DB21/T 4453-2026 辽东楤木组培繁殖技术规程

ICS 65.020.20 CCS B 61

21

辽宁 省地 方标 准

DB21/T 4453—2026

辽东楤木组培繁殖技术规程

Technical regu lat ion for t issue culture of Ara lia elata

2026-05-30 发布 2026-06-30 实施

辽宁省市场监督管理局发 布

DB21/T 4453—2026

前言

本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由辽宁省林业和草原局提出并归口。

本文件起草单位：辽宁省森林经营研究所。

本文件主要起草人：林晓坤、姜冬、常婧、张群野、宋诗雨、王品、马晓雨、高源、温福欣、苏蕾、杨双赫、罗彦昕、金鑫、尚福强、潘丕克、李沫蕊、任万福、任如月、张妍、于璐、邵立郡、刘晴、张丽艳、李成成、张利萍。

本文件发布实施后，任何单位和个人如有问题和意见建议，均可以通过来电和来函等方式进行反馈，我们将及时答复并认真处理，根据实际情况依法进行评估及复审。

归口管理部门通讯地址： 辽宁省林业和草原局(沈阳市和平区太原北街2号)，联系电话： 024-23448927。

标准起草单位通讯地址：辽宁省森林经营研究所(丹东市元宝区金山镇新建街600号)，联系电话： 0415-4157090。

I

DB21/T 4453—2026

辽东楤木组培繁殖技术规程

1 范围

本文件规定了辽东楤木(Aralia elata)组培繁殖技术的术语和定义、培养基制备、外植体采集及处理、诱导培养、继代培养、生根培养、炼苗及移栽、苗木出圃和档案管理等技术与要求。

本文件适用于辽东楤木组培繁殖育苗。

2 规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T 42478 农产品生产档案记载规范

LY/T 1882 林木组织培养育苗技术规程

3 术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

辽东楤木 Aralia elata

辽东楤木(Aralia elata)，又名刺龙牙、刺嫩芽、刺老芽等，属五加科楤木属，落叶灌木或小乔木。形态特征和生物学特性参见附录A。

3.2

丛芽苗 multip le shoots

培养材料在培养基上分化的多个基部相连的带芽小苗。

3.3

诱导培养 induction culture

外植体接种到诱导培养基上，在适宜温湿度和光照条件下分化产生不定芽的过程。

3.4

继代培养 subculture

诱导培养产生的不定芽切分成单株，转接到增殖培养基上继续培养扩增的过程。

3.5

1

DB21/T 4453—2026

生根培养 rooting culture

继代培养获得的无根芽苗转接到生根培养基上产生根的过程。

4 培养基制备

4.1 培养基配方

4.1.1 基本培养基

采用MS培养基，具体成分按照附录B执行。

4.1.2 诱导培养基

MS+0.5 mg/L 6-BA+30 g/L 蔗糖+7 g/L 琼脂，pH 5.8～6.2。

4.1.3 增殖培养基

MS+1.5 mg/L 6-BA+0.6 mg/L IAA+0.2 mg/L GA3+30 g/L 蔗糖+7 g/L 琼脂，pH 5.8～6.2。

4.1.4 生根培养基

1/2MS+0.2 mg/L IAA+30 g/L 蔗糖+7 g/L 琼脂，pH 5.8～6.2。

4.2 培养基配制

培养基配制方法按照LY/T 1882相关要求执行。

4.3 培养基灭菌

将培养基放入高压蒸汽灭菌器内，在压力0.105 MPa下、温度121 ℃时，灭菌20 min。增殖培养基高压灭菌后放置在已灭菌的超净工作台中，冷却至50 ℃~60 ℃ , 加入通过0.22 μm滤膜过滤除菌的GA3。

4.4 培养基保存及使用

灭菌后的培养基应保存于洁净环境中，注意避光和防尘。培养基常温条件下7 d内使用，2 ℃~4 ℃条件下14 d内使用。

5 外植体采集及处理

5.1 外植体采集

春季芽开始萌发时采集。选择无病虫害、生长健壮的优良无性系或优良单株，剪取萌发长度1 cm~ 2 cm的嫩芽作为外植体，带回组培室，用流水冲洗干净。

5.2 外植体消毒

外植体在超净工作台先用75%乙醇溶液浸泡消毒15 s，无菌水冲洗3次，再用0.1%升汞消毒10 min，期间不断摇晃，用无菌水冲洗4次～5次，最后用无菌滤纸吸干水分，置于无菌不锈钢小盘上。

6 诱导培养

2

DB21/T 4453—2026

6.1 外植体接种

在超净工作台上，用已灭菌的镊子和解剖刀剥去外植体鳞片和大部分幼叶，接种于诱导培养基中，数量为3个～4个/瓶。将瓶口封好，备注材料名称、编号、接种日期等。

6.2 培养条件

温度：25±2 ℃ , 光照强度：1500 lux～2000 lux，光照时间：12 h/d～14 h/d。

6.3 芽诱导

将接种在诱导培养基的外植体置于培养室培养30 d～35 d，萌发产生不定芽。

7 继代培养

7.1 继代接种

将外植体诱导出的芽或继代培养产生的丛芽苗连带愈伤组织进行切分，每块愈伤组织1个～2个芽，转接至增殖培养基，一般3块～4块/瓶。

7.2 继代周期

每隔30 d～35 d将继代苗转接至增殖培养基，继代培养控制在8代内，培养条件见6.2。

8 生根培养

将生长健壮、高度2 cm～3 cm的丛芽苗切分成单株，切除全部愈伤组织，转接至生根培养基，接种数量10株/瓶，培养25 d～30 d，培养条件见6.2。

9 炼苗及移栽

9.1 炼苗

选择苗高3 cm～4 cm、具3片～5片绿叶、根数≥5条、根长2 cm以上、生长健壮的组培苗进行炼苗。炼苗在温室内进行，遮光70%～80%，温度控制在18 ℃~28 ℃ , 湿度80%～90%，去除培养瓶的封口材料，开瓶锻炼1 d～3 d。

