GB/T 21459.4-2008 真菌农药油悬浮剂产品标准编写规范

　　ICS 65 . 100 . 0 1 G 23

　　中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准

　　GB/T 21459 . 4—2008

　　真菌农药油悬浮剂产品标准编写规范

　　Specification guidelines

　　for fungaloilmiscible flowableconcentrates(OF)

　　2008-02-14 发布 2008-08-01 实施

　　中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会

　　

　　发

　　

　　布

　　GB/T 21459 . 4—2008

　　前 言

　　GB/T 21459 分为五个部分：

　　—GB/T 21459 . 1—2008 真菌农药母药产品标准编写规范;

　　—GB/T 21459 . 2—2008 真菌农药粉剂产品标准编写规范;

　　—GB/T 21459 . 3—2008 真菌农药可湿性粉剂产品标准编写规范;

　　—GB/T 21459 . 4—2008 真菌农药油悬浮剂产品标准编写规范;

　　—GB/T 21459 . 5—2008 真菌农药饵剂产品标准编写规范 。

　　本部分为 GB/T 21459 的第 4 部分 。

　　本部分的附录 A 为规范性附录 。

　　本部分由中华人民共和国农业部提出并归 口 。

　　本部分起草单位：农业部农药检定所 、中国农业科学院植物保护研究所 。

　　本部分主要起草人：王以燕 、农向群 、张泽华 、叶纪明 、张礼生 、李鑫 、高松 、杨峻 、李宝玉 。

　　本部分首次发布 。

　　Ⅰ

　　GB/T 21459 . 4—2008

　　引 言

　　微生物农药是生物农药中的一类，包括细菌 、真菌 、病毒和原生动物等天然的或经人工诱变处理及基因修饰的微生物，通过人工繁殖和加工而成的用于防治病 、虫 、草 、鼠等有害生物的制剂 。真菌农药是微生物农药的一种，其有效成分是相关靶标生物的病原真菌活菌体 。 菌体形态主要有孢子(如分生孢子 、芽生孢子 、休眠孢子等)和菌丝体等 。 分生孢子是一种无性繁殖细胞，为真菌农药中通常存在的形态，并作为有效成分基本单元 。

　　真菌农药油悬浮剂是指由相关真菌农药母药与适宜的有机溶剂或油类介质经混合成均匀分散的液体制剂 。通常为亚稳定系统，使用前需振荡或搅拌使之重新混合均匀 。

　　目前广泛应用的大多是以分生孢子为活性成分的杀虫类真菌制剂，已登记注册的大多数产品是粉剂，但近期油悬浮剂发展较快 。本部分以由杀虫的真菌分生孢子制成的油悬浮剂为基准制定，其他功能的或非分生孢子形态的真菌农药油悬浮剂可作相应调整 。 目前国际组织中尚未有真菌农药油悬浮剂标准的通用编写规 范 。 本 部 分 是 在 参 考 了 联 合 国 粮 农 组 织 (FAO) 、世 界 卫 生 组 织 ( WHO) 联 合 发 布 的2002 年 第 一 版《 PESTICIDE SPECIFICATIONS》( 农 药 标 准 )第 九 章 中 的 细 菌 农 药 标 准 和HG/T 2467 . 8—2003《农药母药产品标准编写规范》及其他相关标准的基础上制定的，在规定技术指标的内容和检测方法时充分考虑了真菌的生物特性和当前真菌农药生产的技术水平 。

　　本部分中各章按只含 1 种有效成分真菌的油悬浮剂编写要求，如含 2 种或 2 种以上有效成分应在文中相应位置添加内容 。

　　Ⅱ

　　GB/T 21459 . 4—2008

　　真菌农药油悬浮剂产品标准编写规范

　　1 范围

　　GB/T 21459 的本部分规定了 真 菌 农 药 油 悬 浮 剂 产 品 标 准 中 的 产 品 要 求 、试 验 方 法 以 及 标 志 、标签 、包装 、贮存和运输等规范性技术要素的内容和编写要求 。

　　本部分适用于真菌农药油悬浮剂产品的国家标准 、行业标准或企业标准的编写 。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件中的条款通过 GB/T 21459 的本部分的引用而成为本部分的条款 。凡是注 日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否 可 使 用 这 些 文 件 的 最 新 版 本 。 凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件，其 最 新 版 本 适 用 于 本部分 。

