、C：水 基 模 拟 物 介 质，50 μg/mL 。 准 确 移 取 5 . 0 mL 甲 醛 标 准 溶 液(5 . 15) ,分别用模拟物 A(5 . 10 . 1) 、模拟物 B(5 . 10 . 2)和模拟物 C(5 . 10 . 3)定容至 100 mL,现用现配 。

　　注：根据迁移试验(7 . 2) 中使用的模拟物选择相应的标准工作溶液介质，不一定需要配制以上所有介质的标准工作溶液 。

　　10 分析步骤

　　10 . 1 分析步骤选择

　　确认样品中不含 HMTA 时，按 10 . 2 步骤操作，10 . 3 步骤不需进行;样品中含 HMTA 或不能确定时，按 10 . 3 步骤操作 。

　　10 . 2 用于测定甲醛迁移量的模拟物试液的制备

　　10 . 2 . 1 水基模拟物试液的准备

　　移取 1 . 0 mL 经迁移试验(7 . 2)得到的水基模拟物至比色管(6 . 5)中，继续按 10 . 5 . 1 处理 。

　　10 . 2 . 2 油基模拟物试液的制备

　　移取 1 . 0 mL 7 . 4 . 2 步骤中得到的溶液 E 至比色管(6 . 5)中，继续按 10 . 5 . 1 处理 。

　　10 . 3 用于测定甲醛迁移总量的模拟物试液的制备

　　10 . 3 . 1 水基模拟物试液的制备

　　将 7 . 5 . 1 步骤中得到的溶液 H 用相应的水基模拟物(5 . 10) 定容至 10 mL,混匀后移取 1 . 0 mL 溶液至另一比色管(6 . 5)中，继续按 10 . 5 . 1 处理 。

　　10 . 3 . 2 油基模拟物试液的制备

　　移取 1 . 0 mL 7 . 5 . 2 步骤中得到的溶液 G 至比色管(6 . 5)中，继续按 10 . 5 . 1 处理 。

　　10 . 4 标准工作溶液和参比溶液的制备

　　10 . 4 . 1 水基模拟物介质的标准工作溶液系列

　　取 7 支比色管(6 . 5) ,根据迁移试验(7 . 2)所使用的模拟物种类，按表 3 分别加入甲醛标准工作溶液A(或 B或 C)(5 . 18 或 9 . 5) ,用相应的水基模拟物(5 . 10)稀释至 1 . 0 mL,继续按 10 . 5 . 1 处理 。

　　5

　　GB/T 23296 . 26—2009

　　表 3 水基模拟物介质的标准工作溶液系列

　　甲醛浓度/(μg/mL)

　　0

　　2 . 0

　　4 . 0

　　6 . 0

　　8 . 0

　　10 . 0

　　15 . 0

　　甲醛标准工作溶液(5 . 18) 加入量/mL

　　0

　　0 . 20

　　0 . 40

　　0 . 60

　　0 . 80

　　—

　　—

　　甲醛标准工作溶液(9 . 5) 加入量/mL

　　0

　　—

　　—

　　—

　　—

　　0 . 20

　　0 . 30

　　10 . 4 . 2 油基模拟物介质的标准工作溶液系列

　　取 6 支分液漏斗(6 . 4) ,分别加入 20 g±0 . 2 g模拟物 D(5 . 10 . 4) 。按表 4 分别移取甲醛标准溶液 (9 . 4)加入漏斗中，混匀 。各加入 40 mL正戊烷(5 . 6) ,再加入 5 mL 水，按住漏斗上口塞子，振摇数次，略微打开塞口放气，随即盖紧再次振摇，如此反复数次后，静置，待两相完全分层后，将下层水相通过慢速滤纸放入 50 mL容量瓶中;再次用 5 mL水萃取，共萃取四次 。萃取完全后，将容量瓶中的水溶液用水定容，充分混匀 。此溶液用于油基模拟物中甲醛特定迁移量的测定，其甲醛浓度以毫克每千克油基模拟物计 。分别移取 1 . 0 mL水溶液，加入比色管(6 . 5)中，继续按 10 . 5 . 1 处理 。

　　表 4 油基模拟物介质的标准工作溶液系列

　　甲醛浓度/(mg/kg 油基模拟物)

　　0

　　10 . 0

　　15 . 0

　　20 . 0

　　25 . 0

　　30 . 0

　　甲醛标准溶液(9 . 4) 加入量/mL

　　0

　　0 . 20

　　0 . 30

　　0 . 40

　　0 . 50

　　0 . 60

　　10 . 4 . 3 水基模拟物介质的参比溶液

　　移取 1 . 0 mL水基模拟物(5 . 10)(测定甲醛迁移量时)或 7 . 5 . 1 步骤中得到的空白溶液 H(测定甲醛迁移总量时)至比色管(6 . 5)中，继续按 10 . 5 . 2 处理 。