9.2 移栽

9.2.1 移栽时间

组培苗移至温室栽培可全年进行。

9.2.2 移栽容器及基质

移栽容器为上口径3.4 cm，底部1.5 cm，深度4.0 cm的穴盘。移栽基质为草炭、蛭石与珠岩，按照3 ∶ 1 ∶ 1的比例混匀，装满穴孔，浇透水。

9.2.3 洗苗

将组培苗从培养瓶取出，用18 ℃~20 ℃清水洗净根部培养基，保湿备用。

3

DB21/T 4453—2026

9.2.4 穴盘移栽

用直径0.5 cm木棍在穴盘基质上插孔，镊子轻夹幼苗根部轻置于孔底，让根系尽量舒展，摆正小苗，用基质覆盖至组培苗基部，稍微压实。

9.3 移栽管理

9.3.1 穴盘苗管理

将穴盘组培苗摆放在温室拱棚中，遮阴50%，每天喷雾，保证拱棚内空气湿度90%以上，白天温度控制在23 ℃~30 ℃ , 夜间温度不低于15 ℃。移栽10 d～14 d即缓苗期过后逐渐揭膜通风，减少喷雾次数，20 d后可撤掉拱棚薄膜。移栽30 d后，喷施0.2%的尿素和磷酸二氢钾1 次。

9.3.2 营养钵苗管理

组培苗在穴盘中生长30 d～40 d后，可移栽至营养钵中。移栽时要求基质不散落，埋土至根基，压实浇透水。移栽后遮阴35%～40%，1个月后撤掉遮阴网。

10 苗木出圃

10.1 苗木等级划分

对生长健壮，地径、苗高和根系达到一定标准的苗木进行等级划分，详见附录C。

10.2 苗木出圃

营养钵苗生长达到苗木等级 Ⅰ、 Ⅱ级，即可成苗、出圃。

11 档案管理

建立育苗管理档案，具体按GB/T 42478执行。

4

DB21/T 4453—2026

A

A

附录 A

(资料性)

辽东楤木形态特征和生物学特性

落叶灌木或小乔木，高达1.5 m～6m。树皮灰色，少分枝。小枝灰褐色，密生或疏生针刺。二至三回奇数羽状复叶，长达80 cm，总叶柄长，基部抱茎，常集生于枝端;叶柄、叶轴及小叶轴均有刺;叶片卵形或椭圆状卵形，基部圆形，宽楔形或微心型，先端渐尖，边缘疏生锯齿。伞形花序聚生为伞房状圆锥花序，顶生;花萼杯状，萼齿5;花瓣5，淡黄色;雄蕊5;子房下位，5室，花柱5，离生或基部合生。果具5棱，熟时黑色，径为0.4 cm。花期7月～8月，果期9月～10月。

产于中国东北及河北等地。朝鲜、俄罗斯和日本有分布。

喜光，较耐阴，喜湿润肥沃土壤，常生于阔叶林及针阔混交林内或林缘、山谷、阴坡较湿润处。

5

DB21/T 4453—2026

B

B

附录 B

(规范性)

MS 基本培养基配方

MS基本培养基配方见表B.1。

表 B.1 MS 基本培养基配方

母液种类及倍数

试剂

配方规定量(mg/L)

配1 L母液称取量(mg)

配1 L培养基吸取量

(mL)

大量元素(50x)

KNO3

1900

9500

20

NH4NO3

1650

82500

MgSO4 ·7H2O

370

18500

KH2PO4

170

8500

CaCl2 ·2H2O

440

22000

铁元素(500x)

Na2 ·EDTA ·2H2O

37.3

18650

2

FeSO4 ·7H2O

27.8

13900

有机物(500x)

盐酸硫胺素

0.1

50

2

盐酸吡哆醇

0.5

250

烟酸

0.5

250

甘氨酸

2

1000

肌醇

100

50000

微量元素(500x)

MnSO4 ·4H2O

22.3

11150

2

ZnSO4 ·7H2O

8.6

4300

H3BO3

6.2

3100

KI

0.83

415

Na2MoO4 ·2H2O

0.25

125

CuSO4 ·5H2O

0.025

12.5

CoCl2 ·6H2O

0.025

12.5

6

DB21/T 4453—2026

C

C

附录 C

(资料性)

辽东楤木组织培养苗木等级划分

辽东楤木组织培养苗木等级划分参照表C.1执行。

表 C.1 辽东楤木组织培养苗木等级划分

组培苗

苗木等级

综合控制指标

Ⅰ级苗

Ⅱ级苗

地径(cm)

苗高(cm)

侧根

地径(cm)

苗高(cm)

侧根

长度(cm)

根数(个)

长度(cm)

根数(个)

≥0.8

≥10

≥12

≥8

0.5～0.8

6～10

8～12

5～8

苗健壮、

叶完整、根系无损伤、无

病虫害。

7