DB13/T 6044-2025 小麦抗茎基腐病鉴定技术规程

小麦抗茎基腐病鉴定技术规程总结

1. 范围

本规程规定了小麦对假禾谷镰刀菌引起的茎基腐病的抗性鉴定方法，涵盖室内苗期和田间成株期的接种体制备、鉴定流程、病情分级及抗病性评价标准，适用于小麦品种（系）的抗病性筛选。

2. 核心术语

• ​白穗​：由假禾谷镰刀菌侵染导致的茎基褐变腐烂，表现为整株枯死穗，拔起时无根系。
• ​分生孢子悬浮液接种体​：通过液体培养制备的孢子悬浮液（浓度1.0×10⁶个/mL），用于苗期接种。
• ​麦粒接种体​：病菌在灭菌麦粒上培养后粉碎的颗粒（直径约2mm），用于田间接种。

3. 接种体制备

3.1 分生孢子悬浮液

1. ​病菌活化​：假禾谷镰刀菌在PDA培养基（25℃黑暗培养5-7天）上活化。
2. ​液体培养​：菌饼接种于CMC液体培养基，25℃振荡培养3-5天，过滤后调整浓度并加入0.5%吐温20。
3. ​保存​：4℃冷藏备用。

3.2 麦粒接种体

1. ​麦粒灭菌​：小麦籽粒浸泡后121℃高压灭菌30分钟。
2. ​接种培养​：菌饼接种灭菌麦粒，25℃黑暗培养20天至菌丝长满。
3. ​粉碎处理​：干燥后粉碎成颗粒，田间播种时与细沙混合使用。

4. 抗病性鉴定方法

4.1 室内苗期鉴定

• ​操作流程​：种子消毒催芽→孢子悬浮液浸种→穴盘播种（每穴2粒，10粒/品种，3次重复）→温室培养（25℃/20℃昼夜）。
• ​对照设置​：抗病对照‘Sunco’、感病对照‘新麦26’。
• ​调查时间​：播种5周后，感病对照充分发病时调查。

4.2 田间成株期鉴定

• ​病圃要求​：常发病区，地势平坦，周围设2m保护行。
• ​接种方法​：菌土覆盖播种（菌土比例15g/m²），每品种4行（1m/行，100粒/行），3次重复。
• ​管理措施​：足墒播种、均匀施肥，扬花期后停水，禁用杀菌剂。
• ​调查时间​：乳熟末期统计白穗率或茎基褐变严重度。

5. 病情调查与分级

5.1 室内苗期分级（0-5级）

• ​病情指数（DI）​​：按公式 DI=∑(Si×Fi)5×N×100DI = /frac{/sum (S_i /times F_i)}{5 /times N} /times 100DI=5×N∑(Si​×Fi​)​×100 计算。

5.2 田间成株期调查

• ​白穗率​：乳熟末期统计中间2行白穗数，计算相对白穗率（RWEP=WEPicWEPccRWEP = /frac{WEP_{ic}}{WEP_{cc}}RWEP=WEPcc​WEPic​​）。
• ​严重度分级（0-5级）​​：

  级值	症状描述
  0	茎基无褐变
  1	第1茎节褐变＜1/2
  2	第1茎节褐变＞1/2
  3	第2茎节褐变
  4	第3茎节褐变
  5	茎枯死或白穗

• ​病情指数与相对病情指数（RDI）​​：计算同苗期，RDI=DIicDIccRDI = /frac{DI_{ic}}{DI_{cc}}RDI=DIcc​DIic​​。

6. 抗病性评价标准

6.1 有效性判定

• 室内苗期：感病对照DI≥40.0；
• 田间成株期：感病对照DI≥30.0或白穗率≥3%。

6.2 评价等级

• ​室内苗期​：

  DI范围	抗性等级
  0	免疫（I）
  0.1-10	高抗（HR）
  10.1-30	中抗（MR）
  30.1-40	中感（MS）
  >40	高感（HS）

• ​田间成株期​：

  相对值（RWEP或RDI）	抗性等级
  0	免疫（I）
  0.01-0.40	高抗（HR）
  0.41-0.80	中抗（MR）
  0.81-1.20	中感（MS）
  >1.20	高感（HS）

6.3 重复鉴定

田间初筛中抗及以上品种需次年重复鉴定，最终以成株期结果为主。

7. 附录内容

• ​附录A​：详述假禾谷镰刀菌的分离鉴定、致病性检测及周年侵染循环（秸秆还田加重病原积累）。
• ​附录B​：PDA与CMC培养基的制备方法。
• ​附录C​：提供苗期、成株期病情调查记录表模板，规范数据记录格式。

8. 关键点总结

1. ​接种体标准化​：严格把控孢子浓度（1.0×10⁶个/mL）和麦粒菌土配比（15g/m²）。
2. ​环境控制​：温室温度（25℃/20℃）、田间病圃管理（足墒、停水期）确保发病一致性。
3. ​分级科学性​：苗期侧重叶鞘褐变进程，成株期结合白穗率与茎基褐变程度。
4. ​评价严谨性​：以相对病情指数（RDI）消除环境干扰，重复鉴定提高结果可靠性。

本规程为小麦抗茎基腐病育种和品种推广提供了标准化技术支撑，适用于科研单位、种子企业及植保部门。