　　10 . 4 . 4 油基模拟物介质的参比溶液

　　移取 1 . 0 mL 经 7 . 4 . 2 步骤处理得到的空白溶液 E(测定甲醛迁移量时)或 7 . 5 . 2 步骤中得到的空白溶液 G(测定甲醛迁移总量时)至比色管(6 . 5)中，继续按 10 . 5 . 2 处理 。

　　10 . 5 显色反应

　　10 . 5 . 1 在每支盛有空白溶液 、试液或标准溶液的比色管中各加入 1 . 0 mL 变色酸溶液(9 . 3) ,再缓慢加入 8 . 0 mL硫酸溶液(9 . 2) ,小心摇动比色管 。溶液充分混匀后，将比色管在 90 ℃水浴中放置 20 min后取出，立即在冰水浴中冷却 2 min,并立即按 10 . 6 . 1 测定 。

　　10 . 5 . 2 在盛有参比溶液的比色管中加入 1 . 0 mL水，再缓慢加入 8 . 0 mL硫酸溶液(9 . 2) ,小心摇动比色管 。溶液充分混匀后，将比 色 管 在 90 ℃水 浴 中 放 置 20 min 后 取 出，在 冰 水 浴 中 冷 却 2 min 后，按

　　10 . 6 . 1 测定 。

　　10 . 6 测定

　　10 . 6 . 1 测定吸光度

　　将比色管中的溶液小心沿 10 mm 比色皿内壁缓慢倒入，以相应的参比溶液为参比，以 574 nm 波长分别测定标准溶液和试液的吸光度 。

　　注：高浓度硫酸溶液粘度较大，若将试液快速倒入比色皿，会产生许多不易消除的微小气泡，干扰测定结果 。

　　10 . 6 . 2 绘制校准曲线

　　以甲醛浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，以标准溶液测定结果建立校准曲线 。校准曲线应呈直线，对水基模拟物介质，曲线相关系数 ≥0 . 999;对油基模拟物介质，曲线相关系数 ≥0 . 998 。

　　10 . 6 . 3 读出试液浓度

　　以测得的试液吸光度在校准曲线上读出对应的甲醛浓度，对水基模拟物介质以每升食品模拟物中甲醛的毫克数计，对油基模拟物介质以每千克食品模拟物中甲醛的毫克数计 。

　　注：若试液中甲醛含量超出校准曲线范围，可将 10 . 2 或 10 . 3 步骤得到的试液用相应的空白溶液稀释一定倍 数 f后，各取 1 . 0 mL加入比色管(6 . 5) ,按 10 . 5 . 1 处理后再行测定 。

　　1 1 结果计算

　　1 1 . 1 甲醛迁移量的计算

　　甲醛迁移量以质量浓度mf 计，数值以每升食品模拟物中甲醛的毫克数(mg/L)表示，按式(1)计算：

　　6

　　GB/T 23296 . 26—2009

　　mf =(cf -c0 ) × f …………………………( 1 )

　　式中：

　　cf — 由校准曲线读出的试液甲醛浓度，单位为毫克每升(mg/L) ;

　　c0 — 由校准曲线读出的空白溶液甲醛浓度，单位为毫克每升(mg/L) ;

　　f— 稀释倍数 。

　　注：对油基模拟物介质，mf 和 cf 均以毫克每千克(mg/kg) 表示 。

　　1 1 . 2 甲醛迁移总量的计算

　　甲醛迁移总量以质量浓度 Tmf 计，数值以每升食品模拟物中甲醛的毫克数(mg/L) 表示，按式(2)计算：

　　Tmf =(cf -c0 ) × 2 × f …………………………( 2 )

　　式中：

　　cf — 由校准曲线读出的试液甲醛浓度，单位为毫克每升(mg/L) ;

　　c0 — 由校准曲线读出的空白溶液甲醛浓度，单位为毫克每升(mg/L) ;

　　2 — 步骤 7 . 5 或 10 . 3 中的溶液稀释倍数;

　　f— 稀释倍数 。

　　注：对油基模拟物介质，Tmf 和 cf 均以毫克每千克(mg/kg) 表示 。

　　1 1 . 3 甲醛特定迁移量的计算

　　样品的甲醛特定迁移量以质量分数 smf 计，数值以每千克食品模拟物中甲醛的毫克数(mg/kg) 或每平方分米样品与食品模拟物接触的表面积中甲醛的毫克数(mg/dm2 )表示 。 由 11 . 1 得出的甲醛迁移量或 11 . 2 得出的甲醛迁移总量，按照 GB/T 23296 . 1—2009 第 13 章的规定计算，并取平行试验结果的平均值 。