　　GB/T 191 包装储运图示标志(GB/T 191—2000 , eqv ISO 780:1997)

　　GB/T 1250 极限数值的表示方法和判定方法

　　GB/T 1600 农药水分测定方法

　　GB/T 1604 商品农药验收规则

　　GB/T 1605 商品农药采样方法

　　GB 3796 农药包装通则

　　GB/T 16150 农药粉剂 、可湿性粉剂细度测定方法

　　GB/T 21459 . 1—2008 真菌农药母药产品标准编写规范

　　HG/T 2467 . 5—2003 农药悬浮剂产品标准编写规范

　　3 术语和定义

　　GB/T 21459 . 1—2008 中确定的以及下列术语和定义适用于 GB/T 21459 的本部分 。

　　3 . 1

　　悬浮率 suspensibility

　　本部分中指产品经混合均匀，不用或用稀释剂按适当比例稀释，在规定条件下，静置 30 min 后，容器上部 9/10 的悬浮液中有效成分真菌分布的含菌量占总含菌量的百分率 。

　　4 要求

　　4 . 1 有效成分描述

　　应提供产品中有效成分的名称和基本生化参数等信息，并写在标题之后 、范围之前 。

　　所提供的信息应包括菌种中文通用名及其别名，菌种拉丁文学名及其异名，菌种来源 、株系分型或代码，菌种生物学分类地位及其鉴定特征等 。鉴定特征可以是形态学 、生物化学或遗传学特征，应尽可能提供从国际公认机构能得到的鉴定特征的参考文献 。如果使用基因修饰过的菌株，还应陈述相关信息，对有特定基因序列的应指出登记号 。还应标明菌种保藏机构及登记号或编号，产品中有效成分的主要存在形态 、生物活性即防治对象，以及菌种保存条件 、适宜生长条件等参数(格式见附录 A) 。

　　4 . 2 组成和外观

　　本产品由真菌农药母药(通用名)与适宜的有机溶剂或油类介质经混合加工制成，应为油状液体 。产品为亚稳定系统，在贮存过程中可能出现沉淀，经摇动应能恢复均匀状态，不应有结块，还应说明产品

　　1

　　GB/T 21459 . 4—2008

　　的颜色等外观特征 。

　　4 . 3 规范项目及指标

　　真菌农药油悬浮剂产品的规范项目应符合表 1 的要求，具体指标由各产品作出规定 。

　　表 1 真菌农药油悬浮剂规范项目及指标

　　项 目

　　指 标

　　含菌量/[(单位名称)/mL] ≥(或规定范围)

　　活菌率/% ≥(或规定范围)

　　毒力/(LD50 、LT50 或%等单位名称) ≤

　　(在……条件下)

　　杂菌率/% ≤

　　化学杂质a /% ≤

　　水分a /% ≤

　　悬浮率/% ≥

　　倾倒性

　　倾倒后残余物/% ≤

　　洗涤后残余物/% ≤

　　湿筛试验(通过…… μm筛)/% ≥

　　低温稳定性a、b

　　合格

　　贮存稳定性和(或)热贮稳定性b /% ≥

　　(…… ℃贮存……个月或周的活菌率与其标明值之百分率)

　　(建议不低于 80%)

　　注：所列项 目可根据真菌的特性 、功能和产品具体情况适当增减，特别需要考虑的是可能影响制剂使用效果 、运输和应用所关联油介质的特性参数，如粘度 、闪点等 。

　　a 可选项 目 。

　　b 定期检测项 目 。

　　5 试验方法

　　除非另有说明，试验方法所用试剂级别应为化学纯以上 。

　　5 . 1 抽样

　　按照 GB/T 1605 中液体制剂采样方法进行，用随机数表法确定抽样的包装件，最终抽样量不少于200 mL 。

　　5 . 2 鉴别试验

　　5 . 2 . 1 菌种鉴别

　　一般只对油悬浮剂的母药进行鉴别 。如果需要，可从油悬浮剂中分离 、纯化出有效成分的菌种，再作鉴别，但应说明分离 、纯化菌种的方法和操作步骤 。

　　根据所提供的菌种形态学 、生物化学 、DNA分子特征或国际公认机构的鉴定特征，用显微观察法从生物形态上进行鉴定或采用其他(如生物化学 、DNA 片断序列)方法进行鉴定 。

