GB/T 44367-2024 化妆品中限用组分二氨基嘧啶氧化物的测定 高效液相色谱法

　　ICS 71.100.70 CCS Y 42

　　中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准

　　GB/T 44367—2024

　　化妆品中限用组分二氨基嘧啶氧化物的测定 高效液相色谱法

　　Determination of restricted 2,4-diamino-pyrimidine-3-oxide in cosmetics—

　　High performance liquid chromatography

　　2024-08-23 发布 2025-03-01 实施

　　发

　　国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会

　　

　　布

　　GB/T 44367—2024

　　目 次

　　前言 Ⅲ

　　1 范围 1

　　2 规范性引用文件 1

　　3 术语和定义 1

　　4 原理 1

　　5 试剂和材料 1

　　6 仪器设备 2

　　7 试样制备和试验步骤 2

　　7.1 试样制备 2

　　7.2 高效液相色谱测定参考条件 2

　　7.3 标准工作曲线绘制 2

　　7.4 试样测定 2

　　7.5 空白试验 3

　　8 试验数据处理 3

　　9 回收率 3

　　10 精密度 3

　　附录 A (资料性) 二氨基嘧啶氧化物标准品的信息 4

　　附录 B (资料性) 二氨基嘧啶氧化物标准溶液的色谱图和光谱图 5

　　Ⅰ

　　GB/T 44367—2024

　　前 言

　　本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第 1 部分 ：标准化文件的结构和起草规则》 的规定起草。

　　请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

　　本文件由中国轻工业联合会提出。

　　本文件由全国香料香精化妆品标准化技术委员会 (SAC/TC 257)归口。

　　本文件起草单位： 苏州世谱检测技术有限公司、苏科世谱生物技术(苏州) 有限公司、苏州质量检测科学研究院、苏州市科耐瑞检测技术有限公司、江苏奇力康皮肤药业有限公司、广州质量监督检测研究院、上海香料研究所有限公司、江苏省产品质量监督检验研究院、完美(广东) 日用品有限公司、河北省食品检验研究院、江苏省食品药品监督检验研究院、清华大学、常州市食品药品纤维质量监督检验中心、深圳市药品检验研究院、苏州市药品检验检测研究中心、苏州大学、常州大学、广东悠质检测技术有限公司、珀莱雅化妆品股份有限公司、美出莱(杭州) 化妆品有限责任公司、浙江方圆检测集团股份有限公司、上海永熙信息科技有限公司、上海其然生物科技有限公司。

　　本文件主要起草人： 何霜 、卢剑 、朱丹丹 、方方 、李建祥 、张岩 、吴克 、代丹 、郭燕华 、结莉、康薇 、王怡、张迎阳、叶嘉荣、叶竹洪、杨斌、刘丹阳、寻知庆、宋淑文、汪晨霞、黄宏霞、李适炜、孙静霞 、萧慧珍 、杨铭 、孙淑蓉 、 喻竟 、袁旻嘉 、卢应红 、姜雷 、高龙 、顾盼 、刘群林 、高红影、朱钇蓉。

　　Ⅲ

　　GB/T 44367—2024

　　化妆品中限用组分二氨基嘧啶氧化物的

　　测定 高效液相色谱法

　　警示─使用本文件的人员应有正规实验室工作的实践经验。本文件并未指出所有可能的安全问题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关规定的条件。

　　1 范围

　　本文件描述了化妆品中二氨基嘧啶氧化物的高效液相色谱测定方法的原理 、试剂和材料 、仪器设备、试样制备和试验步骤、试验数据处理、 回收率和精密度等内容。

　　本文件适用于水剂类、乳液类、膏霜类等发用化妆品中二氨基嘧啶氧化物的测定。

　　本文件方法检出限为 3.0 mg/kg，定量限为 10.0 mg/kg。

　　2 规范性引用文件

　　下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款 。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件 ;不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单) 适用于本文件。

　　GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

　　3 术语和定义

　　本文件没有需要界定的术语和定义。

　　4 原理

　　试样经 10% 甲醇涡旋振荡，超声提取，离心，正己烷液液萃取净化过滤后，得到目标物待测溶液。将目标物待测溶液注入高效液相色谱仪，采用二极管阵列检测器检测，保留时间和紫外吸收光谱图定性，外标法定量。

　　5 试剂和材料

　　除非另有规定，仅使用色谱纯试剂。

　　5.1 水： GB/T 6682 ，一级。

　　5.2 甲醇。

　　5.3 正己烷。

　　5.4 10%(体积分数) 甲醇溶液 ：取 10 mL 甲醇(5.2) 加 90 mL 水(5.1) ，混合均匀 。

　　5.5 二氨基嘧啶氧化物标准品： 纯度不小于 98%，标准品的英文名称、CAS 号、分子式、相对分子质量和化学结构式见附录 A 中表 A.1。

　　5.6 标准储备液： 准确称取标准品(5 . 5)0 . 01g(精确至 0.000 1 g) 于 10 mL 容量瓶中，用甲醇(5.2) 溶解并稀释至刻度，即得质量浓度为 1 000 µg/mL 的标准储备液 。贮存期为：2 ℃ ~ 8 ℃ 避光保存，6 个月。