　　测定结果大于检出限时且小于 1 mg/L(或 1 mg/kg) 时，表示至小数点后两位;结果大于 1 mg/L (或 1 mg/kg)时，以三位有效数字表示 。

　　12 方法的测定低限和精密度

　　12 . 1 方法的测定低限

　　以高于空白溶液吸光度值 0 . 01 的吸光度所对应的浓度值为检出限，以 3 倍检出限为方法测定低限，列于表 5 。

　　表 5 方法的测定低限

　　模拟物介质

　　乙酰丙酮比色法

　　变色酸比色法

　　水

　　0 . 33 mg/L

　　0 . 48 mg/L

　　乙酸(30 g/L)

　　0 . 27 mg/L

　　0 . 51 mg/L

　　乙醇(1+9)

　　0 . 27 mg/L

　　0 . 51 mg/L

　　橄榄油

　　1 . 12 mg/kg

　　3 . 39 mg/kg

　　注：使用的水 、试剂和仪器的差异会导致检出限不同 。可按本条款所述方式得出实际的检出限和测定低限 。

　　12 . 2 精密度

　　在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 10% 。

　　按照 GB/T 6379 . 2—2004 对实验室协同试验结果计算重复性和再现性，参见附录 B 。

　　13 确证与仲裁

　　当以上方法之一测得的甲醛特定迁移量 smf 超过有关规定的限量时，可用另一方法进行确证 。本标准中的方法一和方法二可互为确证方法 。

　　乙酰丙酮比色法为仲裁法 。

　　7

　　GB/T 23296 . 26—2009

　　附 录 A (规范性附录)温度控制要求

　　温度控制要求见表 A. 1 。

　　表 A.1 温度和允许误差

　　温度和允许误差

　　5 ℃ ± 1 ℃

　　20 ℃ ± 1 ℃

　　30 ℃ ± 1 ℃

　　40 ℃ ± 1 ℃

　　50 ℃ ± 2 ℃

　　60 ℃ ± 2 ℃

　　70 ℃ ± 2 ℃

　　80 ℃ ± 3 ℃

　　90 ℃ ± 3 ℃

　　100 ℃ ± 3 ℃

　　121 ℃ ± 3 ℃

　　130 ℃ ± 5 ℃

　　140 ℃ ± 5 ℃

　　150 ℃ ± 5 ℃

　　160 ℃ ± 5 ℃

　　170 ℃ ± 5 ℃

　　8

　　GB/T 23296 . 26—2009

　　附 录 B

　　(资料性附录)

　　方法的重复性和再现性

　　B.1 乙酰丙酮方法的重复性和再现性由 9 个实验室的协同试验得出 。按照 GB/T 6379 . 2—2004 的计算结果见表 B. 1 。

　　表 B.1 乙酰丙酮比色法的重复性和再现性

　　模拟物介质

　　甲醛迁移量/(mg/L)

　　甲醛迁移总量/(mg/L)

　　水平

　　重复性限 r

　　再现性限 R

　　水平

　　重复性限 r

　　再现性限 R

　　水

　　5 . 12

　　0 . 243

　　0 . 999

　　1 . 50

　　0 . 071

　　1 . 107

　　乙酸(30 g/L)

　　7 . 01

　　0 . 112

　　1 . 516

　　9 . 93

　　0 . 707

　　2 . 094

　　乙醇(1+9)

　　5 . 54

　　0 . 100

　　0 . 933

　　1 . 43

　　0 . 170

　　0 . 474

　　橄榄油

　　1 . 05

　　(mg/kg)

　　0 . 173

　　(mg/kg)

　　0 . 954

　　(mg/kg)

　　1 . 16

　　(mg/kg)

　　0 . 185

　　(mg/kg)

　　1 . 940

　　(mg/kg)

　　B.2 变色酸方法的重复性和再现性由 8 个实验室的协同试验得出 。按照 GB/T 6379 . 2—2004 对水基模拟物试验的计算结果见表 B. 2 。

　　表 B.2 变色酸比色法的重复性和再现性

　　模拟物介质

　　甲醛迁移量/(mg/L)

　　甲醛迁移总量/(mg/L)

　　水平

　　重复性限 r

　　再现性限 R

　　水平

　　重复性限 r

　　再现性限 R

　　水

　　5 . 03

　　0 . 146

　　1 . 211

　　1 . 39

　　0 . 156

　　1 . 887

　　乙酸(30 g/L)

　　7 . 28

　　0 . 159

　　1 . 707

　　10 . 3

　　0 . 434

　　2 . 487

　　乙醇(1+9)

　　5 . 69

　　0 . 281

　　0 . 991

　　1 . 27

　　0 . 288

　　1 . 286

　　9

　　GB/T 23296 . 26—2009

　　附 录 犆

　　(资料性附录)

　　甲醛显色产物的紫外吸收光谱图

　　犆.1 乙酰丙酮法显色结果的吸收曲线见图 C. 1 。

　　注 ：曲线 1 为按 7 . 6 . 1 制备的空白标准溶液(水介质)显色后的波长扫描结果;曲线 2 为 2 mg/L 甲醛标准水溶液显