　　根据形态学特征鉴别的表述一般应包括：菌落的颜色和形状，产孢器结构、产孢细胞以及孢子的着生方式、几何形状、排列方式、细胞分隔、细胞核数、表面凹凸和(或)纹饰、大小等(见 GB/T 21459 . 1—2008 第B. 1 章)。如果具有明显区别于其他相似真菌的形态，应特别指出 。必要时可附图和照片 。

　　根据生物化学特征的鉴别应指明所鉴别的化学物质名称 、检测方法和注意事项等 。必要时可附图或图谱 。

　　2

　　GB/T 21459 . 4—2008

　　根据 DNA分子特征的鉴别应指出检测方法，包括引物碱基序列 、克隆载体名称 、操作步骤和注意事项等，并给出由鉴别试验得到的 DNA 片断序列图 。

　　5 . 2 . 2 菌种仲裁鉴定

　　当对鉴别结果有怀疑或争议时，应到具有菌种认证资质的单位，将在菌种保藏中心保藏的生产菌种及其母药和(或)从油悬浮剂中分离纯化的菌种与模式菌种描述进行对照，由 2 名以上的专家确认后，出具菌种鉴定报告，作为仲裁依据 。

　　5 . 3 含菌量的测定

　　按照 GB/T 21459 . 1—2008 中 5 . 3 编写，但试验步骤中应适当增加取样量，并注意根据油的特点作相应调整 。

　　通常取样前，应按产品说明书将样品充分混合均匀，可采用颠倒样品容器 、充分振荡或用玻璃棒(或搅拌器等)伸入容器底部充分搅拌，使样品完全均匀 。

　　一般采用与产品相同的油介质或使用说明书所推荐的稀释剂，如果选用其他稀释剂应说明理由和所用稀释剂的特性等 。

　　如果采用显微计数法检测分生孢子数，建议使用亮线的血球计数板 。

　　5 . 4 活菌率的测定

　　按照 GB/T 21459 . 1—2008 中 5 . 4 编写，但取样量应适当增加，并注意根据油介质的特点作适当调整 。取样前需充分搅拌均匀，说明选用的稀释剂(参见 5 . 3) 。

　　如果 5 . 3 采用菌落形成单位法或其他能确定活菌的方法检测含菌量，可取消此项检测试验 。

　　5 . 5 杂菌率的测定

　　按照 GB/T 21459 . 1—2008 中 5 . 5 编写，但取样量应适当增加，并注意根据油的特点作适当调整，取样前需充分搅拌均匀，说明选用的稀释剂(参见 5 . 3) 。

　　5 . 6 化学杂质的测定

　　根据制剂特性和实际需要测定 。

　　5 . 7 毒力的测定

　　按照 GB/T 21459 . 1—2008 中 5 . 7 编写 。 由于制剂特点和其中所含真菌的生物活性功能不同，毒力测定方法可能相差较大，应根据具体情况调整 。试验步骤中，如果制剂需要预处理，应作详细说明 。

　　注意取样前需充分搅拌均匀，并选用适当稀释剂(参见 5 . 3) 。

　　5 . 8 水分的测定

　　按 GB/T 1600 中 “共沸蒸馏法 ”进行测定 。

　　5 . 9 倾倒性试验

　　用稀释剂代替水，按照 HG/T 2467 . 5—2003 中 5 . 9 进行测定 。

　　5 . 10 湿筛试验

　　根据制剂特性和实际需要测定 。

　　测定方法可参考 GB/T 16150 中的 “湿筛法 ”，以油介质代替水做适当修改，按实际试验方法编写 。在没有更合适的方法时，建议按以下方法进行测定 。

　　5 . 10 . 1 方法提要

　　根据油悬浮剂含菌量和粘稠性，称取混合均匀的试样，不用或用稀释剂按适当比例稀释，倒入经稀释剂浸润的试验筛中，将试验筛置于盛有稀释剂的盆中，反复洗涤，移出筛中残余物，干燥，称量，计算 。

　　5 . 10 . 2 试剂

　　稀释剂名称(应为产品说明书推荐的稀释剂或产品的悬浮油介质，如果采用其他稀释剂应作必要说明)。

　　5 . 10 . 3 仪器及设备

　　试验筛：孔径，μm ;