　　1

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　　5.7 滤膜 ：孔径 0.45 µm，材质为聚四氟乙烯。

　　6 仪器设备

　　6.1 高效液相色谱仪 ：配有二极管阵列检测器。

　　6.2 分析天平 ：感量 0.001 g 和 0.000 1 g。

　　6.3 漩涡振荡器。

　　6.4 超声波清洗仪 ：工作频率不低于40 kHz。

　　6.5 离心机 ：最高转速不低于4 000 r/min。

　　6.6 容量瓶：10 mL。

　　6.7 具塞离心管：50 mL。

　　6.8 移液管或移液器： 0.2 mL、1 mL、10 mL 和 20 mL。

　　7 试样制备和试验步骤

　　7.1 试样制备

　　取样前应将试样充分混匀 。水剂类试样将试样摇匀后取样 ;膏霜类、乳液类试样将试样挤出、混匀后取样。

　　称取 1 g(精确至 0.001 g) 试样，置于 50 mL 具塞离心管中，准确加入 20 mL 10% 甲醇溶液(5.4) ，涡旋混合混匀，超声 5 min。然后加入 10 mL 正己烷(5.3) ，涡旋振荡 1 min ，4 000 r/min 离心 5 min，下层清液经滤膜过滤，滤液作为试样溶液备用 。

　　7.2 高效液相色谱测定参考条件

　　高效液相色谱测定参考条件如下：

　　a) 色谱柱规格： 亲水性 C18色谱柱， 5 μm ，250 mm × 4.6 mm ，或性能相当者;

　　b) 流动相： 甲醇(5.2):水= 1:9;

　　c) 流动相流速：0.8 mL/min;

　　d) 柱温：25 ℃;

　　e) 检测波长：287 nm;

　　f) 进样量：10 μL。

　　7.3 标准工作曲线绘制

　　标准工作溶液： 用 10 % 甲醇溶液 (5 . 4) 逐级稀释标准储备液 (5 . 6) ，得 到 0.5 µg/mL、 1.0 µg/mL、2.0 µg/mL、5.0 µg/mL、10.0 µg/mL、20.0 µg/mL、50.0 µg/mL 标准工作溶液，按色谱条件(7.2) 进行测定，以色谱峰的峰面积为纵坐标、与其对应的溶液浓度为横坐标作图，绘制标准工作曲线。

　　二氨基嘧啶氧化物标准溶液的高效液相色谱图见附录 B 中图 B.1，紫外吸收光谱图见图B.2。

　　7.4 试样测定

　　按色谱条件测定试样溶液(7.1) ，如果检出目标物质的色谱峰的保留时间与标准品一致，且紫外吸收光谱图与标准品一致，可认定试样中存在目标物质，记录色谱峰的峰面积，以外标法定量 。试样溶液中被测物的响应值均应在标准曲线的线性范围之内，超出线性范围的试样溶液可用 10% 甲醇溶液(5.4) 适当稀释后进行测定。

　　2

　　GB/T 44367—2024

　　7.5 空白试验

　　除不称取试样外，均按 7.1～7.4 步骤进行测定。

　　8 试验数据处理

　　试样中二氨基嘧啶氧化物含量按公式(1) 计算：

　　X k …………………………(1)

　　式中：

　　X ─试样中二氨基嘧啶氧化物的含量， %(质量分数);

　　ρ ─从标准曲线得到的试样溶液中二氨基嘧啶氧化物的质量浓度(应扣除空白值) ，单位为微克每毫升 (μg/mL);

　　V ─加入 10% 甲醇溶液的体积，单位为毫升 (mL);

　　m ─试样质量，单位为克 (g);

　　k ─超线性范围的稀释倍数。

　　计算结果大于或等于 1.0%时，结果保留三位有效数字 ;结果小于 1.0%时，保留两位有效数字。

　　9 回收率

　　在添加浓度为 0.001% ~ 1.5%范围内，回收率应在 80% ~ 110%之间。

　　10 精密度

　　在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的 10%。

　　3

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　　附 录 A

　　(资料性)

　　二氨基嘧啶氧化物标准品的信息

　　二氨基嘧啶氧化物的英文名称、CAS 号、分子式、相对分子质量及化学结构式见表 A.1。

　　表 A.1 二氨基嘧啶氧化物标准品的信息

　　序号

　　中文名称

　　英文名称

　　CAS号

　　分子式

　　相对分

　　子质量

　　化学结构式

　　1

　　二氨基嘧啶氧化物

　　2,4-Diamino-pyrimidine-3-oxide

　　74638-76-9

　　C4H6N4O

　　126.12

　　4

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　　附 录 B

　　(资料性)

　　二氨基嘧啶氧化物标准溶液的色谱图和光谱图

　　二氨基嘧啶氧化物标准溶液的高效液相色谱图见图 B.1，紫外吸收光谱图见图B.2。

　　图 B.1 二氨基嘧啶氧化物标准溶液的高效液相色谱图

　　图 B.2 二氨基嘧啶氧化物标准溶液的紫外吸收光谱图

　　5