　　3

　　GB/T 21459 . 4—2008

　　烧杯：250 mL , 100 mL ;

　　恒温干燥箱：控温 105℃以内，精度±2 ℃ ;

　　天平：精度 0 . 1 g ;

　　玻璃棒;

　　干燥器 。

　　5 . 10 . 4 试验步骤

　　a) 将试验筛浸入盛有稀释剂的盆中，使筛网完全润湿 。

　　b) 根据油悬浮剂含菌量和粘稠性，准确称取混合均匀的试样(建议取样体积至少 20 mL) ,置于干燥的 250 mL烧杯中，充分混合均匀或用稀释剂按适当比例稀释(一般稀释至混合液能够顺利通过试验筛，建议稀释 2 倍 ~ 5 倍)并混匀，缓慢倒入试验筛中 。用稀释剂洗涤烧杯 3 次，洗涤液也倒入试验筛中 。

　　c) 将试验筛浸入稀释剂中至规定深度(cm,取决于试验筛高度，应始终保持筛缘在液面之上)，左右摆动几次后提起试验筛，反复浸入和提起试验筛多次(建议至少 20 次)。更换稀释剂，再如上操作，反复浸入和提起试验筛若干次(建议至少 10 次，确认不再有物料过筛为准)。

　　d) 将筛中残余物集中至一角再转移到已恒重的 100 mL烧杯中 。静置，待残余物沉淀后，尽量倾出液体，将沉淀物分散平铺于杯底，自然挥干 。

　　e) 在烘箱中规定温度(根据稀释剂的物化性能确定)下烘至恒重，取出烧杯置于干燥器中冷却至室温;也可采用或结合真空干燥使残余物恒重，称重 。

　　5 . 10 . 5 计算

　　油悬浮剂的悬浮物细度 x(%)按式(1)计算：

　　x = × 100 …………………………( 1 )

　　式中：

　　m1 — 试样的质量，单位为克(g) ;

　　m2 — 残余物的质量，单位为克(g) 。

　　5 . 1 1 悬浮率的测定

　　5 . 1 1 . 1 方法提要

　　根据油悬浮剂含菌量，量取混合均匀的试样，置于具塞量筒中，不稀释或加适当的稀释剂稀释并混匀后，在 30℃±1℃条件下静置 30 min,分别测定静置前悬浮液含孢量和静置后底部 1/10 悬浮液的含孢量，计算样品的悬浮率 。

　　5 . 1 1 . 2 试剂

　　稀释剂名称(应为产品说明书推荐的稀释剂或产品的悬浮油介质，如果采用其他稀释剂应作必要说明)。

　　5 . 1 1 . 3 仪器及设备

　　烧杯：100 mL、200 mL ;

　　具塞量筒：250 mL(有 25 mL刻度线);

　　减压泵(或水流减压装置);

　　恒温水浴锅(或恒温培养箱);

　　玻璃吸管：(长约 40 cm,内径约 5 mm,吸头呈弯勾形);

　　光学显微镜：(物镜 × 目镜 400 倍);

　　血球计数板：(1/400 mm2 × 0 . 1 mm , 25 × 16 规格);

　　手揿计数器：(1 ~ 9999) 。

　　5 . 1 1 . 4 试验步骤

　　a) 根据油悬浮剂含 菌 量，直 接 量 取 混 合 均 匀 的 试 样 250 mL , 或 规 定 体 积(建 议 50 、100 、150 或

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　　GB/T 21459 . 4—2008

　　200 mL,以稀释后利于显微计数或菌落形成单位计数为宜)的试样，加稀释剂至 250 mL,盖上塞子 。

　　b) 以量筒中部为轴心，在 1 min 内上下颠倒 30 次(尤其是开始，应适当放气，防止反冲)，每次颠倒约 2 s 。

　　c) 直立量筒，打开塞子，静置约 30 s,用小口长吸管快速从量筒接近中部处取样，用于测定悬浮液的含菌量(方法参见 5 . 3) ,再将量筒放入 30℃±1℃恒温水浴或恒温箱中，静止 30 min 。

　　d) 轻轻取出，将玻璃吸管与减压泵或水流减压装置连接，插入悬浮液中，使吸管的弯头顶端位于液面下几毫米处，在 15 s ~ 20 s 内将 9/10 的悬浮液移出 。注意保持吸管弯头顶端总是位于液面下几毫米处，不要摇动或搅起量筒内的沉降物 。

　　e) 对量筒底部剩余的 25 mL悬浮液，按 5 . 3 方法测定其含菌量，计算悬浮率 。

　　5 . 1 1 . 5 计算

　　悬浮率 犡2 ( %)按式(2)计算：

　　犡

　　…………………………( 2 )

　　式中：

　　犮1 — 静置前悬浮液含菌量，单位为(单位名称)每毫升[(单位名称)/mL] ;

　　犮2 — 静置后底部 1/10 悬浮液含菌量，单位为(单位名称)每毫升[(单位名称)/mL] 。

　　5 . 12 贮存稳定性和(或)热贮稳定性试验

　　按照 GB/T 21459 . 1—2008 中 5 . 11 编写，但测定时取样量应适当增加，并增加说明为了去除制剂中可能干扰测定的助剂等物质而进行的前处理 。

　　5 . 13 低温稳定性

　　建议将制剂样品贮存于 0 ℃ ±2 ℃ 7 d ,按 5 . 4 测定活菌率，按 5 . 7 测定毒力 。

　　6 检验规则

　　应符合 GB/T 1604 有关规定 。极限值的处理按 GB/T 1250 ,采用修约值比较法 。

　　7 标志 、标签 、包装和贮运

　　7 . 1 标志标签

　　真菌农药油悬浮剂的标志及标签应符合 GB 3796 的规定 。标签上还应注明贮运条件 。

　　7 . 2 包装

　　综合企业具体包装情况及油悬浮剂的真菌特性要求进行编写 。应符合 GB 3796 和 GB/T 191 的规定 。根据用户要求或订货协议，可采用其他形式的包装 。

　　7 . 3 贮运

　　真菌农药油悬浮剂包装件应贮存于干燥 、阴凉 、避光的库房内，并根据产品特性和需要，指明贮运限定温度及条件 。运输时要轻拿轻放，避免挤压 、碰撞或剧烈震荡，防止雨淋 、日 晒 。不应与粮食 、食品 、饲料混放或混运 。避免与皮肤 、眼睛接触，防止进入口鼻 。

　　对于以低燃点 、低闪点和高挥发度的油作介质的产品，应特别规定贮运条件和注意事项 。

　　7 . 4 安全

　　在使用说明书或包装标签上应注明毒性 、防护措施等 。

　　7 . 5 保证期

　　应规定在规定贮运条件下真菌农药油悬浮剂从生产 日期算起活孢率不低于标明值 80%的期限 。

　　5

　　GB/T 21459 . 4—2008

　　附 录 A

　　(规范性附录)

　　产品有效成分描述格式

　　产品中有效成分的名称 、登记号和基本生化参数如下：

　　a) 有效成分 1

　　菌种中文通用名：……

　　菌种中文别名：……

　　菌种拉丁文学名：属，种，亚种 、变种或专化型及定名人 。

　　菌种拉丁文学名异名：属，种，亚种 、变种或专化型 。

　　菌种来源及株系分型或代码：获得地点或单位 、原寄主 、人工处理如诱变等 。

　　生物学分类地位：纲 、目 、科 。

　　鉴定特征：形态学 、生物化学或遗传学特征 。应尽可能提供从国际公认机构能得到的鉴定特征的参考文献 。如果使用基因修饰过的菌株，还应陈述相关信息，对有特定基因序列的应指出登记号 。

　　菌种保藏机构及登记号或编号：……

　　菌种保存条件：温度 、湿度 、避光 、封装等 。

　　有效成分主要存在形态：分生孢子 、芽生孢子 、菌丝体等 。

　　生物活性：防治虫 、螨 、菌 、草 、鼠或线虫等的类别或具体名称 。

　　适宜生长条件：培养基碳 、氮源，特需组分;最适温 、湿度;其他指定条件 。

　　适宜贮存温 、湿度：……

　　b) 有效成分 2

　　如果产品中含 2 种或 2 种以上有效成分，亦应参照 a)分别列出其各项相关参数 。

　　注：此部分应写在标题之后 、范围之前 。

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